本實驗以測定混合物中九種小分子化合物（①安替比林、②苯甲酸、③水楊酸、④氫化可的松、⑤利尿磺胺、⑥酮洛芬、⑦萘普生、⑧丙硫醇、⑨雙氯芬酸）的含量測定為例，通過優(yōu)化柱溫、流動相梯度、梯度時間等條件，實現(xiàn)分析方法的系統(tǒng)優(yōu)化。

● 實驗系統(tǒng)：LC-2080C 3D+LabSolutions MD方法開發(fā)軟件

●  實驗條件設(shè)計

流動相：A：0.1%甲酸；B：乙腈

色譜柱：Shim-pack Scepter C18-120（100 mm×3.0 mm I.D., 1.9 μm)

流  速：0.7mL/min

進樣量：5μL

檢測波長：254nm

柱  溫：25℃、35℃、45℃

初始梯度濃度（B）：10%、15%、20%

梯度時間：5min、10min、15min

LabSolutions MD支持在多個條件組合中設(shè)定不同的分析參數(shù)，如梯度條件可通過中心參數(shù)及步進值的設(shè)定，自動生成分析計劃，從而減少人為輸入可能造成的錯誤。

梯度設(shè)置界面

梯度條件模擬圖

執(zhí)行自動生成的方法后，可獲得不同條件下的分析結(jié)果。如下圖所示：

梯度時間對分離度的影響：在相同柱溫和初始濃度下，梯度時間延長有助于提高色譜峰之間的分離度。

柱溫對分離度的影響：在相同梯度條件下，降低柱溫可改善部分目標(biāo)物（如酮洛芬與萘普生）的分離效果。

梯度時間對分離度的影響

柱溫對分離度的影響

在方法開發(fā)過程中，常需要對多個參數(shù)進行調(diào)整，由此會產(chǎn)生大量的色譜圖數(shù)據(jù)，逐個判斷效率較低且容易出現(xiàn)錯誤。LabSolutions MD可通過計算評估值（Evaluation Value），自動篩選最佳的分析方法。

在本實驗中，評估值最高的條件為：初始濃度（B）為15%、梯度時間15min、柱溫25℃。在該條件下，各色譜峰之間的分離度均≥1.5，滿足分析要求。

不同組合條件下的評估值結(jié)果

最高評估值下的分離結(jié)果色譜圖

通過將一體型高效液相色譜儀和LabSolutions MD方法開發(fā)軟件結(jié)合，可以系統(tǒng)性的進行方法開發(fā)過程，降低開發(fā)過程中的風(fēng)險并提升效率。基于評估值的比較，能夠快速、準(zhǔn)確地確定最佳分離條件。

本文重點關(guān)注了梯度條件與柱溫的優(yōu)化。此外，LabSolutions MD還支持色譜柱篩選、流動相篩選及穩(wěn)定性評估等功能，適用于不同應(yīng)用場景，助力分析方法開發(fā)效率的提升。

注：文中涉及最佳類描述，限于實驗組別對比結(jié)果