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目錄:上海拜力生物科技有限公司>>試劑盒>>ELISA試劑盒>> 人嗜酸性粒細(xì)胞陽離子蛋白ECP試劑盒

人嗜酸性粒細(xì)胞陽離子蛋白ECP試劑盒

  • 人嗜酸性粒細(xì)胞陽離子蛋白ECP試劑盒
參考價(jià) 面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
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供貨周期:一個月 應(yīng)用領(lǐng)域:化工,生物產(chǎn)業(yè)

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人嗜酸性粒細(xì)胞陽離子蛋白ECP試劑盒?用于定量檢測血清等樣本中ECP濃度。它采用雙抗體夾心法,靈敏度高,主要用于哮喘、過敏性鼻炎等過敏性疾病和炎癥反應(yīng)的科研與臨床輔助監(jiān)測。

人嗜酸性粒細(xì)胞陽離子蛋白ECP試劑盒

人嗜酸性粒細(xì)胞陽離子蛋白ECP試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn))原理,以特異性抗人ECP單克隆抗體為包被抗體,包被于酶標(biāo)板微孔內(nèi),可特異性捕獲樣本中的人ECP;再加入檢測抗體(酶標(biāo)二抗),與捕獲的ECP形成“包被抗體-ECP-酶標(biāo)二抗"復(fù)合物;最后加入底物液,酶催化底物發(fā)生顯色反應(yīng),顯色強(qiáng)度與樣本中ECP的含量呈正相關(guān),通過酶標(biāo)儀檢測吸光度(OD值),結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)曲線即可定量計(jì)算樣本中ECP的濃度。試劑盒包含酶標(biāo)板、標(biāo)準(zhǔn)品、酶標(biāo)二抗、底物液、終止液、洗滌液等全套預(yù)配試劑,無需額外配制核心試劑,全程遵循ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)操作流程,操作步驟簡潔,檢測周期短(全程約2.5-3小時(shí)),降低實(shí)驗(yàn)操作難度。該試劑盒經(jīng)嚴(yán)格質(zhì)量檢測,批內(nèi)變異系數(shù)(CV)<8%,批間變異系數(shù)(CV)<10%,靈敏度可達(dá)0.1ng/mL,特異性強(qiáng),不與嗜酸性粒細(xì)胞蛋白X、嗜堿性粒細(xì)胞脫顆粒蛋白、其他免疫相關(guān)蛋白及無關(guān)蛋白發(fā)生交叉反應(yīng),可精準(zhǔn)識別ECP,檢測結(jié)果準(zhǔn)確可靠;試劑穩(wěn)定性高,經(jīng)梯度溫度驗(yàn)證,可在規(guī)定儲存條件下穩(wěn)定保存,確保檢測結(jié)果的重復(fù)性與一致性,適配各類ECP相關(guān)定量檢測實(shí)驗(yàn),為科研實(shí)驗(yàn)提供精準(zhǔn)的數(shù)據(jù)支撐,同時(shí)契合ECP臨床科研檢測的核心需求。

