鞘液技術(shù)作為全自動動態(tài)微粒圖像分析儀的核心組成部分，在保證顆粒分析準(zhǔn)確性方面發(fā)揮著不可替代的作用。本文深入探討了鞘液系統(tǒng)的工作原理、技術(shù)特性及其對顆粒成像和分析質(zhì)量的影響機(jī)制，并結(jié)合實(shí)際應(yīng)用場景提供了詳細(xì)的選型與使用指導(dǎo)，為相關(guān)領(lǐng)域研究人員和技術(shù)人員提供全面的技術(shù)參考。

1 鞘液技術(shù)的基本原理與系統(tǒng)構(gòu)成

動態(tài)圖像分析技術(shù)是現(xiàn)代顆粒分析領(lǐng)域的重要分支，而鞘液系統(tǒng)則是該技術(shù)的核心組成部分。全自動動態(tài)微粒圖像分析儀的基本工作原理是將樣品制成一定濃度的懸浮液后，通過精密泵系統(tǒng)將其注入鞘液樣品池中。與此同時，鞘液泵也將鞘液（通常為純凈水）注入樣品池，并將樣品流包裹在中間，形成所謂的"鞘流效應(yīng)"。

這種流體聚焦機(jī)制是實(shí)現(xiàn)高精度顆粒分析的基礎(chǔ)。在理想狀態(tài)下，鞘液與樣品流以穩(wěn)定流速共同流過觀測區(qū)，鞘液圍繞在顆粒四周，強(qiáng)制顆粒排成一個隊(duì)列。這種排列機(jī)制確保了顆粒在通過拍攝區(qū)域時，能夠逐個通過顯微鏡的焦平面，避免了傳統(tǒng)靜態(tài)圖像分析中常見的顆粒重疊和離焦現(xiàn)象。

鞘液系統(tǒng)通常由以下幾個關(guān)鍵組件構(gòu)成：

· 鞘液儲液裝置：提供穩(wěn)定、潔凈的鞘液源

· 精密泵系統(tǒng)：控制鞘液和樣品流的流速與比例

· 鞘流樣品池：實(shí)現(xiàn)流體聚焦的關(guān)鍵部件

· 流體管路連接：保證液體傳輸?shù)姆€(wěn)定性和一致性

通過這些組件的協(xié)同工作，鞘液系統(tǒng)創(chuàng)造了穩(wěn)定、可控的流體環(huán)境，為后續(xù)的高質(zhì)量圖像采集和分析奠定了堅(jiān)實(shí)基礎(chǔ)。

2 鞘液技術(shù)對分析性能的關(guān)鍵影響

2.1 圖像質(zhì)量提升機(jī)制

鞘液技術(shù)對圖像質(zhì)量的提升是全面且至關(guān)重要的。動態(tài)圖像粒度粒形分析系統(tǒng)依靠高速相機(jī)通過顯微鏡連續(xù)拍攝流動中的顆粒圖像，而鞘液技術(shù)確保了這些圖像的清晰度和準(zhǔn)確性。

通過流體聚焦技術(shù)，樣品流被鞘液包裹并約束在狹窄的中央?yún)^(qū)域，使得顆粒在流動過程中保持在場中央，不會因擴(kuò)散而導(dǎo)致圖像模糊。更為重要的是，這種機(jī)制確保了顆粒隊(duì)列恰好位于鏡頭的焦平面上，消除了離焦現(xiàn)象，從而捕獲到邊緣清晰、細(xì)節(jié)分明的顆粒圖像。對于需要精確形態(tài)分析的領(lǐng)域，如針狀粉體行業(yè)，清晰的圖像是準(zhǔn)確計(jì)算長徑比及分布的前提。

