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賽默飛世爾科技(中國)有...

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iPSC多能干細(xì)胞研究的基本流程和產(chǎn)品指南 -賽默飛

閱讀:94      發(fā)布時(shí)間:2025-9-10
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Thermo Fisher Scientific(賽默飛世爾科技)的相關(guān)產(chǎn)品覆蓋干細(xì)胞實(shí)驗(yàn)研究中的每一步。從重編程體細(xì)胞到 iPSC 培養(yǎng)擴(kuò)增、、基因編輯、分化與鑒定,為可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果提供保證。同時(shí),賽默飛世爾科技也基于iPSC的治療策略開發(fā)過程中的每個(gè)階段(早期研發(fā)-臨床生產(chǎn)-商業(yè)化)提供解決方案。 

圖片1.png 

 

誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(iPSC)目前的主要應(yīng)用包括但不限于: 

· 基礎(chǔ)科學(xué)研究(疾病機(jī)制、發(fā)育生物學(xué)、細(xì)胞命運(yùn)決定等) 

· 藥物開發(fā)與發(fā)現(xiàn)(為藥物的發(fā)現(xiàn)、鑒定和篩選、靶標(biāo)驗(yàn)證等提供生理相關(guān)細(xì)胞) 

· 毒理學(xué)篩查(用于評(píng)估活細(xì)胞內(nèi)化合物或藥物的安全性) 

· 干細(xì)胞治療細(xì)胞療法(神經(jīng)退行性疾病、免疫疾病、糖尿病等適應(yīng)癥) 

· 類器官研究(iPSC來源的組織類器官) 

 

誘導(dǎo)性多能干細(xì)胞研究產(chǎn)品分步指南 

 

Step 1:重編程 

iPSCs通過特定轉(zhuǎn)錄因子的過表達(dá),將體細(xì)胞重編程至多能性狀態(tài)而獲得。仙臺(tái)病毒具有兩大主要特點(diǎn),使其成為重編程的優(yōu)選系統(tǒng)。首先,仙臺(tái)病毒可以通過黏附于多種不同類型細(xì)胞表面的唾液酸受體來感染細(xì)胞,因此可感染多種動(dòng)物物種的細(xì)胞類型。其次,仙臺(tái)病毒是RNA病毒,從而不會(huì)被整合到宿主基因組中。而 Epi5 iPSC?episomal載體無需病毒包裝即可轉(zhuǎn)染至細(xì)胞內(nèi),適合于易于重編程的親本細(xì)胞,但需注意DNA載體可能會(huì)整合到宿主基因組中。 

 

產(chǎn)品推薦: 

Essential 8培養(yǎng)基——批次間穩(wěn)定高,文獻(xiàn)引用+1000 

StemFlex培養(yǎng)基——PSC單克隆高效擴(kuò)增 

CTS CytoTune-iPS 2.1仙臺(tái)病毒重編程試劑盒——高效重編程,提供法規(guī)支持文件 

Epi5Episomal iPSC 重編程試劑盒——不依賴病毒的重編程工具 

CytoTune-iPS 2.0仙臺(tái)病毒重編程試劑盒——高效重編程成纖維細(xì)胞和PBMC 

 

Step 2:培養(yǎng)擴(kuò)增 

PSC 培養(yǎng)需要一整套兼容的培養(yǎng)基、基質(zhì)和傳代方法,以支持細(xì)胞的健康生長和保持細(xì)胞的多能性。從最初的含血清培養(yǎng)體系,發(fā)展為feeder-free培養(yǎng)基體系,再到不含異源/動(dòng)物源成分的臨床級(jí)別培養(yǎng)基體系,現(xiàn)在的PSC培養(yǎng)體系可靈活支持各種干細(xì)胞研究需求。同時(shí),隨著藥物開發(fā)和治療的快速發(fā)展,研究人員開發(fā)出了懸浮培養(yǎng)方法,保證快速、經(jīng)濟(jì)、穩(wěn)定的PSC大量擴(kuò)增。 

 

產(chǎn)品推薦: 

