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從底物追蹤到機(jī)制破解,穩(wěn)定同位素動(dòng)物代謝研究技術(shù)方案

來(lái)源:北京易科泰生態(tài)技術(shù)有限公司    2025年11月21日 13:25  

穩(wěn)定同位素技術(shù)正以代謝探針的創(chuàng)新角色,重塑動(dòng)物代謝研究的認(rèn)知邊界。其核心優(yōu)勢(shì)在于突破傳統(tǒng)靜態(tài)分析的局限,憑借標(biāo)記底物與生物體內(nèi)源分子的天然兼容性,實(shí)現(xiàn)代謝過(guò)程的實(shí)時(shí)動(dòng)態(tài)追蹤、多維度通量量化及未知反應(yīng)挖掘,為解析動(dòng)物正常生理代謝、疾病相關(guān)代謝紊亂機(jī)制提供了高精準(zhǔn)、無(wú)干擾的研究工具,成為連接整體表型與分子機(jī)制的關(guān)鍵技術(shù)橋梁。

 

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文獻(xiàn)一:算清全身“流水賬”——Cell Metabolism 2025

哈佛大學(xué)團(tuán)隊(duì)通過(guò)構(gòu)建小鼠全機(jī)體能量通量模型量化10種主要循環(huán)營(yíng)養(yǎng)素的氧化、儲(chǔ)存、再循環(huán)與互變速率,比較lean正常飲食組、HFD高脂飲食組leptin缺陷ob/ob小鼠一種先天性缺乏瘦素、極度肥胖且患有嚴(yán)重高血糖的模型的代謝經(jīng)濟(jì)差異。

 

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實(shí)驗(yàn)聯(lián)合13C-底物輸注、血清LC-MS穩(wěn)定同位素分析儀,對(duì)10種主要營(yíng)養(yǎng)素進(jìn)行收支盤(pán)點(diǎn):循環(huán)乳酸鹽96%被氧化,而葡萄糖僅81%,必需氨基酸僅30%左右,顯示不同底物存在固有的氧化/儲(chǔ)存分配比;在lean小鼠中,所有營(yíng)養(yǎng)素的無(wú)效循環(huán)通量(糖原-葡萄糖、TAG-NEFA、蛋白周轉(zhuǎn))合計(jì)比氧化通量還高23%,浪費(fèi)約9%的總ATP;ob/ob小鼠的循環(huán)通量整體升高2倍,ATP浪費(fèi)增至12%,而HFD小鼠與lean差異不大,提示造成代謝“無(wú)效循環(huán)”亢進(jìn)、能量大量浪費(fèi)的關(guān)鍵原因,是瘦素這種激素的缺失,而不是單純的體重增加或脂肪過(guò)多,在臨床治療某些代謝綜合征時(shí),糾正“瘦素信號(hào)缺失”比單純“減重”更為關(guān)鍵。


文獻(xiàn)二:把葡萄糖“追”到細(xì)胞器——Nature Communications 2025

Vanderbilt團(tuán)隊(duì)Nature Communications發(fā)表了一項(xiàng)研究成果,給清醒小鼠持續(xù)靜脈輸注vs低劑量[U-13C?]-葡萄糖,他們發(fā)現(xiàn):高劑量組(40mg60min內(nèi)13CO2呼出達(dá)到平臺(tái)期,同時(shí)抽血測(cè)葡萄糖同位素標(biāo)記,發(fā)現(xiàn)80%的葡萄糖分子6個(gè)碳全部被13C取代(M+6),把肝臟取出來(lái)測(cè)糖原,發(fā)現(xiàn)其葡萄糖單元里有3050%13C標(biāo)記的,證明從血液里“現(xiàn)成”的13C-葡萄糖直接被肝臟抓去合成糖原,合成速度極快;結(jié)合MALDI-MS成像、MIMS-EM等技術(shù),該研究把器官-細(xì)胞-細(xì)胞器三級(jí)代謝圖譜串成一條時(shí)間軸。

 

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文獻(xiàn)三:運(yùn)動(dòng)時(shí)間是否重要?---Metabolism 2024

為了探討運(yùn)動(dòng)時(shí)間(晝夜節(jié)律)對(duì)運(yùn)動(dòng)后底物代謝的影響,以及肥胖如何改變這種時(shí)間-代謝可塑性,Karolinska與哥本哈根團(tuán)隊(duì)讓leanHFD小鼠分別在靜息期(ZT3)或活動(dòng)期(ZT15)跑臺(tái)60min,隨后灌胃[U-13C6]-葡萄糖并連續(xù)測(cè)13CO2呼出。

結(jié)果顯示,Lean小鼠僅在活動(dòng)期運(yùn)動(dòng)后表現(xiàn)出13C-葡萄糖氧化峰值下降、脂解升高,呈現(xiàn)時(shí)間-運(yùn)動(dòng)雙重效應(yīng);HFD小鼠則失去晝夜差異,運(yùn)動(dòng)時(shí)間不再影響氧化曲線,提示肥胖導(dǎo)致代謝可塑性受損;經(jīng)脂肪組織離體實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步表明運(yùn)動(dòng)對(duì)代謝的改善效果依賴晝夜時(shí)段。

 

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北京易科泰生態(tài)技術(shù)有限公司作為深耕動(dòng)物代謝研究領(lǐng)域的專業(yè)技術(shù)服務(wù)商,憑借其十余年行業(yè)積淀與國(guó)際技術(shù)合作資源,成為動(dòng)物穩(wěn)定同位素相關(guān)設(shè)備在國(guó)內(nèi)的核心推廣與技術(shù)支撐力量。公司提供的穩(wěn)定同位素氣體分析系統(tǒng)具備:

高精度檢測(cè):δ13C精度達(dá)0.6

多參數(shù)同步監(jiān)測(cè):同步測(cè)量13CO?、H2O等關(guān)鍵指標(biāo),結(jié)合耗氧量VO2、二氧化碳產(chǎn)生量VCO2等多維度參數(shù),解鎖代謝過(guò)程全貌

響應(yīng)快速1Hz測(cè)量頻率

無(wú)需額外耗材校準(zhǔn)

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該系統(tǒng)可靈活搭配呼吸代謝系統(tǒng)、小動(dòng)物跑步機(jī)等設(shè)備,形成從整體代謝到底物氧化追蹤的完整解決方案,高效開(kāi)展動(dòng)物生理生態(tài)、生物醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域的創(chuàng)新研究。

 

參考文獻(xiàn):

[1] Habashy A, Acree C, Kim K-Y, et al. Spatial patterns of hepatocyte glucose flux revealed by stable isotope tracing and multiscale microscopy [J]. Nature Communications, 2025, 16: 5850. DOI:10.1038/s41467-025-60994-w.

[2] Yuan B, Doxsey W, Tok ?, et al. An organism-level quantitative flux model of energy metabolism in mice [J]. Cell Metabolism, 2025, 37(4): 1-12. DOI:10.1016/j.cmet.2025.01.008.

[3] Pendergrast L A, Ashcroft S P, Ehrlich A M, et al. Metabolic plasticity and obesity-associated changes in diurnal postexercise metabolism in mice [J]. Metabolism, 2024, 155: 155834. DOI:10.1016/j.metabol.2024.155834.

[4] Welch K C Jr, Péronnet F, Hatch K A, et al. Carbon stable-isotope tracking in breath for comparative studies of fuel use [J]. Annals of the New York Academy of Sciences, 2016, 1365: 15-32. DOI:10.1111/nyas.12737.

 


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