試劑盒核心特性

該試劑盒既具備ELISA檢測試劑盒的固有優(yōu)勢,又針對人ECP檢測需求(重點(diǎn)適配炎癥相關(guān)樣本檢測、區(qū)分ECP與其他嗜酸性粒細(xì)胞相關(guān)蛋白)進(jìn)行專項(xiàng)優(yōu)化,核心特性突出,適配免疫學(xué)、呼吸病學(xué)、變tai反應(yīng)學(xué)等科研及相關(guān)檢測場景需求:一是特異性強(qiáng),采用高特異性抗人ECP單克隆抗體,可精準(zhǔn)識別樣本中的人ECP,交叉反應(yīng)率<5%,不與嗜酸性粒細(xì)胞蛋白X、免疫球蛋白、炎癥因子等相關(guān)物質(zhì)及無關(guān)蛋白發(fā)生反應(yīng),有效避免炎癥樣本中雜蛋白干擾,確保檢測結(jié)果的特異性與準(zhǔn)確性,契合ECP作為嗜酸性粒細(xì)胞特異性蛋白的檢測需求;二是靈敏度高,檢測下限低至0.1ng/mL,可精準(zhǔn)檢測樣本中低濃度ECP,能夠捕捉到樣本中ECP的微小含量變化,適配不同濃度梯度樣本的檢測,滿足哮喘、過敏性鼻炎等研究中ECP異常表達(dá)的檢測需求,同時(shí)可準(zhǔn)確檢測炎癥發(fā)作、藥物干預(yù)過程中ECP的含量波動;三是操作便捷,試劑盒提供全套預(yù)配試劑,酶標(biāo)板已預(yù)先包被抗體,無需額外進(jìn)行包被、封閉等復(fù)雜操作,實(shí)驗(yàn)步驟清晰,無需專業(yè)檢測技能,普通實(shí)驗(yàn)室即可完成檢測,降低實(shí)驗(yàn)門檻;四是重復(fù)性好,批內(nèi)、批間變異系數(shù)均控制在合理范圍內(nèi),不同批次試劑盒檢測結(jié)果一致性高,同一樣本多次檢測偏差小,保障實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的可重復(fù)性,符合科研實(shí)驗(yàn)對檢測穩(wěn)定性的核心要求;五是檢測范圍廣,標(biāo)準(zhǔn)曲線線性范圍為0.1ng/mL-50ng/mL,可覆蓋多數(shù)科研樣本中ECP的含量范圍,適配血清、血漿、痰液、支氣管肺泡灌洗液、鼻分泌物等多種樣本類型,兼容性強(qiáng),同時(shí)適配不同預(yù)處理方式的樣本檢測;六是質(zhì)量可控,每批試劑盒均提供完整的質(zhì)量檢測報(bào)告,包含靈敏度、特異性、重復(fù)性、穩(wěn)定性等檢測指標(biāo),同時(shí)附帶標(biāo)準(zhǔn)品檢測圖譜及嗜酸性粒細(xì)胞相關(guān)蛋白交叉反應(yīng)驗(yàn)證數(shù)據(jù),方便實(shí)驗(yàn)人員驗(yàn)證產(chǎn)品性能,適配實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)建檔保存需求。

