基因電轉(zhuǎn)染儀作為物理方法的一種，不僅能將DNA、RNA，還能將抗體、酶及其他生物活性分子轉(zhuǎn)入細(xì)菌、酵母、動物細(xì)胞和植物細(xì)胞。它是一種簡便的基因轉(zhuǎn)移系統(tǒng)，具有其他轉(zhuǎn)移方法不能對比的*性，如操作簡便、快捷，可重復(fù)性強(qiáng)，轉(zhuǎn)染率高，適用廣譜等，尤其對目前一般認(rèn)為難轉(zhuǎn)的懸浮培養(yǎng)細(xì)胞也能獲得較高的轉(zhuǎn)染。

 

　　電穿孔法是通過電場作用于細(xì)胞幾微秒到幾毫秒之后，在細(xì)胞膜上暫時形成小孔或開口，把大分子如DNA等導(dǎo)入細(xì)胞并進(jìn)入細(xì)胞核的技術(shù)。其過程簡述如下：首先在電擊過程中，細(xì)胞膜上出現(xiàn)穿孔，質(zhì)粒在電泳力的作用下與細(xì)胞膜接觸，并在細(xì)胞膜上電穿孔的區(qū)域形成一種可轉(zhuǎn)移的復(fù)合物。再次電擊后，質(zhì)粒脫離復(fù)合物并擴(kuò)散至細(xì)胞質(zhì)內(nèi)，開始瞬轉(zhuǎn)；同時小部分質(zhì)粒進(jìn)入核內(nèi)與染色體整合，開始穩(wěn)轉(zhuǎn)。一旦DNA擴(kuò)散至細(xì)胞，膜上小孔會關(guān)閉。

 

　　淺析基因電轉(zhuǎn)染儀脈沖過程：

　　1）脈沖波形

　　脈沖波形主要分為兩種：1、方波脈沖；2、指數(shù)遞減波脈沖。方波脈沖是指：電壓瞬間升至預(yù)設(shè)電壓，保持電壓放電，然后瞬間終止放電。一般哺乳動物細(xì)胞電轉(zhuǎn)染時選擇方波脈沖，有較高的轉(zhuǎn)染效率和細(xì)胞存活率。指數(shù)遞減波脈沖是指：先對電容充電，然后讓電容*放電，其電壓變化呈指數(shù)遞減。一般這種波形的脈沖電轉(zhuǎn)染適用于細(xì)菌、酵母菌、昆蟲細(xì)胞。

　　2）脈沖時間

　　脈沖時間的選定主要取決與脈沖波形。在方波脈沖中，脈沖時間可直接設(shè)定。在指數(shù)遞減波脈沖中，脈沖時間是指電壓衰減至初始電壓1/3時所用的時間，等于電容（C）與電阻（R）的乘積，單位是ms。在參數(shù)優(yōu)化中，增加電壓應(yīng)當(dāng)降低脈沖時間，而減小電壓則應(yīng)當(dāng)增大脈沖時間。