2.2 分析精度與準(zhǔn)確性保障

鞘液技術(shù)通過多種機(jī)制保障分析結(jié)果的精度與準(zhǔn)確性。首先，鞘液系統(tǒng)通過迫使顆粒排隊(duì)通過檢測區(qū)域，顯著減少了顆粒間的重疊和粘連。這一特性不僅提高了單個顆粒圖像的清晰度，還直接降低了因顆粒重疊導(dǎo)致的識別錯誤和測量偏差。

研究表明，采用優(yōu)質(zhì)鞘液和優(yōu)化鞘流參數(shù)的系統(tǒng)，其重復(fù)性誤差可控制在≤1%，準(zhǔn)確性誤差同樣≤1%。這種高水平的精度對于質(zhì)量控制和合規(guī)性檢測至關(guān)重要。例如，在生物制藥領(lǐng)域，準(zhǔn)確的蛋白顆粒分析和硅油滴區(qū)分依賴于優(yōu)化的鞘液系統(tǒng)提供的可靠數(shù)據(jù)。

此外，良好的鞘液系統(tǒng)還能提高分析速度。采用高速CCD、精密柱塞泵和快速顆粒圖像識別技術(shù)的系統(tǒng)，每分鐘能拍攝并處理1-5萬個顆粒，這種高效率很大程度上歸功于鞘液系統(tǒng)創(chuàng)造的穩(wěn)定、均勻的顆粒流。

3 鞘液的選擇與優(yōu)化策略

3.1 鞘液性質(zhì)對分析的影響

選擇合適的鞘液是確保分析結(jié)果準(zhǔn)確性的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。鞘液的物理性質(zhì)和化學(xué)兼容性都會對分析過程產(chǎn)生顯著影響。

折射率是鞘液選擇中的重要參數(shù)。研究表明，當(dāng)樣品的折射率與鞘液不匹配時，可能會損害光學(xué)條件。例如，在蛋白顆粒分析中，配方折射率增加會損害光學(xué)條件，而優(yōu)化的鞘液系統(tǒng)能夠在這種情況下仍保持準(zhǔn)確的顆粒量化能力。

化學(xué)兼容性同樣不可忽視。根據(jù)Sysmex FPIA-3000系統(tǒng)的實(shí)踐，兼容的鞘液試劑包括水溶性顆粒鞘液試劑、甲醇、乙醇、異丙醇以及乙二醇溶液(25%)等多種介質(zhì)。這種多樣性使得用戶可以根據(jù)樣品特性選擇最合適的鞘液，避免化學(xué)不相容導(dǎo)致的顆粒溶解、膨脹或變形。

純凈度是鞘液選擇的另一關(guān)鍵考量。雜質(zhì)含量高的鞘液會引入背景顆粒，干擾實(shí)際樣品的分析和統(tǒng)計(jì)結(jié)果。因此，建議使用高質(zhì)量純凈水或經(jīng)過嚴(yán)格過濾的專業(yè)鞘液產(chǎn)品。

3.2 鞘液參數(shù)優(yōu)化與實(shí)踐建議

在實(shí)際應(yīng)用中，鞘液參數(shù)的優(yōu)化同樣至關(guān)重要：

· 流速控制：鞘液與樣品流的流速比例直接影響樣品流的寬度和顆粒分散程度。一般建議保持鞘液流速穩(wěn)定，并通過調(diào)整樣品流速來優(yōu)化圖像質(zhì)量

· 溫度管理：保持鞘液溫度穩(wěn)定可以避免氣泡形成，因?yàn)闇囟茸兓赡軐?dǎo)致溶解空氣釋放，產(chǎn)生微小氣泡干擾圖像分析

· 脫氣處理：對鞘液進(jìn)行預(yù)先脫氣處理可有效減少氣泡形成，避免氣泡被誤判為顆粒

· 系統(tǒng)清潔：定期清潔鞘液系統(tǒng)至關(guān)重要，殘留污染物可能影響流體穩(wěn)定性并污染后續(xù)樣品。建議按照儀器說明書建立定期維護(hù)計(jì)劃