StemFlex培養(yǎng)基——PSC單克隆高效擴(kuò)增 

Essential 8培養(yǎng)基——批次間穩(wěn)定高,文獻(xiàn)引用+1000 

Essential 8 Flex培養(yǎng)基——E8升級(jí)款,支持隔天換液 

GibcoCTS StemFlex培養(yǎng)基——更穩(wěn)健高效的干細(xì)胞治療生產(chǎn)工藝 

GibcoCTS Essential 8 培養(yǎng)基——不含動(dòng)物源成分,提供法規(guī)支持文件 

CTS StemScale PSC懸浮培養(yǎng)基——不含異源成分,提供法規(guī)支持文件 

StemScale PSC懸浮培養(yǎng)基——無需微載體的3D懸浮培養(yǎng) 

GibcoKnockOut™血清替代物——批次間穩(wěn)定性高,30年的經(jīng)典選擇 

KnockOutD-MEM培養(yǎng)基——批次間穩(wěn)定性高,PSC高效擴(kuò)增 

截短型人重組玻連蛋白 (rhVTN-N) ——Essential 8經(jīng)典搭配基質(zhì) 

GibcoKnockOutDMEM/F-12培養(yǎng)基——批次間穩(wěn)定性高,PSC高效擴(kuò)增 

Gletrex基質(zhì)膠——批次間更一致的蛋白質(zhì)濃度 

StemProAccutase™ 細(xì)胞解離試劑——更溫和的干細(xì)胞解離試劑 

重組人層粘連蛋白rhLaminin-521——無需添加ROCK抑制劑的基質(zhì) 

分散酶 II(中性蛋白酶)——相對(duì)溫和,適用于原代細(xì)胞的分離 

TrypLESelect (1X),無酚紅——不含動(dòng)物源成分,單細(xì)胞解離 

Countess 3系列自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀——準(zhǔn)確、精密、省時(shí) 

 

Step 3:基因編輯 

PSC 的自我更新和分化能力使其非常適合構(gòu)建疾病模型和細(xì)胞模型,用于藥物開發(fā)和細(xì)胞治療應(yīng)用。通過化學(xué)轉(zhuǎn)染或者電轉(zhuǎn)Cas9蛋白復(fù)合體的方法,對(duì)PSC進(jìn)行基因編輯進(jìn)一步提升了其在科研和臨床領(lǐng)域的實(shí)用性,可實(shí)現(xiàn)復(fù)雜的遺傳疾病模型構(gòu)建。使用Invitrogen TrueDesign 基因組編輯工具,免費(fèi)設(shè)計(jì)5個(gè)物種中的6種基因編輯設(shè)計(jì)。 

 

產(chǎn)品推薦: 

TrueCutCas9 v2——高編輯效率,ISO 13485質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn) 

InvitrogenTrueCutHiFi Cas9——低脫靶效應(yīng),高編輯效率 

LipofectamineStem 轉(zhuǎn)染試劑——多種干細(xì)胞中均實(shí)現(xiàn)高轉(zhuǎn)染效率 

GibcoTrueCutCas9 蛋白——cGMP級(jí)別生產(chǎn),提供法規(guī)支持文件 

InvitrogenTrueDesign 基因組編輯工具——5個(gè)物種、6種基因編輯設(shè)計(jì) 

CTSHiFi Cas9 Protein——cGMP級(jí)別生產(chǎn),提供法規(guī)支持文件 

TrueGuide 合成 gRNA——經(jīng)化學(xué)修飾,穩(wěn)定性高 

Neon NxT™ 電轉(zhuǎn)染系統(tǒng)——可靠的轉(zhuǎn)染性能 

 

Step 4:誘導(dǎo)分化 

當(dāng)培養(yǎng)在特定的體系中(B-27/N2添加劑、生長因子、小分子),PSCs 可分化為特定的三胚層細(xì)胞譜系,包括神經(jīng)元、心肌細(xì)胞、胰島細(xì)胞等體內(nèi)其他任意細(xì)胞類型。 

 

產(chǎn)品推薦: 

