產(chǎn)品名稱：內(nèi)切-β-N-乙酰葡萄糖胺酶 H (Endo H)

產(chǎn)品貨號(hào)：UA070040

產(chǎn)品描述

本產(chǎn)品為通過(guò)大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)重組表達(dá)的內(nèi)切-β-N-乙酰葡萄糖胺酶H，帶有His標(biāo)簽。Endo H是一種糖苷水解酶，能特異性切割天冬酰胺（Asn）連接的糖蛋白中高甘露糖型和部分雜合型寡糖鏈的殼二糖核心，但不能切割復(fù)雜型寡糖。該酶是研究糖蛋白糖基化修飾、分析糖鏈類型與結(jié)構(gòu)的核心工具，常用于確定糖蛋白的糖基化類型、分析蛋白質(zhì)折疊與運(yùn)輸，以及制備去糖基化蛋白樣品。

產(chǎn)品特性

• 蛋白形式： 重組內(nèi)切-β-N-乙酰葡萄糖胺酶H，帶有His標(biāo)簽

• 來(lái)源： 來(lái)源于 鏈霉菌 (Streptomyces plicatus)

• 表達(dá)系統(tǒng)： 大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)

• 活性： 500 U/μL

• 純度： >95%（經(jīng)SDS-PAGE及HPLC驗(yàn)證）

• 分子量： 30 kDa（還原條件下）

• 性狀： 液體

• 緩沖體系： 20 mM Tris-HCl、50 mM NaCl、5 mM EDTA (pH 7.5 @ 25°C)

• 產(chǎn)品組分：

• 儲(chǔ)存液： 500 U/μL Endo H、20 mM Tris-HCl、50 mM NaCl、5 mM EDTA (pH 7.5 @ 25°C)

• 10*變性緩沖液： 5% SDS、400 mM DTT

• 10*反應(yīng)緩沖液： 500 mM 醋酸鈉 (pH 6.0 @ 25°C)

產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)

• 高比活性與高純度： 活性高達(dá)500 U/μL，經(jīng)SDS-PAGE和體積排阻色譜雙重驗(yàn)證，純度>95%，確保高效、特異的酶切效果。

• 操作方案成熟： 提供經(jīng)過(guò)優(yōu)化的詳細(xì)操作步驟、專用變性及反應(yīng)緩沖液，實(shí)驗(yàn)流程標(biāo)準(zhǔn)化，結(jié)果可靠。

• 質(zhì)量數(shù)據(jù)詳實(shí)： 提供明確的酶活定義和生物活性驗(yàn)證電泳圖，數(shù)據(jù)支持充分。

• 應(yīng)用廣泛： 是糖蛋白組學(xué)、蛋白質(zhì)分泌與折疊機(jī)制、抗體工程等領(lǐng)域的關(guān)鍵研究工具。

應(yīng)用方向

• 分析糖蛋白的N-連接糖鏈類型（高甘露糖型/雜合型 vs. 復(fù)雜型）

• 研究糖基化對(duì)蛋白質(zhì)折疊、穩(wěn)定性、分泌及功能的影響

• 在Western Blot或質(zhì)譜分析前，簡(jiǎn)化糖蛋白的條帶或譜圖

• 制備去糖基化的蛋白質(zhì)樣品，用于結(jié)構(gòu)或功能研究

• 抗體等重組糖蛋白的質(zhì)量控制

使用說(shuō)明（以處理1-20 μg糖蛋白為例）

1. 變性： 將1-20 μg糖蛋白與1 μl 10*變性緩沖液混合，用無(wú)菌水補(bǔ)足至10 μl。100°C加熱變性10分鐘。

2. 配置反應(yīng)體系： 向上一步變性后的樣品中依次加入：

• 2 μl 10*反應(yīng)緩沖液

• 1-5 μl Endo H (根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求調(diào)整酶量)

• 用無(wú)菌水補(bǔ)足至總體積20 μl

3. 酶切反應(yīng)： 輕輕混勻，置于37°C溫育1小時(shí)。

注意事項(xiàng)

• 底物特異性： Endo H僅切割高甘露糖型和部分雜合型N-糖鏈，對(duì)復(fù)雜型N-糖鏈無(wú)活性。實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)確認(rèn)目標(biāo)糖蛋白的糖型。

• 樣品變性： 為確保酶切效率，糖蛋白樣品必須進(jìn)行熱變性處理。

• 保存： 請(qǐng)避免反復(fù)凍融，建議分裝使用。

• 陰性對(duì)照： 建議設(shè)置不加酶的樣品作為對(duì)照，以觀察糖蛋白本身的電泳遷移位置。

保存條件

本品為液體形式，請(qǐng)于-25 ~ -15°C條件下保存，自收貨之日起保質(zhì)期為2年。

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