檢測操作方法

該試劑盒基于ELISA雙抗體夾心原理,操作需遵循酶聯(lián)免疫檢測常規(guī)規(guī)范,重點(diǎn)兼顧試劑平衡、孵育溫度及洗滌操作,避免影響檢測結(jié)果準(zhǔn)確性,結(jié)合ECP樣本檢測特點(diǎn)(主要由嗜酸性粒細(xì)胞釋放,多存在于炎癥相關(guān)樣本中,易受蛋白酶降解),具體操作方法如下:一是實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備,將試劑盒所有試劑從冷藏環(huán)境中取出,置于室溫(20-25℃)平衡30分鐘,避免溫度驟變影響試劑活性及ECP檢測準(zhǔn)確性;準(zhǔn)備好樣本、酶標(biāo)儀、移液器、離心管等實(shí)驗(yàn)器材,實(shí)驗(yàn)所用器材需提前滅菌處理,確保無酶、無熱源、無污染;樣本需按照說明書要求進(jìn)行預(yù)處理(血清/血漿樣本2000-3000r/min離心20分鐘收集上清,避免溶血;痰液、鼻分泌物樣本加入生理鹽水稀釋后離心去除沉淀,加入蛋白酶抑制劑防止ECP降解;支氣管肺泡灌洗液樣本離心收集上清,保存過程中置于4℃,避免ECP變性、降解),預(yù)處理后的樣本置于4℃暫存,避免反復(fù)凍融,同時(shí)嚴(yán)禁檢測含NaN3的樣本,因NaN3會抑制辣根過氧化物酶(HRP)活性;二是加樣反應(yīng),將標(biāo)準(zhǔn)品、空白對照、樣本分別加入酶標(biāo)板微孔中,每孔加入50μL,每組設(shè)置3個復(fù)孔,確保加樣量精準(zhǔn),避免氣泡產(chǎn)生;加入50μL酶標(biāo)二抗,輕輕振蕩酶標(biāo)板,使試劑與樣本充分混合,封板后置于37℃孵育60分鐘,孵育過程中避免酶標(biāo)板晃動,確保孵育溫度均勻;三是洗滌步驟,孵育結(jié)束后,棄去孔內(nèi)液體,加入洗滌液,每孔300μL,靜置30秒后棄去,重復(fù)洗滌5次,zui后一次洗滌后,將酶標(biāo)板倒置在吸水紙上拍干,避免孔內(nèi)殘留洗滌液,防止影響顯色反應(yīng);四是顯色與終止,每孔加入50μL底物液,輕輕振蕩混勻,封板后置于37℃避光孵育15-20分鐘,直至標(biāo)準(zhǔn)品孔出現(xiàn)明顯梯度顯色;快速加入50μL終止液,輕輕振蕩混勻,終止顯色反應(yīng)(終止液加入后,藍(lán)色會立即轉(zhuǎn)為黃色,確保終止反應(yīng)徹di);五是結(jié)果檢測,將酶標(biāo)板放入酶標(biāo)儀,設(shè)置檢測波長為450nm(參考波長630nm),測定每孔的吸光度(OD值),空白對照孔OD值需扣除,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品的OD值繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,代入樣本OD值計(jì)算樣本中ECP的具體含量,同時(shí)可結(jié)合ECP正常參考范圍(不同樣本類型參考范圍略有差異,血清樣本通常為2-15ng/mL)輔助分析結(jié)果。

適用實(shí)驗(yàn)場景

該試劑盒專為ECP相關(guān)檢測及研究設(shè)計(jì),貼合其精準(zhǔn)定量檢測特性及ECP的炎癥調(diào)控功能,適配科研、藥物研發(fā)、教學(xué)等多種場景,核心應(yīng)用圍繞ECP定量檢測、炎癥機(jī)制研究及疾病風(fēng)險(xiǎn)評估展開,具體包括:一是ECP定量檢測研究,用于人血清、血漿、痰液等各類樣本中ECP的含量檢測,精準(zhǔn)分析不同樣本、不同疾病狀態(tài)下ECP的含量差異,助力ECP釋放機(jī)制、炎癥反應(yīng)調(diào)控通路的基礎(chǔ)研究,探究其在免疫應(yīng)答中的核心作用;二是疾病相關(guān)研究,用于哮喘、過敏性鼻炎、慢性阻塞性肺疾病、寄生蟲感染、自身免疫性疾病、過敏性皮膚病等ECP含量異常相關(guān)疾病的發(fā)病機(jī)制研究,檢測疾病模型樣本與正常樣本、藥物干預(yù)前后樣本中ECP的含量差異,分析ECP異常與疾病嚴(yán)重程度、炎癥活動度、預(yù)后的關(guān)聯(lián),為疾病診斷、治療方案優(yōu)化提供實(shí)驗(yàn)依據(jù);三是藥物研發(fā)與篩選,用于ECP相關(guān)抗炎藥物、抗過敏藥物、抗寄生蟲藥物等的篩選及療效評估,檢測藥物處理后樣本中ECP的含量變化,分析藥物對ECP釋放、炎癥反應(yīng)的調(diào)控作用,為藥物研發(fā)提供可靠的檢測模型;四是基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)與教學(xué)應(yīng)用,可用于ELISA檢測技術(shù)的教學(xué)、抗原-抗體特異性結(jié)合實(shí)驗(yàn)的驗(yàn)證,以及炎癥反應(yīng)、免疫細(xì)胞功能相關(guān)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn),同時(shí)可用于科研實(shí)驗(yàn)中ECP定量檢測的常規(guī)應(yīng)用,助力分子生物學(xué)、免疫學(xué)、呼吸病學(xué)、變tai反應(yīng)學(xué)教學(xué)與基礎(chǔ)研究;五是臨床科研樣本篩查,可用于臨床科研樣本中ECP的快速定量檢測,為炎癥疾病早期篩查、療效監(jiān)測、病情分型提供輔助檢測數(shù)據(jù),適配臨床科研相關(guān)實(shí)驗(yàn)需求,需注意該試劑盒僅供科研使用,不能作為疾病早期診斷或確診的依據(jù)。
備注:(具體檢測操作步驟、樣本預(yù)處理方法、標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制及結(jié)果計(jì)算請參考產(chǎn)品說明書)

