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固相萃取儀裝置操作步驟,快速上手

閱讀:38發(fā)布時間:2025-12-5

  核心原則:按“準備→活化→上樣→淋洗→洗脫”五步流程操作,無需復雜調試,重點把控柱活化和流速控制,新手10分鐘可掌握。
 
  適用場景:環(huán)境水樣、食品樣品、生物體液等樣品的目標物富集與凈化(以常見固相萃取柱為例)。
 
  一、操作前準備(2分鐘,關鍵防污染)
 
  儀器檢查:確認固相萃取儀主機通電,真空泵(或壓力泵)連接正常;檢查萃取柱支架、收集管架是否安裝牢固,收集管(離心管/試管)對應放置在支架上。
 
  試劑與材料準備:備好固相萃取柱(如C18柱、陽離子交換柱)、活化溶劑(如甲醇)、淋洗溶劑(如5%甲醇水溶液)、洗脫溶劑(如純乙腈)、待處理樣品(提前過濾去除顆粒物,避免堵柱)。
 
  裝柱固定:將固相萃取柱垂直插入儀器支架,下端對準收集管;若為手動調節(jié)型儀器,旋緊柱固定夾,確保柱體穩(wěn)定無晃動。
 
  二、核心操作五步走(6分鐘,精準控速是關鍵)
 
  第一步:柱活化(激活吸附位點,必做!)
 
  用移液管吸取3-5mL活化溶劑(如甲醇),緩慢注入萃取柱中;
 
  打開固相萃取儀真空泵(或啟動壓力泵),調節(jié)流速至1-2mL/min(流速過快會導致活化不充分),待溶劑完全流干后關閉真空泵(避免柱體干燒);
 
  若萃取柱為水相兼容型,需再用3-5mL超純水淋洗,同樣控制流速1-2mL/min,流干后備用。
 
  第二步:上樣(目標物吸附)
 
  取預處理后的樣品(通常5-20mL,具體看柱容量),用移液管或進樣器緩慢注入活化后的萃取柱中;
 
  開啟真空泵,調節(jié)流速至1-3mL/min(根據(jù)樣品黏度調整,渾濁樣品可適當放慢),確保樣品均勻流過柱體,目標物充分吸附;
 
  上樣完畢后,繼續(xù)抽氣30秒,將柱內殘留樣品抽干。
 
  第三步:淋洗(去除雜質,保留目標物)
 
  吸取3-5mL淋洗溶劑(如5%甲醇水溶液,需根據(jù)目標物性質選擇,避免洗脫目標物),注入萃取柱;
 
  保持流速1-2mL/min,讓淋洗溶劑流干,此過程可更換新的收集管(避免雜質污染后續(xù)洗脫液);
 
  淋洗結束后,抽氣1分鐘,徹底去除柱內殘留淋洗液。
 
  第四步:洗脫(收集目標物,核心步驟)
 
  將干凈的收集管對準萃取柱下端,吸取1-3mL洗脫溶劑(如純乙腈,確保目標物完全洗脫),緩慢注入柱中;
 
  調節(jié)流速至0.5-1mL/min(流速過慢效率低,過快則洗脫不徹底),讓洗脫液完全流入收集管;
 
  可重復洗脫1次(若目標物回收率低),合并兩次洗脫液,完成萃取。
 
  第五步:收尾清潔(延長儀器壽命)
 
  關閉真空泵和儀器電源,取下用過的萃取柱,放入專用廢棄物容器;
 
  用超純水沖洗萃取柱支架和管路(若有殘留溶劑),再用干布擦拭干凈;
 
  整理試劑和收集管,將儀器置于干燥通風處。

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