1. 產(chǎn)品概述 

EHA105 菌株由 EHA101 菌株改造而來，為 C58 型背景，核基因中含有篩選標(biāo)簽（抗性基 Rif），為了便于轉(zhuǎn)化操作，此菌株攜帶一無自身轉(zhuǎn)運(yùn)功能的琥珀堿型Ti質(zhì)粒pEHA105(pTiBo542DT-DNA)， 此質(zhì)粒含有 vir 基因(vir 基因是 T-DNA 插入植物基因組必需的元件，pEHA105(pTiBo542DT-DNA)質(zhì)粒自身的 T-DNA 轉(zhuǎn)移功能被破壞，但可以幫助轉(zhuǎn)入的雙元載體 TDNA 順利轉(zhuǎn)移)。本公司生產(chǎn)的 EHA105 化學(xué)轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞經(jīng)特殊工藝制作，經(jīng) pCAMBIA2301 質(zhì)粒檢測轉(zhuǎn)化效率≥104cfu/μgDNA。 

2. 產(chǎn)品組分 

基因型：C58 (RifR) Ti pEHA105 (pTiBo542DT-DNA) Succinamopine 

3. 保存條件 

-80℃保存至少 6 個月，請勿將本品置于-20℃或者液氮中保存。干冰運(yùn)輸。

4. 適用場景 

本產(chǎn)品適用于水稻、煙草等植物的轉(zhuǎn)基因操作。 

5. 使用方法 

1. 將感受態(tài)細(xì)胞從-80℃中取出，置于冰浴中融化； 

2. 將待轉(zhuǎn)化 DNA 加入到 100μL 感受態(tài)細(xì)胞中，用手管底混勻，依次于冰上靜置 10 分鐘、液氮 5 分鐘（或干冰乙醇浴和-80℃冰凍）、37℃水浴 5 分鐘、冰浴 5 分鐘； 

3. 加入 900μL 無抗生素的 YEB 液體培養(yǎng)基，于 28℃振蕩培養(yǎng) 2~3 小時； 

4. 6000rpm 離心 1 分鐘收菌，留取 100μL 左右上清輕輕吹打重懸菌塊涂布于含相應(yīng)抗生素的 YEB 平板上，倒置放于 28℃培養(yǎng)箱培養(yǎng) 2-3 天。

※當(dāng)平板只含有 50μg/mL Kan 時，28℃培養(yǎng) 48h 即可；平板中同時加入 50μg/mL Kan，20μg/mL Rif 時，需 28℃培養(yǎng) 60h；如果使用的平板含有 50μg/mL Rif 則需要 28℃培養(yǎng) 72-90h。