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紫外可見分光光度計在生命科學(xué)中的應(yīng)用

時間:2022-7-7閱讀:2598
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目前,紫外可見分光光度計的應(yīng)用主要是在定量分析方面。先從生命科學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用來介紹,紫外可見分光光度計在生命科學(xué)中應(yīng)用非常廣泛。最主要的是以下5個方面:

 1.蛋白質(zhì)分析工作中的應(yīng)用

   紫外可見分光光度計在蛋白質(zhì)的分析中最主要的是用作蛋白質(zhì)含量檢測,一般是在蛋白質(zhì)的吸收峰上作吸光度測定。因為蛋白質(zhì)對紫外光的主要吸收波長為280nm,所以采用光度測量模式,將儀器的波長GOTO到蛋白質(zhì)的最大吸收峰波長280nm 上,測試其吸光度大小,就可完成對蛋白質(zhì)的定量檢測。

  2.核酸分析工作中的應(yīng)用

  紫外可見分光光度計在核酸分析中的應(yīng)用,主要是用來對核酸的定量檢測,因為核酸的吸收峰在260nm。我們只要采用光度測量模式,將紫外可見分光光度計的波長GOTO到核酸的最大吸收峰260nm 上,測試其吸光度大小就是了。

 3.氨基酸分析工作中的應(yīng)用

  紫外可見分光光度計在氨基酸分析中的應(yīng)用,主要是用來對氨基酸的定量檢測。因為氨基酸對紫外光的主要吸收波長為230nm,所以,我們只要采用光度測量模式。 將紫外可見分光光度計儀器的波長GOTO到氨基酸的最大吸收峰230nm 上, 就可測試其吸光度大小,從而計算出氨基酸的含量。但是,因為氨基酸分析時,一般是將它溶解在水中,而水在230nm 附近有很多干擾吸收線,所以,在用紫外可見分光光度計對氨基酸分析檢測時,要注意防止干擾的問題。此外,還需注意:只有少數(shù)氨基酸有紫外吸收。多數(shù)氨基酸無紫外吸收或很弱,測定時要衍生化后再測。

 4.糖類分析測試工作中的應(yīng)用

  紫外可見分光光度計在糖的分析中,主要是做定量檢測。因為糖對紫外光的主要吸收波長為218nm。所以,對糖類進(jìn)行分析時,只要采用光度測量模式。將紫外可見分光光度計儀器的波長GOTO 到氨基酸的最大吸收峰218 nm上,就可測試其吸光度大小, 從而計算出糖的含量。

 5.多糖分析測試工作中的應(yīng)用

  紫外可見分光光度計在多糖的分析中,主要也是作定量檢測。因為多糖對紫外光的主要吸收波長為206nm,所以我們只要采用光度測量模式。將紫外可見分光光度計儀器的波長GOTO到多糖的最大吸收峰206nm 上,就可測試其吸光度大小,從而計算出多糖的含量。

但是多糖的分析難度很大。因為在206 nm 處的時候,光源(氘燈)的能量已經(jīng)很弱,儀器光學(xué)系統(tǒng)的能量輸出也很低,光電倍增管的靈敏度也很低,206nm 左右的干擾也很大。所以,用紫外可見分光光度計作多糖的分析是很難的事。


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