胞電轉(zhuǎn)染(電轉(zhuǎn))，也叫細(xì)胞電穿孔(electroporation)，是把外源大分子物質(zhì)DNA、RNA、siRNA、蛋白質(zhì)等以及一些小分子導(dǎo)入細(xì)胞膜內(nèi)部的重要方法。
 

　　體外高效電轉(zhuǎn)化儀在瞬間強(qiáng)大電場的作用下，溶液中細(xì)胞的細(xì)胞膜具有了一定的通透性，帶電的外源物質(zhì)以類似電泳的方式進(jìn)入細(xì)胞膜。由于細(xì)胞膜磷脂雙分子層的電阻很大，細(xì)胞外部電流場產(chǎn)生的細(xì)胞兩極電壓都被細(xì)胞膜承受，細(xì)胞質(zhì)內(nèi)分到的電壓可以忽略不計(jì)，細(xì)胞質(zhì)內(nèi)部幾乎沒有電流，因此也決定了正常范圍內(nèi)的電轉(zhuǎn)過程中細(xì)胞毒性很小。電場使DNA等物質(zhì)進(jìn)入細(xì)胞膜后只能停止在細(xì)胞膜附近，隨后細(xì)胞本身的機(jī)制可以允許這些物質(zhì)到細(xì)胞核等處。
 

　　體外高效電轉(zhuǎn)化儀使用：
 

　　1.選擇合適的電場強(qiáng)度合適的電場強(qiáng)度對于電轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)非常重要，電場強(qiáng)度不能過高，過高會(huì)增加細(xì)胞的死亡率；也不能過低，過低不能增加膜的通透性或在膜上形成小孔。不同細(xì)胞系具有不同的*佳場強(qiáng)值，實(shí)驗(yàn)前應(yīng)測定所轉(zhuǎn)染細(xì)胞系的電場強(qiáng)度。
 

　　2.細(xì)胞的選擇用于電轉(zhuǎn)的細(xì)胞一般選取處于對數(shù)生長期的細(xì)胞(15代以內(nèi)，傳代后2d)。因?yàn)樘幱趯?shù)生長期的細(xì)胞分裂旺盛，表面結(jié)構(gòu)致密比穩(wěn)定期的細(xì)胞差，電轉(zhuǎn)后，細(xì)胞膜的恢復(fù)能力強(qiáng)，而且處于有絲分裂期的細(xì)胞更容易接受外源DNA。
 

　　3.質(zhì)粒的質(zhì)量應(yīng)選擇純度高的質(zhì)粒，DNA/RNA應(yīng)該超純(A260/A280>1.8)，其次應(yīng)不含內(nèi)毒素，同時(shí)質(zhì)粒應(yīng)溶于雙蒸水而不是TE緩沖溶液。另外，DNA濃度不宜過高。
 

　　4.選擇合適的電轉(zhuǎn)染試劑電擊會(huì)對細(xì)胞造成一定程度的傷害，在轉(zhuǎn)染試劑的選擇上要注意，應(yīng)選擇具有細(xì)胞膜修復(fù)成分的電轉(zhuǎn)染試劑，如Entranster-E，可將電擊對細(xì)胞的損傷降低。