4 應(yīng)用場景與故障排除

4.1 行業(yè)應(yīng)用實(shí)例

鞘液技術(shù)在多個行業(yè)的顆粒分析中發(fā)揮著重要作用：

在生物制藥領(lǐng)域，動態(tài)成像技術(shù)結(jié)合鞘液系統(tǒng)用于蛋白顆粒分析和硅油滴區(qū)分。例如，研究比較了四種流式成像顯微鏡系統(tǒng)，發(fā)現(xiàn)FlowCAM PV系統(tǒng)在配方折射率增加的情況下仍能提供精確的蛋白顆粒量化。

在粉體材料領(lǐng)域，如磨料（碳化硅、剛玉）、電池材料（球形石墨粉）、金屬粉（球形鋁粉）等行業(yè)，鞘液技術(shù)幫助實(shí)現(xiàn)了對顆粒形狀和大小的精確分析。特別對于針狀粉體如硅灰石，鞘流技術(shù)使顆粒在流動時自動選擇阻力最小的方向，CCD捕獲到的是分離的、長軸方向一致的清晰圖像，從而快速獲取準(zhǔn)確的長徑比及分布。

在生物技術(shù)領(lǐng)域，如蛋白質(zhì)晶體、藻類分析中，鞘液系統(tǒng)確保了敏感生物樣本的可靠分析，不會因流體剪切力破壞樣本完整性。

4.2 常見故障與排除方法

鞘液系統(tǒng)常見問題及解決方案包括：

· 圖像模糊或不清晰：可能源于鞘流不穩(wěn)定，檢查鞘液泵是否正常工作，鞘液是否充足，管路是否有堵塞

· 分析結(jié)果重復(fù)性差：可能由于鞘液中有氣泡，應(yīng)對鞘液進(jìn)行脫氣處理，并檢查系統(tǒng)密封性

· 背景噪音增加：可能是鞘液污染或過濾器堵塞導(dǎo)致，更換鞘液并清潔過濾芯

· 顆粒計(jì)數(shù)異常：檢查鞘液與樣品的流速比例是否恰當(dāng)，重新校準(zhǔn)流速參數(shù)

定期執(zhí)行儀器提供的自動清洗程序可預(yù)防許多鞘液系統(tǒng)問題。對于難以清除的污染物，如某些熒光染料，可能需要使用特殊清洗方案，如1% NaClO溶液清洗，再用超純水充分沖洗。

5 結(jié)論與展望

鞘液技術(shù)作為全自動動態(tài)微粒圖像分析儀的關(guān)鍵技術(shù)，對確保分析結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性起著決定性作用。通過流體聚焦機(jī)制，鞘液系統(tǒng)創(chuàng)造了穩(wěn)定、可控的顆粒流環(huán)境，為高質(zhì)量圖像采集和精確數(shù)據(jù)分析提供了基礎(chǔ)。隨著顆粒分析技術(shù)的不斷發(fā)展，鞘液系統(tǒng)的優(yōu)化與創(chuàng)新將繼續(xù)推動分析精度和應(yīng)用范圍的擴(kuò)展。

未來的鞘液技術(shù)可能會朝著更高度的標(biāo)準(zhǔn)化、專業(yè)化和智能化方向發(fā)展，如針對特殊樣品的專用鞘液配方、智能流速調(diào)節(jié)系統(tǒng)以及更高程度的集成化和自動化。這些進(jìn)步將進(jìn)一步鞏固鞘液技術(shù)在顆粒分析領(lǐng)域的核心地位，為科研和工業(yè)應(yīng)用提供更強(qiáng)大的技術(shù)支持。
對于使用者而言，深入理解鞘液技術(shù)原理，根據(jù)樣品特性選擇合適的鞘液類型和參數(shù)，并建立科學(xué)的維護(hù)流程，是確保全自動動態(tài)微粒圖像分析儀始終處于最佳工作狀態(tài)的關(guān)鍵。