透射電鏡服務(wù)實(shí)驗(yàn)服務(wù)

透射電鏡

Transmission Electron Microscope,簡(jiǎn)稱TEM,透射電鏡可以觀察樣品的內(nèi)部精細(xì)結(jié)構(gòu)，這些結(jié)構(gòu)即亞顯微結(jié)構(gòu)或者超微結(jié)構(gòu)。透射電鏡使用的是透射電子,并收集透過(guò)樣品的電子,從而提供了樣品的內(nèi)部結(jié)構(gòu)的信息，如晶體結(jié)構(gòu)、形態(tài)以及應(yīng)力狀態(tài)的信息。目前進(jìn)的TEM其空間分辨率達(dá)到了pm級(jí)別。由于透射電子的要求，TEM的樣品必須制備成超薄切片。通常為50-100 nm,樣品制備比較繁瑣，常用的方法有超薄切片法、冷凍超薄切片法、冷凍蝕刻法、冷凍斷裂法等。

實(shí)驗(yàn)意義

1透射電鏡是表*各種樣品的有力工具，它的多功能性和*的空間分辨率使其在許多應(yīng)用中非常有價(jià)值。

2.TEM能夠觀察樣品的內(nèi)部結(jié)構(gòu)，同時(shí)在病理診斷中可以補(bǔ)充和糾正光鏡診斷的疑難問(wèn)題，可以提高病理診斷的準(zhǔn)確性。

實(shí)驗(yàn)步驟

透射電鏡生物樣品的制備:

①取小于1立方毫米的組織;

②用2.5%戊二醛(磷酸緩沖液配制)固定2小時(shí)，0.1M的磷酸緩沖液漂洗3次*15 min; .

③1 %鋨酸固定液固定2小時(shí)，0.1M的磷酸緩)沖液漂洗3次*15 min; .

④梯度乙醇進(jìn)行脫水，4°C進(jìn)行:

⑤包埋:使用純丙酮+包埋液(2:1) 室溫處理4小時(shí)，純丙酮+包埋液(1:2) 室溫過(guò)夜，純包埋液37°C處理3小時(shí);

⑥固化: 37度烘箱過(guò)夜，45度烘箱12小時(shí)，60度烘箱24小時(shí);

⑦超薄切片機(jī)切片，厚度在50 nm左右;

⑧3%醋酸鈾枸櫞酸鉛雙染色; .

⑨透射電鏡觀察，拍片。

結(jié)果展示

實(shí)驗(yàn)完成周期及交付標(biāo)準(zhǔn)

1.實(shí)驗(yàn)周期: 1個(gè)月左右

2.交付標(biāo)準(zhǔn):電鏡圖片、病理報(bào)告、實(shí)驗(yàn)報(bào)告(實(shí)驗(yàn)步驟.試劑、儀器等)

實(shí)驗(yàn)需與客戶確認(rèn)的信息

1.樣本的種屬

2.樣本類(lèi)型，是組織還是細(xì)胞

3.樣本數(shù)量

4.透射電鏡分析要求、拍照要求或是參考文獻(xiàn)

參考文獻(xiàn)

[1XuT,Lus . Zhang H. Tasmissin elecron microscope evidence of elocytes in canine dura materJI. Jounal ofCellular and Molecular Medicine, 2016, 20(1).5.

(21Cizmar P，Yuana Y. Detecion and Characteizaton of Exacllular Vesicles by Tansmission and Cryo-Transmission Electron MicroscopyYJ]. Methods in Molecular Biology, 2017, 1660.221.

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