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從底物追蹤到機制破解,穩(wěn)定同位素動物代謝研究技術方案

閱讀:514      發(fā)布時間:2025-11-21
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穩(wěn)定同位素技術正以代謝探針"的創(chuàng)新角色,重塑動物代謝研究的認知邊界。其核心優(yōu)勢在于突破傳統(tǒng)靜態(tài)分析的局限,憑借標記底物與生物體內源分子的天然兼容性,實現(xiàn)代謝過程的實時動態(tài)追蹤、多維度通量量化及未知反應挖掘,為解析動物正常生理代謝、疾病相關代謝紊亂機制提供了高精準、無干擾的研究工具,成為連接整體表型與分子機制的關鍵技術橋梁。

 

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文獻一:算清全身“流水賬"——Cell Metabolism 2025

哈佛大學團隊通過構建小鼠全機體能量通量模型",量化10種主要循環(huán)營養(yǎng)素的氧化、儲存、再循環(huán)與互變速率,比較lean正常飲食組、HFD高脂飲食組leptin缺陷ob/ob小鼠一種先天性缺乏瘦素、極度肥胖且患有嚴重高血糖的模型的代謝經(jīng)濟差異。

 

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實驗聯(lián)合13C-底物輸注、血清LC-MS穩(wěn)定同位素分析儀,對10種主要營養(yǎng)素進行收支"盤點:循環(huán)乳酸鹽96%被氧化,而葡萄糖僅81%,必需氨基酸僅30%左右,顯示不同底物存在固有的氧化/儲存"分配比;在lean小鼠中,所有營養(yǎng)素的無效循環(huán)"通量(糖原-葡萄糖、TAG-NEFA、蛋白周轉)合計比氧化通量還高23%,浪費約9%的總ATP;ob/ob小鼠的循環(huán)通量整體升高2倍,ATP浪費增至12%,而HFD小鼠與lean差異不大,提示造成代謝“無效循環(huán)"亢進、能量大量浪費的關鍵原因,是瘦素這種激素的缺失,而不是單純的體重增加或脂肪過多,在臨床治療某些代謝綜合征時,糾正“瘦素信號缺失"比單純“減重"更為關鍵。


文獻二:把葡萄糖“追"到細胞器——Nature Communications 2025

Vanderbilt團隊Nature Communications發(fā)表了一項研究成果,給清醒小鼠持續(xù)靜脈輸注vs低劑量[U-13C?]-葡萄糖,他們發(fā)現(xiàn):高劑量組(40mg60min13CO2呼出達到平臺期,同時抽血測葡萄糖同位素標記,發(fā)現(xiàn)80%的葡萄糖分子6個碳全部被13C取代(M+6),把肝臟取出來測糖原,發(fā)現(xiàn)其葡萄糖單元里有3050%13C標記的,證明從血液里“現(xiàn)成"的13C-葡萄糖直接被肝臟抓去合成糖原,合成速度極快;結合MALDI-MS成像、MIMS-EM等技術,該研究把器官-細胞-細胞器"三級代謝圖譜串成一條時間軸。

 

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文獻三:運動時間是否重要?---Metabolism 2024

為了探討運動時間(晝夜節(jié)律)對運動后底物代謝的影響,以及肥胖如何改變這種時間-代謝"可塑性,Karolinska與哥本哈根團隊讓leanHFD小鼠分別在靜息期(ZT3)或活動期(ZT15)跑臺60min,隨后灌胃[U-13C6]-葡萄糖并連續(xù)測13CO2呼出。

結果顯示,Lean小鼠僅在活動期運動后表現(xiàn)出13C-葡萄糖氧化峰值下降、脂解升高,呈現(xiàn)時間-運動"雙重效應;HFD小鼠則失去晝夜差異,運動時間不再影響氧化曲線,提示肥胖導致代謝可塑性受損;經(jīng)脂肪組織離體實驗進一步表明運動對代謝的改善效果依賴晝夜時段

 

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北京易科泰生態(tài)技術有限公司作為深耕動物代謝研究領域的專業(yè)技術服務商,憑借其十余年行業(yè)積淀與國際技術合作資源,成為動物穩(wěn)定同位素相關設備在國內的核心推廣與技術支撐力量。公司提供的穩(wěn)定同位素氣體分析系統(tǒng)具備:

高精度檢測:δ13C精度達0.6

多參數(shù)同步監(jiān)測:同步測量13CO?H2O等關鍵指標,結合耗氧量VO2、二氧化碳產(chǎn)生量VCO2等多維度參數(shù),解鎖代謝過程全貌

響應快速1Hz測量頻率

無需額外耗材校準

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該系統(tǒng)可靈活搭配呼吸代謝系統(tǒng)、小動物跑步機等設備,形成從整體代謝到底物氧化追蹤的完整解決方案,高效開展動物生理生態(tài)、生物醫(yī)學等領域的創(chuàng)新研究。

 

參考文獻:

[1] Habashy A, Acree C, Kim K-Y, et al. Spatial patterns of hepatocyte glucose flux revealed by stable isotope tracing and multiscale microscopy [J]. Nature Communications, 2025, 16: 5850. DOI:10.1038/s41467-025-60994-w.

[2] Yuan B, Doxsey W, Tok ?, et al. An organism-level quantitative flux model of energy metabolism in mice [J]. Cell Metabolism, 2025, 37(4): 1-12. DOI:10.1016/j.cmet.2025.01.008.

[3] Pendergrast L A, Ashcroft S P, Ehrlich A M, et al. Metabolic plasticity and obesity-associated changes in diurnal postexercise metabolism in mice [J]. Metabolism, 2024, 155: 155834. DOI:10.1016/j.metabol.2024.155834.

[4] Welch K C Jr, Péronnet F, Hatch K A, et al. Carbon stable-isotope tracking in breath for comparative studies of fuel use [J]. Annals of the New York Academy of Sciences, 2016, 1365: 15-32. DOI:10.1111/nyas.12737.

 


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