大鼠表皮生長(zhǎng)因子(EGF)ELISA檢測(cè)試劑盒技術(shù)說明書

　　BS-2926大鼠表皮生長(zhǎng)因子(EGF)ELISA試劑盒

　　一、產(chǎn)品概述

　　本試劑盒采用雙抗體夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)，專用于體外定量檢測(cè)大鼠血清、血漿、組織勻漿及相關(guān)液體樣本中表皮生長(zhǎng)因子(EGF)的含量。試劑盒僅供科研使用，不可用于臨床診斷。

　　二、檢測(cè)原理

　　雙抗體夾心法：

　　預(yù)包被抗大鼠EGF捕獲抗體的微孔板與樣本中EGF結(jié)合。

　　加入生物素標(biāo)記的檢測(cè)抗體，形成“抗體-抗原-酶標(biāo)抗體"復(fù)合物。

　　經(jīng)洗滌后，加入TMB顯色底物，在HRP酶催化下顯藍(lán)色，酸終止后變黃色。

　　顏色深淺與樣本中EGF濃度呈正相關(guān)，通過450nm波長(zhǎng)測(cè)定吸光度(OD值)，計(jì)算濃度。

　　三、試劑盒組成

　　組分96孔配置48孔配置保存條件

　　預(yù)包被酶標(biāo)板1塊(96孔)1塊(48孔)2-8℃

　　標(biāo)準(zhǔn)品0.3ml×6管0.3ml×6管2-8℃f

　　生物素化檢測(cè)抗體120μL60μL2-8℃

　　顯色液A/B各6mL各3mL避光，2-8℃

　　終止液6mL3mL2-8℃

　　20×濃縮洗滌液60mL30mL室溫

　　封板膜4張2張室溫

　　四、樣本處理與保存

　　血清：

　　室溫凝固10-20分鐘，2000-3000轉(zhuǎn)/分離心20分鐘，取上清。

　　避免溶血，2-8℃保存≤48小時(shí)，長(zhǎng)期需凍存(-20℃或-80℃)，避免反復(fù)凍融。

　　血漿：

　　使用EDTA/肝素抗凝，離心后取上清，處理方法同血清。

　　組織勻漿：

　　生理鹽水搗碎，離心取上清。

　　細(xì)胞上清：

　　離心去除顆粒，取上清液。

　　五、操作步驟

　　試劑準(zhǔn)備：

　　洗滌液：用蒸餾水1:20稀釋濃縮液。

　　標(biāo)準(zhǔn)品：按說明書梯度稀釋(如80-2.5 U/L)。

　　加樣：

　　每孔加入50μL標(biāo)準(zhǔn)品/樣本，37℃溫育30分鐘。

　　洗滌：

　　每孔加滿洗滌液，浸泡30秒后甩干，重復(fù)5次。

　　顯色與終止：

　　加入HRP標(biāo)記抗體，37℃溫育30分鐘。

　　洗滌后，每孔加TMB顯色液避光反應(yīng)15分鐘，加終止液終止。

　　檢測(cè)：

　　450nm波長(zhǎng)測(cè)定OD值，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣本濃度。

　　六、注意事項(xiàng)

　　試劑平衡：冷藏試劑需室溫平衡15-30分鐘后再使用。

　　加樣精度：使用校準(zhǔn)的移液器，避免交叉污染。

　　顯色控制：TMB顯色后及時(shí)終止，避免過度反應(yīng)。

　　數(shù)據(jù)有效性：每次實(shí)驗(yàn)需同步做標(biāo)準(zhǔn)曲線，建議設(shè)復(fù)孔。

　　七、性能參數(shù)

　　檢測(cè)范圍：31.2-2000 pg/mL(具體以說明書為準(zhǔn))。

　　靈敏度：≤15.6 pg/mL。

　　有效期：6個(gè)月(2-8℃避光保存)。

　　八、自備器材

　　酶標(biāo)儀(450nm)、恒溫箱(37℃)、精密移液器(0.5-1000μL)。

　　注：本說明書基于ELISA通用技術(shù)整理，具體操作請(qǐng)以實(shí)際試劑盒說明書為準(zhǔn)。 (AI生成)

　　注：以上僅供參考，不作為實(shí)際數(shù)據(jù)，實(shí)驗(yàn)需嚴(yán)格遵循說明或咨詢技術(shù)老師。 Elisa試劑盒

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