產(chǎn)品上新

愛(ài)必信互作系列試劑盒上新啦！CoIP和CHIP試劑盒是我們的老角色，上架以來(lái)受到各種好評(píng)！abs955文獻(xiàn)量飛速增長(zhǎng)，目前單品已將近200篇，IF最高37.3！CHIP試劑盒文獻(xiàn)量也在快速增長(zhǎng)中！最近終于！愛(ài)必信互作系列新增多款試劑盒！今天給小白淺淺分析一下各種試劑盒的區(qū)別。

abs955免疫(共)沉淀(IP/CoIP)試劑盒

表1 愛(ài)必信互作試劑盒

DNA pull down

原理：DNA pull down是用于分析蛋白質(zhì)與DNA互作的一種分析技術(shù)。通常用來(lái)分析目標(biāo)基因調(diào)控區(qū)域相結(jié)合的轉(zhuǎn)錄因子及其他調(diào)控蛋白。

該技術(shù)針對(duì)目標(biāo)區(qū)域設(shè)計(jì)特異性DNA探針并經(jīng)過(guò)脫硫生物素標(biāo)記，標(biāo)記后探針可以和偶聯(lián)在磁珠上的鏈霉親和素親和結(jié)合，再與總蛋白提取物進(jìn)行孵育，有互作的蛋白質(zhì)可以和DNA探針特異性結(jié)合，形成磁珠-DNA探針-蛋白復(fù)合物，洗滌去除非特異性結(jié)合的蛋白質(zhì)，再經(jīng)過(guò)洗脫得到目的DNA探針-蛋白質(zhì)復(fù)合物，最后通過(guò)Western Blot或質(zhì)譜(MS)鑒定蛋白質(zhì)類型。多用于特定基因的轉(zhuǎn)錄因子研究。

DNA pull down原理圖

Chip原理

染色質(zhì)免疫沉淀(ChIP)是研究體內(nèi)蛋白質(zhì)與DNA相互作用的理想技術(shù)，是目前研究轉(zhuǎn)錄因子與啟動(dòng)子區(qū)域間相互聯(lián)系的較好方法。

在活細(xì)胞狀態(tài)下使細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)和DNA交聯(lián)，并用超聲波將其隨機(jī)切斷為一定長(zhǎng)度范圍內(nèi)的染色質(zhì)小片段。選擇與目的蛋白特異性結(jié)合的抗體免疫沉淀DNA-蛋白質(zhì)復(fù)合體，從而特異性地富集與目的蛋白結(jié)合的染色體片段。該DNA可用于后續(xù)的定量PCR檢測(cè)(qPCR)或高通量測(cè)序(seq)。常用于驗(yàn)證或?qū)ふ遗c已知蛋白結(jié)合的DNA序列。

Chip原理圖

RNA pull down

RNA pull-down是研究細(xì)胞內(nèi)RNA與蛋白/RNA結(jié)合情況的技術(shù)。

先將RNA進(jìn)行標(biāo)記（如生物素標(biāo)記），再與細(xì)胞裂解液共同孵育，從而形成RNA-RNA/蛋白質(zhì)復(fù)合物，進(jìn)而檢測(cè)與之結(jié)合的RNA或蛋白質(zhì)。復(fù)合物洗脫后，通過(guò)熒光定量PCR(RNA pull down-QPCR)或高通量測(cè)序(RNA pull down-seq)方法來(lái)鑒定目標(biāo)RNN是否與某些RNA分子相互作用，通過(guò)Western blot(pull down-WB)實(shí)驗(yàn)和質(zhì)譜(pull down--MS)技術(shù)檢測(cè)目標(biāo)RNA是否與某些蛋白相互作用。

RNA pull down原理

RIP原理

RIP技術(shù)(RNA Binding Protein lmmunoprecipitation, RNA結(jié)合蛋白免疫沉淀)，是研究細(xì)胞內(nèi)RNA與蛋白結(jié)合情況的技術(shù)，是了解轉(zhuǎn)錄后調(diào)控網(wǎng)絡(luò)動(dòng)態(tài)過(guò)程的有力工具。

該技術(shù)主要是運(yùn)用目標(biāo)蛋白的特異性抗體把相應(yīng)的RNA-蛋白復(fù)合物沉淀下來(lái)，然后經(jīng)過(guò)分離純化對(duì)結(jié)合在復(fù)合物上的RNA進(jìn)行q-PCR驗(yàn)證或高通量測(cè)序分析。

RIP原理圖

GST Pull-Down試劑盒

GST Pull-Down實(shí)驗(yàn)是驗(yàn)證體外蛋白互作的主要方式。通過(guò)體外表達(dá)親和蛋白-GST，將親和蛋白固化在谷胱甘肽親和樹(shù)脂上充當(dāng)“誘餌蛋白"，將細(xì)胞或者組織的總蛋白和此“誘導(dǎo)蛋白"混合孵育后可從中捕獲“目標(biāo)蛋白"，最后通過(guò)洗脫的方式將“目標(biāo)蛋白"洗脫后檢測(cè)，就可以分析蛋白和蛋白互作關(guān)系。

GST Pull-Down原理圖

CoIP原理

免疫(共)沉淀(IP/CoIP)是基于抗體和蛋白的特異性親和作用，通過(guò)捕獲與蛋白或抗原特異性結(jié)合的抗體，進(jìn)而從復(fù)雜的樣品中捕獲及富集目標(biāo)蛋白，同時(shí)可以測(cè)定與之相互作用的蛋白或其它生物大分子。

CoIP原理圖

當(dāng)無(wú)法進(jìn)行體內(nèi)互作檢測(cè)或無(wú)法獲得在體樣本或者在體樣本沒(méi)有特異性一抗可以使用但是又必須進(jìn)一步驗(yàn)證蛋白互作結(jié)論時(shí)，可用到GST pull down實(shí)驗(yàn)；

總結(jié)

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Absin產(chǎn)品線：
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