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細(xì)胞培養(yǎng)板的加樣和操作時(shí)需要注意的事項(xiàng)
閱讀：2930 發(fā)布時(shí)間：2021-10-23
細(xì)胞培養(yǎng)板在進(jìn)行細(xì)胞操作時(shí)同樣遵循嚴(yán)格無菌的原則，各項(xiàng)操作要保證規(guī)范、科學(xué)，不對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)造成額外的影響。這其中最常見的問題就是如何保證加樣后細(xì)胞的均勻和盡量減少換液對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)的影響。
問：
96，24孔培養(yǎng)板或培養(yǎng)皿的蓋子都很松，這樣是方便了透氣，但是細(xì)菌、霉菌等污染物會(huì)不會(huì)也隨著溜進(jìn)去呢？
答：
蓋子很松，屬于半開放培養(yǎng)，這樣的目的是透氣（實(shí)際上是為了使培養(yǎng)皿外的CO2能夠與培養(yǎng)皿充分交換，維持培養(yǎng)基的pH值）。
凡事有利必有弊，這樣當(dāng)然增加了污染的可能性。此外這樣還會(huì)使培養(yǎng)皿內(nèi)的液體蒸發(fā)，這對(duì)于精確定量的藥物來說就顯得值得注意了。所以以下二條措施是必須的a培養(yǎng)箱內(nèi)空氣必須清潔（定期紫外線照，酒精擦洗，盡量少開關(guān)培養(yǎng)箱）b培養(yǎng)箱內(nèi)的濕度必須始終保持為100%（培養(yǎng)箱內(nèi)放置無菌蒸餾水的水槽）。
就好像培養(yǎng)皿，也是一個(gè)蓋倒扣的容器，也不會(huì)污染。主要是因?yàn)樯w子“L”型邊緣產(chǎn)生氣流負(fù)壓的緣故，灰塵上面才附著有微生物，而氣流攜帶的灰塵是無法通過產(chǎn)生負(fù)壓的蓋邊緣的。而透氣作用只是通過空氣的擴(kuò)散，不會(huì)產(chǎn)生氣流，所以只會(huì)透氣不會(huì)透菌。
問：
使用24孔板，在其中的某些孔中有操作(在超凈臺(tái)內(nèi))，而其他孔中還有細(xì)胞要培養(yǎng).我很擔(dān)心這樣會(huì)污染，不知道要注意什么?
答：
在超凈臺(tái)內(nèi)如果操作規(guī)范的話應(yīng)該可以的，我想你可以充分利用培養(yǎng)版的蓋子，盡量只暴露要操作的孔，將其他孔用蓋子蓋起來。
使用前綜合考慮一下，充分使用所有的孔；如果只需要使用少數(shù)的孔可以只用一邊的，其余用蓋子蓋住，習(xí)慣于先用右側(cè)的孔（右手加樣方便）。
細(xì)胞培養(yǎng)板操作時(shí)用幾塊玻片把板子一側(cè)墊高，不要把蓋子全打開，一般沒問題。