抗壞血酸過(guò)氧化物酶（APX）活性檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書
微量法
注意：本產(chǎn)品試劑有所變動(dòng)，請(qǐng)注意并嚴(yán)格按照該說(shuō)明書操作。
貨號(hào)：BC0225
規(guī)格：100T/96S
產(chǎn)品組成：使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致，有疑問(wèn)請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

溶液的配制：
提取液：臨用前將粉劑一倒入提取液中，溶液為懸濁液，搖勻使用即可，2-8℃可以保存12周。
試劑二：臨用前加10 mL蒸餾水充分溶解。4℃可以保存1周。（由于試劑穩(wěn)定性較差，故多給一瓶）
試劑三：使用前先離心。臨用前根據(jù)樣本量取適量試劑三用蒸餾水稀釋100倍使用即可。
產(chǎn)品說(shuō)明：
    APX（EC.1.11.1.11）是植物清除活性氧的重要抗氧化酶之一，也是抗壞血酸代謝的關(guān)鍵酶之一。APX具有多種同功酶，分別定位于葉綠體、胞質(zhì)、線粒體、過(guò)氧化物和乙醛酸體，以及過(guò)氧化體和類囊體膜上。APX催化H₂O₂氧化AsA，是植物AsA的主要消耗者。APX的活性直接影響到AsA的含量，APX與AsA具有一定的負(fù)相關(guān)性。
APX催化H₂O₂氧化AsA，通過(guò)測(cè)定AsA氧化速率，來(lái)計(jì)算得APX活性。

注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。
需自備的儀器和用品：
    紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔UV板、低溫離心機(jī)、移液槍、水浴鍋、研缽/勻漿器、冰和蒸餾水。
操作步驟：具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件
實(shí)驗(yàn)實(shí)例：

1. 取0.1g小薊樣本加入1mL提取液進(jìn)行勻漿研磨，取上清，之后按照測(cè)定步驟操作，用微量石英比色皿測(cè)得計(jì)算ΔA空白管=A1_空白管-A2_空白管=0.5453-0.5287=0.0166，ΔA測(cè)定管=A1_{測(cè)定管}-A2_{測(cè)定管}=0.7097-0.6137=0.096，按樣本質(zhì)量計(jì)算酶活：

APX活性（U/g 質(zhì)量）=1.79×(ΔA測(cè)定管-ΔA空白管) ÷W=1.79×（0.096-0.0166）÷0.1=1.421 U/g 質(zhì)量。
相關(guān)發(fā)表文獻(xiàn)：

1. Meng C, Quan T Y, Li Z Y, et al. Transcriptome profiling reveals the genetic basis of alkalinity tolerance in wheat[J]. BMC genomics, 2017, 18(1): 24.

2. Qin Y, Djabou A S M, An F, et al. Proteomic analysis of injured storage roots in cassava (Manihot esculenta Crantz) under postharvest physiological deterioration[J]. PloS one, 2017, 12(3).

3. Zhang Z, Liu H, Sun C, et al. A C2H2 zinc-finger protein OsZFP213 interacts with OsMAPK3 to enhance salt tolerance in rice[J]. Journal of plant physiology, 2018, 229: 100-110.

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5. Djabou A S M, Qin Y, Thaddee B, et al. Effects of Calcium and Magnesium Fertilization on Antioxidant Activities during Cassava Postharvest Physiological Deterioration[J]. Crop Science, 2018, 58(3): 1385-1392.

參考文獻(xiàn)：

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