微生物法尼基焦磷酸合酶(FPS)ELISA試劑盒實驗使用說明書

　　BS-5186 微生物法尼基焦磷酸合酶(FPS)ELISA試劑盒

　　適用樣本：微生物培養(yǎng)上清液、細胞裂解液?

　　一、試劑盒組成?

　　組分名稱 規(guī)格(96T) 保存條件

　　預包被FPS抗體酶標板 8×12孔 4℃避光

　　FPS標準品(凍干粉) 2管(100 ng/mL) -20℃長期保存

　　生物素化檢測抗體 120 μL -80℃避光

　　酶結(jié)合物(HRP標記) 12 mL 4℃避光

　　TMB顯色底物(A/B液) 各6 mL 4℃避光

　　終止液(2M H?SO?) 12 mL 室溫

　　20×濃縮洗滌液 60 mL 室溫

　　二、實驗流程?

　　標本制備?

　　微生物上清液：4℃、3000×g離心10分鐘，取上清檢測?。

　　細胞裂解液：加入RIPA裂解液，冰上裂解30分鐘后離心取上清。

　　試劑準備?

　　洗滌液：1份濃縮液+19份蒸餾水稀釋?。

　　標準品梯度：用標準品稀釋液配制0.156-10 ng/mL系列濃度?。

　　檢測步驟?

　　加樣?：每孔加入100μL標準品/樣本，37℃孵育90分鐘。

　　洗滌?：洗板3次，每次浸泡1分鐘?。

　　加抗體?：每孔加入100μL生物素化抗體，37℃孵育60分鐘。

　　加酶結(jié)合物?：每孔加入100μL HRP標記物，37℃避光孵育30分鐘。

　　顯色?：每孔加入90μL TMB底物，避光反應15分鐘?。

　　終止?：每孔加入50μL終止液，振蕩混勻。

　　結(jié)果分析?

　　酶標儀450nm讀取OD值，標準曲線擬合計算樣本濃度?。

　　三、注意事項?

　　避免反復凍融樣本，分裝后-80℃保存?。

　　顯色反應需避光，終止后30分鐘內(nèi)讀數(shù)?。

　　本試劑盒最小檢測限：0.05 ng/mL(參考標準曲線)?。

　　四、常見問題?

　　高背景值?：洗滌不凈或孵育時間過長。

　　標準曲線異常?：標準品稀釋誤差或板孔污染。

　　注：以上資料僅供參考，不作為實驗依據(jù)，具體產(chǎn)品說明請咨詢品牌供應商或技術(shù)老師。

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