蒸發(fā)光檢測(cè)器(EvaporativeLightScatteringDetector,簡(jiǎn)稱ELSD)是一種廣泛應(yīng)用于高效液相色譜(HPLC)中的通用型檢測(cè)器。它通過(guò)檢測(cè)樣品顆粒在光散射過(guò)程中的變化來(lái)實(shí)現(xiàn)對(duì)樣品的定量分析。與傳統(tǒng)的紫外檢測(cè)器、熒光檢測(cè)器等相比,它具有獨(dú)特的優(yōu)點(diǎn),尤其適用于那些沒(méi)有紫外吸收或熒光特性的化合物的檢測(cè)。本文將詳細(xì)介紹它的工作原理、應(yīng)用領(lǐng)域、優(yōu)勢(shì)以及使用注意事項(xiàng)。
工作原理
工作原理基于光散射現(xiàn)象。具體過(guò)程如下:
霧化:HPLC中的液體洗脫液首先被霧化,形成含有被分析物的氣溶膠。這一過(guò)程在霧化室內(nèi)完成,液體流動(dòng)相在載氣壓力的作用下被轉(zhuǎn)變?yōu)榧?xì)小的液滴,從而使溶劑更易于蒸發(fā)。
蒸發(fā):形成的氣溶膠隨后進(jìn)入加熱的漂移管,在此過(guò)程中,溶劑被蒸發(fā),留下不揮發(fā)性的溶質(zhì)顆粒。液滴的大小和均勻性是保證檢測(cè)器靈敏度和重復(fù)性的重要因素。蒸發(fā)光散射檢測(cè)器通過(guò)對(duì)氣壓和溫度的精確控制,確保在霧化室內(nèi)形成一個(gè)較窄的液滴尺寸分布,使液滴蒸發(fā)所需的溫度大大降低。
光散射檢測(cè):蒸發(fā)后的溶質(zhì)顆粒進(jìn)入光檢測(cè)池,并穿過(guò)激光光束。被溶質(zhì)顆粒散射的光通過(guò)光電倍增管進(jìn)行收集。溶質(zhì)顆粒在進(jìn)入光檢測(cè)池時(shí)被輔助載氣所包封,避免溶質(zhì)在檢測(cè)池內(nèi)的分散和沉淀在壁上,極大增強(qiáng)了檢測(cè)靈敏度并極大地降低了檢測(cè)池表面的污染。
應(yīng)用領(lǐng)域
蒸發(fā)光檢測(cè)器因其獨(dú)特的檢測(cè)原理和廣泛的適用性,被廣泛應(yīng)用于多個(gè)領(lǐng)域:
碳水化合物:如糖類、多糖等的檢測(cè)。
類脂:如磷脂、脂肪酸等的檢測(cè)。
氨基酸:尤其是未衍生化的氨基酸。
藥物:包括中藥及中成藥中的有效成分測(cè)定。
聚合物:如高分子材料的分子量分布測(cè)定。
優(yōu)勢(shì)
蒸發(fā)光檢測(cè)器具有以下顯著優(yōu)勢(shì):
通用性強(qiáng):可以檢測(cè)任何非揮發(fā)性分析物,不受樣品光學(xué)性質(zhì)的限制。樣品無(wú)需具有光吸收特性或熒光特性,因此適用于那些無(wú)法用紫外檢測(cè)器或熒光檢測(cè)器檢測(cè)的化合物。
靈敏度高:采用低溫蒸發(fā)模式,維持了顆粒的均勻性,對(duì)半揮發(fā)性物質(zhì)和熱敏性化合物同樣具有較好的靈敏度。
梯度兼容性好:可以使用梯度洗脫優(yōu)化分離效果,且不會(huì)出現(xiàn)基線漂移現(xiàn)象。
無(wú)溶劑峰干擾:由于流動(dòng)相和溶劑都蒸發(fā)了,檢測(cè)的色譜圖一般沒(méi)有溶劑峰,基線更加穩(wěn)定。
響應(yīng)與質(zhì)量成正比:檢測(cè)信號(hào)的強(qiáng)弱與物質(zhì)的質(zhì)量多少成正比,因此可以容易地計(jì)算出化合物的相對(duì)數(shù)量。
蒸發(fā)光檢測(cè)器作為一種通用型檢測(cè)器,憑借其獨(dú)特的檢測(cè)原理和廣泛的應(yīng)用領(lǐng)域,已成為現(xiàn)代色譜分析中的重要工具。它不僅能夠檢測(cè)那些沒(méi)有紫外吸收或熒光特性的化合物,還能提供高靈敏度和穩(wěn)定的基線,適用于多種復(fù)雜樣品的分析。隨著技術(shù)的不斷進(jìn)步,蒸發(fā)光檢測(cè)器將在更多的領(lǐng)域發(fā)揮其重要作用,為科學(xué)研究和工業(yè)生產(chǎn)提供強(qiáng)有力的支持。

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