考馬斯亮藍染色技術(shù)：從原理到產(chǎn)品應(yīng)用 -賽默飛

凝膠上蛋白檢測的方法是進行考馬斯亮藍染色?？捡R斯染色易于操作，因為它只涉及一種現(xiàn)成的試劑，而且不會對目標(biāo)蛋白質(zhì)進行化學(xué)修飾。由于未發(fā)生化學(xué)修飾，切下的蛋白質(zhì)條帶可以脫色，然后通過質(zhì)譜或測序?qū)厥盏牡鞍踪|(zhì)進行分析。我們基于考馬斯染色法的蛋白質(zhì)染料簡單易用，可輕松對通過電泳分離的蛋白質(zhì)進行可視化。

賽默飛提供考馬斯亮藍染色產(chǎn)品，請訪問獲取產(chǎn)品最新信息。

考馬斯亮藍染色的優(yōu)勢：

· 使用方便—操作方法簡單，僅需2-3個步驟

· 兼容性好—考馬斯亮藍染料可兼容多種下游應(yīng)用，如定量密度測定、質(zhì)譜或測序分析

· 可逆性染色

根據(jù)您的研究需要，選擇合適的考馬斯染料

考馬斯染色方案

染色前，建議用水進行漂洗以去除殘留的 SDS，避免對染料結(jié)合的干擾。然后加入染料，通常搖晃孵育約1小時。凝膠即可在染料中直接分析。如果需要進一步提高靈敏度，也可以使用水或甲醇：乙酸進行脫色，從凝膠基質(zhì)中洗去多余的未結(jié)合染料。為了加快染色過程，可選用微波方案進行不需要甲醇或乙酸的考馬斯染色。

SimpleBlue SafeStain 方案

Imperial 蛋白質(zhì)染色方案

染色靈敏度

考馬斯染色法通常可以在5分鐘內(nèi)檢測到3-10μg 的蛋白質(zhì)。如果進行了額外的水脫色處理，則可以檢測到低至7ng 的蛋白質(zhì) (BSA)。

泳道 1：6µg 蛋白質(zhì)混合物
泳道 2：1µg 兔免疫球蛋白
泳道 3：1µg 還原牛血清白蛋白
泳道 4：5µg大腸桿菌裂解物
泳道 5：20ng 還原牛血清白蛋白
泳道 6：10ng 還原牛血清白蛋白
泳道 7：7ng 還原牛血清白蛋白
泳道 8：3ng 還原牛血清白蛋白
泳道 9：10µl Mark12標(biāo)準品
泳道 10：5µl Mark12標(biāo)準品

NuPAGE Bis-tris凝膠通過Simply Blue Safe 染料染色1小時，并在水里進行過夜脫色。

使用Imperial 蛋白染料對蛋白條帶進行染色檢測僅需5分鐘。如需進一步提高靈敏度和降低背景，凝膠可染色1小時后，用水過夜脫色。

線性度

考馬斯亮藍染料可在一定蛋白質(zhì)范圍內(nèi)定量結(jié)合蛋白質(zhì)，從而進行光密度分析。PageBlue 蛋白質(zhì)染料具有?5ng至?500ng的動態(tài)范圍。

PageBlue 蛋白質(zhì)染料可實現(xiàn)靈敏且線性動態(tài)范圍寬的染色方案。將一系列含有β-半乳糖苷酶和牛血清白蛋白的樣品（各為0-500ng）在12％Tris-甘氨酸SDS-PAGE 膠上通過電泳分離，然后使用PageBlue蛋白質(zhì)染料染色，并對染色的蛋白條帶進行光密度測定。

考馬斯染色凝膠和膜的獲取和分析

iBright智能成像系統(tǒng)

使用 iBright 智能成像系統(tǒng)對染色的凝膠和膜拍照，獲取發(fā)表級圖像并進行分析。此凝膠成像系統(tǒng)配備了功能強大的硬件，融合了先進的自動化技術(shù)，操作界面易于使用，無論你是實驗室新手，還是資深研科人員，都能快速上手，拍攝清晰成像圖片并進行快速分析。

雙 LED 藍白光透射儀

使用白光捕獲您的凝膠和膜染色結(jié)果。

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