安捷倫LC-MSMS液相色譜--質(zhì)譜聯(lián)用儀--維護(hù)指南

液相色譜 - 質(zhì)譜聯(lián)用儀（LC-MS/MS）維護(hù)指導(dǎo)

一、日常維護(hù)（每日 / 每次實(shí)驗(yàn)前后）

（一）液相色譜（LC）部分

1. 流動(dòng)相與溶劑管理

• 流動(dòng)相需使用 色譜純?cè)噭?，水需為超純水（電阻率?8.2 MΩ?cm），避免雜質(zhì)污染色譜柱與離子源。

• 流動(dòng)相配制后需 超聲脫氣 10-15 min（或使用在線脫氣機(jī)），防止氣泡進(jìn)入泵體導(dǎo)致壓力波動(dòng)、峰形異常。

• 含緩沖鹽（如 ammonium acetate、formic acid-ammonium formate 等）的流動(dòng)相需 現(xiàn)配現(xiàn)用，避免微生物滋生（緩沖鹽溶液放置不超過(guò) 48 h）；實(shí)驗(yàn)結(jié)束后需用無(wú)鹽流動(dòng)相（如甲醇 - 水、乙腈 - 水）沖洗管路與色譜柱，防止鹽結(jié)晶堵塞。

• 溶劑瓶需定期清洗（每周 1 次），避免殘留溶劑與雜質(zhì)累積；瓶口密封墊若出現(xiàn)老化、滲漏，需及時(shí)更換。

2. 泵系統(tǒng)檢查

• 開(kāi)機(jī)前檢查溶劑瓶液位，確保溶劑充足（不低于瓶身 1/3），避免泵空轉(zhuǎn)損壞密封圈。

• 觀察泵壓力曲線：基線壓力應(yīng)穩(wěn)定（波動(dòng)≤±2%），若壓力驟升（可能是管路堵塞、色譜柱污染）或驟降（可能是漏液、溶劑耗盡），需立即停機(jī)排查。

• 實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，用 100% 甲醇或乙腈沖洗泵管路 15-30 min（流速 0.2-0.5 mL/min），保護(hù)泵密封墊與單向閥。

3. 進(jìn)樣器維護(hù)

• 每次實(shí)驗(yàn)前，用流動(dòng)相或樣品溶劑沖洗進(jìn)樣針 3-5 次，避免樣品交叉污染。

• 定期檢查進(jìn)樣針是否有堵塞、彎曲，若出現(xiàn)樣品殘留嚴(yán)重（峰形拖尾、重現(xiàn)性差），需用甲醇 - 水（1:1）或?qū)Ｓ们逑匆撼暻逑催M(jìn)樣針（10 min）。

• 檢查進(jìn)樣口密封墊（ septum ）：若出現(xiàn)滲漏、磨損（進(jìn)樣時(shí)阻力增大），需及時(shí)更換（一般每 500-1000 次進(jìn)樣更換 1 次）。

4. 色譜柱保護(hù)

• 色譜柱使用前需確認(rèn)流動(dòng)相兼容性（避免使用與固定相反應(yīng)的溶劑），并按柱說(shuō)明書(shū)設(shè)定柱溫（±1℃ 穩(wěn)定）。

• 樣品需經(jīng) 0.22 μm 濾膜過(guò)濾（或離心 12000 rpm/10 min），去除顆粒物，防止堵塞色譜柱篩板。

• 實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，用梯度洗脫方式?jīng)_洗色譜柱：先以 10% 有機(jī)相沖洗 10 柱體積（去除緩沖鹽），再用 90% 有機(jī)相沖洗 15 柱體積（去除強(qiáng)保留雜質(zhì)），最后以 50% 有機(jī)相平衡色譜柱，密封保存（反相柱用甲醇 / 乙腈，正相柱用正己烷）。

（二）質(zhì)譜（MS/MS）部分

1. 離子源清潔與檢查

• 噴針：用甲醇或異丙醇擦拭外壁，若堵塞可將針尖浸入甲醇 - 水（1:1）超聲 5 min（避免超聲時(shí)間過(guò)長(zhǎng)損壞噴針）。

• 錐孔 / 毛細(xì)管：用蘸有甲醇的無(wú)塵紙輕輕擦拭，或用 5% 硝酸溶液浸泡 10 min（去除金屬殘留），再用超純水沖洗、烘干（60℃ 烘箱 30 min）。

• 每次實(shí)驗(yàn)前，目視檢查離子源噴針、錐孔（或毛細(xì)管）是否有結(jié)晶、殘留（表現(xiàn)為質(zhì)譜響應(yīng)降低、基線噪音增大），若有污染需及時(shí)清潔。

• 清潔方法：

• 檢查離子源氣體（氮?dú)?/ 氬氣）壓力：霧化氣、干燥氣壓力需符合儀器要求（一般霧化氣 0.3-0.5 MPa，干燥氣 0.2-0.4 MPa），氣體需經(jīng)分子篩過(guò)濾（去除水分、油霧）。

2. 質(zhì)量軸校準(zhǔn)

• 每次開(kāi)機(jī)后，需進(jìn)行質(zhì)量軸校準(zhǔn)（使用儀器專(zhuān)用校準(zhǔn)液，如 Pierce LTQ Velos 校準(zhǔn)液、Agilent ESI Tuning Mix），確保質(zhì)荷比（m/z）準(zhǔn)確性（誤差≤±0.1 Da）。

