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液相色譜法中的干擾峰是廣大色譜工作者甚為頭疼的事情
閱讀：2372發(fā)布時(shí)間：2022-6-22
液相色譜法中的干擾峰是廣大色譜工作者甚為頭疼的事情，下面對(duì)液相色譜引起干擾峰的因素做一個(gè)簡(jiǎn)單的歸納。
一、試劑/溶劑
液相色譜法中，常用的試劑主要是有機(jī)溶劑、各種鹽類(lèi)及水。有機(jī)溶劑一般多為購(gòu)買(mǎi)的色譜級(jí)，所以出現(xiàn)問(wèn)題的幾率較小。但是分裝出的有機(jī)溶劑，由于多次使用，被污染的概率較大，因此引入干擾峰的幾率較。其次是水，水中的雜質(zhì)是干擾峰的主要來(lái)源之一，這是大家易忽視的問(wèn)題。采集波長(zhǎng)較低的檢測(cè)方法，建議使用品質(zhì)水，這樣可以避免多因?yàn)樗|(zhì)帶來(lái)的問(wèn)題。再次是各種鹽類(lèi)，這也是色譜干擾峰的主要來(lái)源之一。
水和無(wú)機(jī)鹽引起的干擾峰，比較快捷的解決方案是安裝鬼峰補(bǔ)集柱，這樣可以的避免此類(lèi)干擾。如果使用離子對(duì)試劑，則需選擇不影響離子對(duì)試劑的鬼峰補(bǔ)集柱。
二、器材
干擾峰來(lái)源的第二個(gè)方面是流動(dòng)相配制及樣品前處理過(guò)程中接觸的各種器材。
首是流動(dòng)相配制過(guò)程中接觸的器材，包括燒杯、玻璃棒、pH計(jì)、濾杯、濾膜、流動(dòng)相瓶等。燒杯、玻璃棒是配制流動(dòng)相首接觸的器材，因此建議配制流動(dòng)相的燒杯、玻璃棒。濾杯實(shí)驗(yàn)人員只要清洗干凈一般不會(huì)帶來(lái)污染。需要注意的是，如果過(guò)濾含有離子對(duì)的流動(dòng)相，建議增加清洗次數(shù)，避免清洗不干凈污染后續(xù)流動(dòng)相。因此，對(duì)濾杯的清洗應(yīng)該建立基本的洗滌規(guī)程，實(shí)驗(yàn)人員對(duì)使用的器材清洗到位。濾膜也是干擾峰引入源頭之一。乙腈經(jīng)過(guò)有機(jī)系濾膜過(guò)濾后，在梯度洗脫中會(huì)引入較大干擾峰。鑒于色譜級(jí)試劑廠(chǎng)家已經(jīng)過(guò)膜，且多數(shù)儀器都有脫氣機(jī)，所以筆者建議無(wú)需再對(duì)甲醇、乙腈等純有機(jī)相過(guò)濾。流動(dòng)相瓶引入干擾峰的現(xiàn)象主要出現(xiàn)在夏季，這是由于夏季溫度，純水相容易滋生細(xì)菌。后續(xù)的流動(dòng)相瓶使用人員清洗不到位，所以導(dǎo)致引入干擾峰。因此流動(dòng)相瓶的清洗要建立嚴(yán)格的洗滌規(guī)程。
再次樣品前處理過(guò)程中接觸的器材。前處理過(guò)程中接觸的器材主要包括容量瓶、濾頭、注射器及進(jìn)樣瓶。容量瓶的清洗同流動(dòng)相瓶、過(guò)濾裝置一樣，要建立良好的清洗規(guī)程。移液器材以及濾頭、注射器，多為塑料制品，其化學(xué)惰性較玻璃制品差，因此容易引入干擾峰。
三、液相系統(tǒng)
與前兩類(lèi)干擾峰相比，液相系統(tǒng)干擾峰的解決較加困難。液相系統(tǒng)是一個(gè)動(dòng)態(tài)過(guò)程，所以此類(lèi)問(wèn)題解決過(guò)程耗費(fèi)時(shí)間長(zhǎng)，而且要求實(shí)驗(yàn)人員有的色譜素養(yǎng)。筆者對(duì)此類(lèi)問(wèn)題來(lái)源主要?dú)w結(jié)為三類(lèi)：保留物質(zhì)、離子對(duì)污染和管路滋生細(xì)菌。
首是保留物質(zhì)的干擾，其主要特征是寬峰。此類(lèi)問(wèn)題多數(shù)發(fā)生在等度洗脫中，梯度洗脫主要出現(xiàn)在比例有機(jī)相處。這是由于保留物質(zhì)在當(dāng)次進(jìn)樣中未洗脫出，在后續(xù)進(jìn)樣洗脫出來(lái)所致。
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