儲存與注意事項(xiàng)

儲存方面,該試劑盒未開封時(shí)需置于2-8℃冷藏避光保存,有效期為6個月,嚴(yán)禁冷凍儲存,避免試劑結(jié)冰破壞抗體活性、酶的催化功能及ECP標(biāo)準(zhǔn)品穩(wěn)定性;開封后,酶標(biāo)板需密封置于2-8℃冷藏,避免受潮、污染,剩余試劑需密封保存,盡快在1個月內(nèi)用完,避免試劑失效;標(biāo)準(zhǔn)品溶解后,可置于-20℃分裝凍存,保存時(shí)間不超過1個月,避免反復(fù)凍融,防止ECP降解、變性影響檢測結(jié)果,凍存時(shí)需加入蛋白酶抑制劑,用密封袋包裹,避免受到污染。注意事項(xiàng)包括:產(chǎn)品僅供科研使用,不用于臨床診斷及治療,不宜用于普通人群的疾病篩查;實(shí)驗(yàn)前需仔細(xì)閱讀產(chǎn)品說明書,嚴(yán)格按照說明書要求進(jìn)行操作,確保加樣量、孵育溫度、孵育時(shí)間精準(zhǔn),避免操作不當(dāng)影響檢測結(jié)果;樣本預(yù)處理需規(guī)范,加入蛋白酶抑制劑防止ECP降解,痰液、鼻分泌物等樣本需規(guī)范稀釋、離心處理,避免樣本污染、溶血,預(yù)處理后的樣本需及時(shí)檢測,不可長時(shí)間放置,采集的樣本需低溫冰浴運(yùn)輸,避免ECP變性、降解;實(shí)驗(yàn)所用器材需無酶、無熱源、無污染,移液器吸頭需一次性使用,避免交叉污染;洗滌步驟需徹di,避免孔內(nèi)殘留液體,影響顯色反應(yīng)及檢測結(jié)果;顯色過程需避光,避免光照影響底物顯色效果,終止反應(yīng)后需在15分鐘內(nèi)完成酶標(biāo)儀檢測,防止顯色加深或褪色;試劑需在有效期內(nèi)使用,過期試劑嚴(yán)禁使用,廢棄試劑及實(shí)驗(yàn)廢液需按照生物安全規(guī)范妥善處理,易燃易爆、腐蝕性試劑需分區(qū)存放,確保實(shí)驗(yàn)安全;運(yùn)輸過程中采用冷藏運(yùn)輸,避免高溫、劇烈震蕩,確保試劑活性及ECP標(biāo)準(zhǔn)品穩(wěn)定性,運(yùn)輸后需及時(shí)轉(zhuǎn)入2-8℃冷藏環(huán)境,開展運(yùn)輸后穩(wěn)定性檢測;此外,樣本中過高的蛋白酶濃度、炎癥因子、重金屬離子可能導(dǎo)致ECP檢測結(jié)果異常,實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)時(shí)需避開此類干擾因素,必要時(shí)加入相應(yīng)抑制劑或進(jìn)行樣本純化處理。

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