SpectraMax M5 酶標儀詳解

SpectraMax M5 多功能酶標儀是由 Molecular Devices 推出的一款全波長掃描型、多檢測模式微孔板檢測設(shè)備。該儀器采用光柵單色器系統(tǒng)，支持紫外-可見波長范圍內(nèi)的多模式檢測，包括吸光度、熒光強度、熒光偏振、時間分辨熒光和化學(xué)發(fā)光。SpectraMax M5 適用于多種科研應(yīng)用場景，如分子檢測、細胞分析、酶活性研究、藥物篩選和免疫實驗等。

其設(shè)計理念強調(diào)檢測模式整合與數(shù)據(jù)精度控制，結(jié)合軟件支持與路徑校正功能，能夠為實驗室提供較為系統(tǒng)化的檢測解決方案，尤其適用于需要多波長調(diào)節(jié)和中高通量檢測的實驗環(huán)境。

一、美谷分子SpectraMax M5 酶標儀核心檢測能力

SpectraMax M5 支持五種主要檢測模式：

1. 吸光度（Absorbance）

儀器配備雙光束光學(xué)系統(tǒng)，可進行端點、動力學(xué)和光譜掃描實驗，波長范圍覆蓋 200–1000 nm，波長間隔最小可達1 nm。適用于常規(guī)蛋白定量、DNA濃度分析、細胞增殖檢測及酶動力學(xué)反應(yīng)測定。

2. 熒光強度（Fluorescence Intensity, FI）

使用 PMT 檢測器進行激發(fā)與發(fā)射波長掃描，具備較高的信噪比與靈敏度。適合DNA染料分析、報告基因檢測、探針法實驗等。

3. 熒光偏振（Fluorescence Polarization, FP）

通過熒光偏振技術(shù)測定分子結(jié)合引起的分子旋轉(zhuǎn)變化，適用于配體-受體結(jié)合、蛋白互作、小分子篩選等研究。

4. 時間分辨熒光（Time-Resolved Fluorescence, TRF）

采用延遲信號檢測技術(shù)，有效排除背景噪音，提高熒光檢測靈敏度。多用于敏感性要求較高的免疫分析，如DELFIA、LanthaScreen技術(shù)。

5. 化學(xué)發(fā)光（Luminescence）

該檢測模式無需外部激發(fā)光源，直接測定樣品發(fā)射光信號，適合ATP分析、報告基因?qū)嶒灐⒚庖甙l(fā)光等應(yīng)用。

二、光學(xué)與檢測系統(tǒng)

SpectraMax M5 的核心光學(xué)系統(tǒng)由雙光柵單色器構(gòu)成，不依賴濾光片即可實現(xiàn)波長靈活調(diào)節(jié)。光源為氙燈，可覆蓋紫外至可見光范圍。

主要光學(xué)參數(shù)：

• 激發(fā)波長范圍：250–850 nm（熒光模式）

• 發(fā)射波長范圍：360–850 nm

• 吸光度波長范圍：200–1000 nm

• 帶寬：標準5 nm

• 波長選擇：步進1 nm，無需濾光片更換

• 動態(tài)范圍：>6個數(shù)量級（熒光/發(fā)光）

檢測器使用光電倍增管（PMT），能提供較低的背景噪音與較高的信號捕獲效率，適合弱信號檢測場景。

三、結(jié)構(gòu)與兼容性

SpectraMax M5 支持各種標準規(guī)格的微孔板（6、12、24、48、96和384孔），具備前進樣設(shè)計，便于在自動化平臺中集成。

兼容功能包括：

• 自動路徑校正（PathCheck 技術(shù)）

• 自定義震蕩與溫控設(shè)置（可選配）

• 光譜掃描與動力學(xué)曲線采集

• 樣品高度識別與體積補償

PathCheck 技術(shù)通過實時測量每孔樣品高度，將結(jié)果轉(zhuǎn)換為等效1 cm光徑，優(yōu)化定量準確性，尤其適用于微體積反應(yīng)體系。

四、軟件與數(shù)據(jù)處理

SpectraMax M5 配套的 SoftMax Pro 軟件 是其數(shù)據(jù)分析平臺，具備完整的數(shù)據(jù)處理與圖形輸出功能。

軟件主要功能：

• 多波長掃描與光譜圖繪制

• 實時數(shù)據(jù)采集與監(jiān)控

• 多參數(shù)曲線擬合（線性、非線性、四參數(shù)、Logit等）

• 自動背景扣除與標準曲線建模

• 實驗?zāi)０遄远x

• 合規(guī)支持（用戶權(quán)限、數(shù)據(jù)審計、21 CFR Part 11）

SoftMax Pro 支持輸出PDF、Excel、CSV等格式文件，便于報告整合和共享。同時，可通過網(wǎng)絡(luò)接口與LIMS系統(tǒng)實現(xiàn)聯(lián)動。

五、典型應(yīng)用領(lǐng)域

SpectraMax M5 的多模式支持使其在多學(xué)科研究中均有應(yīng)用價值，具體應(yīng)用領(lǐng)域如下：

1. 分子生物學(xué)

• DNA/RNA濃度測定

• 熒光染料分析（如PicoGreen、SYBR Green）

• 端點與動力學(xué)熒光反應(yīng)分析

2. 生物化學(xué)與酶學(xué)研究

• 酶活性分析（吸光度與動力學(xué)模式）

• 抑制劑篩選

• Michaelis-Menten與Lineweaver-Burk動力學(xué)曲線構(gòu)建

3. 免疫學(xué)實驗

• 吸光度法ELISA

• 化學(xué)發(fā)光ELISA

• TRF法免疫檢測（用于高靈敏度檢測）

4. 藥物篩選與信號轉(zhuǎn)導(dǎo)

• 熒光偏振法篩選小分子抑制劑

• FRET/BRET 蛋白相互作用分析

• 藥效動力學(xué)建模與反應(yīng)時間窗口測定

5. 細胞分析

• 報告基因表達（Luciferase, GFP等）

• ATP活性檢測（化學(xué)發(fā)光）

• 細胞凋亡與毒性分析

六、操作維護與使用建議

為保障設(shè)備性能與使用壽命，建議注意以下操作和維護事項：

• 光源壽命有限，建議根據(jù)使用頻率定期更換氙燈；

• 每次檢測前進行儀器預(yù)熱及光學(xué)校正；

• 對于TRF與熒光實驗，使用前需避免樣品殘留熒光背景干擾；

• 定期使用標準板進行性能驗證；

• 儀器閑置時建議斷電并使用防塵罩保護；

• 軟件操作日志應(yīng)定期導(dǎo)出與備份。

七、技術(shù)參數(shù)一覽

八、美谷分子SpectraMax M5 酶標儀總結(jié)

SpectraMax M5 酶標儀通過集成吸光度、熒光、發(fā)光、熒光偏振和時間分辨檢測功能，為實驗室提供了一套靈活的分析平臺。其在光學(xué)設(shè)計、數(shù)據(jù)一致性控制、檢測模式轉(zhuǎn)換與軟件支持方面形成了一體化解決方案。適用于分子檢測、蛋白定量、細胞分析和藥物研發(fā)等多個研究方向，滿足多種檢測需求和方法學(xué)開發(fā)場景。

通過模塊化結(jié)構(gòu)與標準化光學(xué)參數(shù)配置，SpectraMax M5 可幫助研究人員在提升實驗效率的同時保持檢測質(zhì)量一致性，是具備綜合功能支持的實驗室工具之一。