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大腸埃希氏菌計(jì)數(shù)操作視頻（四）
播放：6 上傳時(shí)間：2025-12-01GB4789.38-2025 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)
食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 大腸埃希氏菌計(jì)數(shù)
第一法 大腸埃希氏菌 MPN計(jì)數(shù)法
樣品的稀釋
固體和半固體樣品:無菌操作稱取25g樣品,放入盛有225mL 磷酸鹽緩沖液或生理鹽水的無菌均質(zhì)杯內(nèi)
確認(rèn)試驗(yàn)
輕輕振搖各產(chǎn)氣的 EC肉湯管，分別用接種環(huán)取培養(yǎng)物劃線接種于TBX瓊脂平板，36℃±1℃培養(yǎng)18 h~24 h，觀察TBX瓊脂平板上的菌落，大腸埃希氏菌在TBX瓊脂平板上的菌落為藍(lán)綠色。TBX瓊脂平板上有藍(lán)綠色菌落者，其對(duì)應(yīng)的EC肉湯產(chǎn)氣管為大腸埃希氏菌陽性，否則為陰性。
第二法 大腸埃希氏菌平板計(jì)數(shù)法
1、盡快將冷卻至48℃±2℃的TBX瓊脂傾注于培養(yǎng)皿中，每皿15 mL~20 mL。小心旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)皿，將培養(yǎng)基與接種的樣品勻液充分混勻，水平靜置待其凝固。從制備樣品勻液開始至傾注TBX 瓊脂完畢，全過程不得超過15 min。瓊脂凝固后翻轉(zhuǎn)平板，置于36℃±1℃培養(yǎng)18 h~24 h。
2、平板菌落數(shù)的選擇
TBX瓊脂平板上大腸埃希氏菌的典型菌落為藍(lán)綠色，選擇典型菌落數(shù)在15 CFU~150 CFU之間的平板，對(duì)典型菌落進(jìn)行計(jì)數(shù)。
3、大腸埃希氏菌菌落數(shù)的計(jì)算
（1）若只有1個(gè)稀釋度的平板上典型菌落數(shù)在計(jì)數(shù)范圍內(nèi)，以該稀釋度典型菌落數(shù)的平均值，再乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)進(jìn)行結(jié)果計(jì)算。
若有兩個(gè)連續(xù)稀釋度的平板上典型菌落數(shù)在計(jì)數(shù)范圍內(nèi)時(shí)，結(jié)果按式(1)計(jì)算：
（2）若所有稀釋度的平板上典型菌落數(shù)均大于150 CFU，則對(duì)稀釋度最一高的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，其他稀釋度的平板菌落數(shù)可記錄為多不可計(jì)，結(jié)果按最一高稀釋度典型菌落數(shù)的平均值乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)計(jì)算。
（3）若所有稀釋度的平板上典型菌落數(shù)均小于15 CFU，則對(duì)稀釋度最一低的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，結(jié)果按最一低稀釋度典型菌落數(shù)的平均值乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)計(jì)算。
（4）若所有稀釋度（包括液體樣品原液）平板均無典型菌落生長(zhǎng)，則結(jié)果按小于1乘以最一低稀釋倍數(shù)計(jì)算。
（5）若所有稀釋度的平板上典型菌落數(shù)均不在15 CFU~150 CFU之間，其中一部分小于15 CFU一部分大于150 CFU時(shí)，則以最一接近15 CFU或150 CFU的典型菌落數(shù)平均值乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)進(jìn)行結(jié)果計(jì)算。
10 結(jié)果與報(bào)告
10.1 大腸埃希氏菌的菌落數(shù)小于100 CFU時(shí)，按“四舍五入"的原則修約，以整數(shù)報(bào)告。
10.2 大腸埃希氏菌的菌落數(shù)大于或等于100CFU時(shí)，第3位數(shù)字采用“四舍五入"原則修約后，取前2位數(shù)字，后面用0代替位數(shù)；也可用10的指數(shù)形式來表示，按“四舍五入"原則修約后，保留兩位有效數(shù)字。
10.3 若空白對(duì)照上有菌落生長(zhǎng)，則此次檢驗(yàn)結(jié)果無效。
10.4 稱重取樣以CFU/g為單位報(bào)告結(jié)果，體積取樣以 CFU/mL為單位報(bào)告結(jié)果。
