組織總磷含量檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書
微量法
注意：本產(chǎn)品試劑有所變動(dòng)，請(qǐng)注意并嚴(yán)格按照該說(shuō)明書操作。
貨號(hào)：BC2855
規(guī)格：100T/96S
產(chǎn)品組成：使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致，有疑問(wèn)請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

溶液的配制：

1. 試劑一：強(qiáng)腐蝕性，強(qiáng)氧化性；易揮發(fā)，不使用時(shí)請(qǐng)及時(shí)蓋緊蓋子；

2. 試劑三A：臨用前加入5 mL蒸餾水溶解，用不完的試劑2-8℃保存4周；

3. 試劑三B：臨用前加入5 mL蒸餾水溶解，用不完的試劑2-8℃保存4周；

4. 試劑三：臨用前按試劑三A：試劑三B：試劑二=1:1:1的體積比例配制，配好的試劑三應(yīng)為淺黃色。若無(wú)色則試劑失效，若是藍(lán)色則為磷污染，試劑三根據(jù)樣本量現(xiàn)用現(xiàn)配，限當(dāng)天使用；

5. 標(biāo)準(zhǔn)品：10mmol/L無(wú)機(jī)磷標(biāo)準(zhǔn)液。

產(chǎn)品說(shuō)明：
磷的存在形態(tài)包括無(wú)機(jī)磷與有機(jī)磷。無(wú)機(jī)磷主要指磷酸根，參與生物體內(nèi)多種代謝，包括能量代謝、核酸代謝、蛋白質(zhì)磷酸化和脫磷酸化等。通過(guò)測(cè)定總磷與無(wú)機(jī)磷含量即可了解作物對(duì)磷的利用率，進(jìn)而為合理施肥提供依據(jù)。
總磷經(jīng)消化后，轉(zhuǎn)化成無(wú)機(jī)磷。鉬藍(lán)法是測(cè)定無(wú)機(jī)磷含量的經(jīng)典方法，一定條件下，鉬藍(lán)與磷酸根生成660nm有特征吸收峰的物質(zhì)，通過(guò)測(cè)定660nm光吸收，即可計(jì)算無(wú)機(jī)磷含量，進(jìn)而可計(jì)算出組織中總磷含量。

技術(shù)指標(biāo)：
低檢出限：0.0338 mmol/L
線性范圍：0.625-8 mmol/L
注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液槍、微量玻璃比色皿/96孔板、蒸餾水和濃硫酸（99%）。

操作步驟：具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件

注意事項(xiàng)：
1、如果樣本測(cè)定吸光值大于1.5，需用蒸餾水做相應(yīng)稀釋后進(jìn)行測(cè)定。如果樣本測(cè)定吸光值較低或接近空白值，建議增大樣本量后重新進(jìn)行測(cè)定。注意同步修改計(jì)算公式。
實(shí)驗(yàn)實(shí)例：

1. 取0.1g小鼠腎臟按照提取步驟操作，離心取上清之后按照測(cè)定步驟操作，使用96孔板測(cè)得計(jì)算 A測(cè)定管=0.191，A空白管=0.051，A標(biāo)準(zhǔn)管=0.282，按樣本質(zhì)量計(jì)算總磷含量得：總磷含量(mmol/g 質(zhì)量)=0.005×(A測(cè)定管-A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)÷W= 0.030 mmol/g 質(zhì)量。

2. 取0.1g小鼠脾按照提取步驟操作，離心取上清之后按照測(cè)定步驟操作，使用96孔板測(cè)得計(jì)算 A測(cè)定管=0.197，A空白管=0.051，A標(biāo)準(zhǔn)管=0.282，按樣本質(zhì)量計(jì)算總磷含量得：總磷含量(mmol/g質(zhì)量)=0.005×(A測(cè)定管-A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)÷W= 0.032 mmol/g 質(zhì)量。

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