經(jīng)典款B-27添加劑——批次間穩(wěn)定高,文獻(xiàn)引用+30,000 

GibcoB-27 Plus添加劑——更高的神經(jīng)元存活率 

不含維生素AB-27添加劑——批次間穩(wěn)定高,文獻(xiàn)引用+30,000 

GibcoNeurobasal™ 培養(yǎng)基——維持高純度的神經(jīng)元培養(yǎng) 

不含胰島素的B-27添加劑——批次間穩(wěn)定高,文獻(xiàn)引用+30,000 

GibcoCTS B-27 XenoFree 添加劑——不含異源成分,提供法規(guī)支持文件 

GibcoN-2 添加劑——批次間穩(wěn)定高,文獻(xiàn)引用+30,000 

PeproTech細(xì)胞因子——重組蛋白和生長因子種類+1,000 

GibcoCTS B-27 XenoFree 添加劑——不含異源成分,提供法規(guī)支持文件 

PSC多巴胺能神經(jīng)元分化試劑盒——高效的神經(jīng)元分化 

PSC心肌細(xì)胞分化試劑盒——心肌細(xì)胞分化僅需8天,維持培養(yǎng)超15 

PSC定形內(nèi)胚層誘導(dǎo)試劑盒——2天內(nèi)獲得定形內(nèi)胚層細(xì)胞 

 

Step 5:分析鑒定 

鑒定在干細(xì)胞研究中是必要步驟,主要測試干細(xì)胞功能多能性,及是否存在可能影響細(xì)胞行為和安全的異常,除此之外,可能還需要鑒定來確定干細(xì)胞分化后形成的細(xì)胞類型。 

 

產(chǎn)品推薦: 

SuperScript IV VILO預(yù)混液——10分鐘快速完成反轉(zhuǎn)錄 

High-Capacity cDNA反轉(zhuǎn)錄試劑盒——?jiǎng)討B(tài)范圍比同類試劑盒大10 

Invitrogen干細(xì)胞標(biāo)記物抗體——嚴(yán)格兩步法驗(yàn)證的高級(jí)驗(yàn)證抗體 

Cells-to-CT™ 試劑盒——10分鐘內(nèi)可完成96個(gè)RT-qPCR樣本制備 

Molecular Probes熒光標(biāo)記和檢測試劑——文獻(xiàn)引用數(shù)量 

EVOS 智能活細(xì)胞成像分析系統(tǒng)——雙相機(jī)雙光路共聚焦顯微鏡系統(tǒng) 

iBright成像系統(tǒng)——910萬像素,4色熒光同時(shí)成像 

InvitrogenAttuneCytPix™ 成像型流式細(xì)胞儀——聲波聚焦技術(shù),6000張圖片/ 

 

無論您是利用多能干細(xì)胞 PSC) 進(jìn)行基礎(chǔ)研究還是應(yīng)用研究臨床轉(zhuǎn)化,PSC 培養(yǎng)基的性能和質(zhì)量對(duì)于取得成功都至關(guān)重要。正因如此,賽默飛開發(fā)了一套創(chuàng)新、全面的 Gibco 干細(xì)胞培養(yǎng)基,支持多樣化的工作流程,使科學(xué)家能夠突破干細(xì)胞研究的界限。 

 

我們產(chǎn)品組合的廣度包括: 

· 適用于各種應(yīng)用的解決方案Gibco 培養(yǎng)基支持小鼠和人 PSC 培養(yǎng)。 

· 滿足挑戰(zhàn)性的應(yīng)用需求—除常規(guī)干細(xì)胞培養(yǎng)之外,Gibco 培養(yǎng)基可用于基因編輯、疾病建模和細(xì)胞治療。 

· 高質(zhì)量的 GMP 標(biāo)準(zhǔn)生產(chǎn)?Gibco PSC 培養(yǎng)基在經(jīng)過 ISO 13485 認(rèn)證的設(shè)施中生產(chǎn),并符合醫(yī)療器械生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范 (GMP),以確保產(chǎn)品性能、一致性和可靠性。 

 


 

如需合作轉(zhuǎn)載本文,請文末留言。 

 

#多能干細(xì)胞# #誘導(dǎo)多能干細(xì)胞# #iPSC# #干細(xì)胞實(shí)驗(yàn)研究


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