近期發(fā)表于《Nature Communications》（IF=15.7，Q1/1區(qū)）的研究顯示：長期乙醇暴露抑制乙酸輔酶A合成酶2(ACSS2)，阻斷乙酸到乙酰輔酶A的生成；隨之CBP-依賴的組蛋白乙?；瘻p少，使肝臟鐵調(diào)素基因HAMP1/2(hepcidin)轉(zhuǎn)錄受抑。鐵調(diào)控失衡疊加脂質(zhì)過氧化，引發(fā)鐵死亡并加重酒精性肝損傷。補(bǔ)回ACSS2、過表達(dá)HAMP1/2，或給予Fer-1/DFO/重組hepcidin均能顯著改善表型。

疾病痛點(diǎn)：酒精性肝?。ˋlcoholic Liver Disease, ALD）發(fā)病上升、有效藥物缺位，移植幾乎是末期主要選擇——機(jī)制與可成藥靶點(diǎn)稀缺。

機(jī)制新意：把“代謝（ACSS2）-表觀（乙?；?鐵穩(wěn)態(tài)（hepcidin）—細(xì)胞死亡（ferroptosis）”串成閉環(huán)，為ALD的鐵負(fù)荷與肝損傷提供統(tǒng)一解釋。

人群/動物/細(xì)胞多層驗(yàn)證：人群血清乙酸、hepcidin、鐵指標(biāo)；雌雄小鼠乙醇飼喂“急+慢”兩種模型；肝細(xì)胞體外乙醇暴露。

遺傳與藥理雙路徑：肝細(xì)胞特異Acss2敲除、AAV-Acss2回補(bǔ)；ACSS2抑制劑加重表型；AAV-Hamp1/2或hepcidin/Fer-1/DFO糾偏。

核心指標(biāo)：肝功能、生化脂質(zhì)、炎癥因子、鐵穩(wěn)態(tài)（HAMP1/2、FPN、TFRC、普魯士藍(lán)、組織/血清鐵）、鐵死亡（GSH、LPO、4-HNE、C11-BODIPY、ROS、線粒體超微結(jié)構(gòu)）。

部分方法學(xué)

Western blot（化學(xué)發(fā)光成像）

蛋白檢測方法：研究人員將樣本經(jīng)SDS-PAGE分離并轉(zhuǎn)印至0.45 μm NC膜，5%脫脂奶粉封閉后按標(biāo)準(zhǔn)流程完成一抗（4 °C 過夜）與二抗（室溫 90 min）孵育，隨后使用光儀（BIO-OI）OI600全自動化學(xué)發(fā)光凝膠成像系統(tǒng)采集ECL條帶圖像，用于后續(xù)定量分析。

相關(guān)發(fā)現(xiàn)

組蛋白乙?；兓?/span>

檢測H3/H4及其位點(diǎn)乙?；℉3K9ac、H3K14ac、H3K18ac、H3K27ac；H4K5ac、H4K8ac、H4K12ac）條帶，顯示ACSS2下降伴隨乙酰化降低。

ACSS2–CBP相互作用的Co-IP+WB

Flag-ACSS2/HA-CBP過表達(dá)體系與內(nèi)源體系的Co-IP后，以WB條帶確認(rèn)結(jié)合。

鐵穩(wěn)態(tài)/肝損傷相關(guān)蛋白的WB

論文對HAMP1/2（hepcidin）與FPN等鐵穩(wěn)態(tài)關(guān)鍵蛋白進(jìn)行了WB檢測，用于評估ACSS2過表達(dá)或干預(yù)（AAV-Acss2、AAV-Hamp1/2、重組hepcidin、Fer-1/DFO）對通路的糾偏作用；這些WB條帶均按同流程由OI600采集。

Fig 5b:AAV-Acss2 轉(zhuǎn)導(dǎo)效率	Fig 6a-b:組蛋白乙?；稽c(diǎn)（H3K9ac/H3K14ac/H3K18ac/H3K27ac；H4K5ac/H4K8ac/H4K12ac）Western blot。 Fig 6c–f：ACSS2 與 CBP 的 Co-IP + WB。