• 若實(shí)驗(yàn)過(guò)程中出現(xiàn)峰漂移、定性錯(cuò)誤，需重新校準(zhǔn)質(zhì)量軸。

3. 真空系統(tǒng)檢查

• 開(kāi)機(jī)后觀察真空度：質(zhì)譜真空系統(tǒng)（機(jī)械泵 + 分子泵）需達(dá)到設(shè)定真空值（一般一級(jí)真空＜10?3 mbar，二級(jí)真空＜10?? mbar），若真空度無(wú)法達(dá)標(biāo)（可能是密封圈老化、真空閥故障、分子泵損壞），需停機(jī)排查。

• 機(jī)械泵維護(hù)：檢查機(jī)械泵油位（需在油標(biāo)上下限之間），若油色變深、渾濁（一般每 6-12 個(gè)月），需更換機(jī)械泵油（使用儀器專(zhuān)用油，如 Edwards Ultragrade 19）；更換后需運(yùn)行機(jī)械泵 30 min 排氣。

4. 檢測(cè)器保護(hù)

• 避免高濃度樣品直接進(jìn)樣（樣品濃度需匹配儀器檢測(cè)范圍，一般 ng/mL-μg/mL 級(jí)別），防止檢測(cè)器飽和損壞。

• 實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，繼續(xù)通干燥氣 15-30 min，吹干離子源內(nèi)部殘留溶劑，避免水分凝結(jié)影響真空系統(tǒng)。

二、定期保養(yǎng)（每周 / 每月 / 每季度 / 每年）

（一）每周保養(yǎng)

1. 清洗溶劑瓶與進(jìn)樣器樣品環(huán)：用甲醇 - 水（1:1）超聲清洗溶劑瓶（10 min），進(jìn)樣器樣品環(huán)用 100% 甲醇沖洗 20 min（流速 0.5 mL/min）。

2. 檢查色譜柱性能：通過(guò)進(jìn)樣標(biāo)準(zhǔn)品（如利血平），觀察保留時(shí)間 RSD（≤1%）、峰面積 RSD（≤3%）、理論塔板數(shù)（需符合柱說(shuō)明書(shū)要求），若性能下降需進(jìn)行柱再生（反相柱：用甲醇 - 乙腈 - 水 = 50:40:10 沖洗 20 柱體積）。

3. 清潔離子源腔體：拆除離子源組件，用甲醇擦拭腔體內(nèi)部，去除殘留污染物，晾干后重新安裝。

（二）每月保養(yǎng)

1. 更換泵密封墊與單向閥：若泵壓力波動(dòng)大、漏液，需更換泵頭密封墊（一般每 3-6 個(gè)月）；單向閥若出現(xiàn)堵塞（表現(xiàn)為流速不穩(wěn)），用甲醇超聲清洗 10 min，或直接更換。

2. 檢查質(zhì)譜傳輸線：傳輸線若有殘留，用蘸有甲醇的無(wú)塵紙擦拭，避免污染物進(jìn)入質(zhì)量分析器。

3. 校準(zhǔn)流速準(zhǔn)確性：用容量瓶校準(zhǔn)泵流速（設(shè)定流速 1.0 mL/min，收集 10 min 流出液，稱重計(jì)算實(shí)際流速，誤差≤±2%）。

4. 更換氮?dú)?/ 氬氣鋼瓶：若鋼瓶壓力低于 0.5 MPa，及時(shí)更換，更換后 purge 管路 5 min，去除空氣。

（三）每季度保養(yǎng)

1. 更換色譜柱篩板：若色譜柱壓力持續(xù)升高，且沖洗后無(wú)改善，可能是篩板堵塞，需更換色譜柱入口篩板（按柱型號(hào)匹配）。

2. 清潔質(zhì)量分析器：對(duì)于三重四極桿質(zhì)譜，需清潔四極桿電極（用甲醇擦拭，避免劃傷電極表面）；若儀器配備碰撞池（如 Q2），需檢查碰撞氣（氬氣）流量，確保碰撞效率穩(wěn)定。

3. 檢查機(jī)械泵密封圈：若機(jī)械泵出現(xiàn)漏油、真空度下降，需更換密封圈（使用儀器專(zhuān)用配件）。

4. 驗(yàn)證儀器檢出限與精密度：進(jìn)樣低濃度標(biāo)準(zhǔn)品（接近檢出限），計(jì)算檢出限（S/N≥3）與精密度（峰面積 RSD≤5%），確保儀器性能達(dá)標(biāo)。

（四）每年保養(yǎng)（建議由廠家工程師執(zhí)行）

1. 更換分子泵：分子泵使用壽命一般為 5000-8000 小時(shí)，若出現(xiàn)真空度下降、噪音增大，需更換分子泵。

2. 全面清潔質(zhì)譜腔體：拆除質(zhì)量分析器、檢測(cè)器等核心部件，專(zhuān)業(yè)清潔內(nèi)部殘留污染物（如離子源逸散的鹽類(lèi)、有機(jī)物）。

3. 校準(zhǔn)檢測(cè)器響應(yīng)：使用標(biāo)準(zhǔn)品校準(zhǔn)檢測(cè)器靈敏度，確保線性范圍（一般 R2≥0.995）。

4. 檢查電路系統(tǒng)：排查儀器主板、電源、連接線是否有老化、松動(dòng)，確保電路安全穩(wěn)定。

三、關(guān)鍵部件維護(hù)要點(diǎn)

（一）色譜柱

• 禁止使用pH 流動(dòng)相（反相柱一般 pH 2-8，正相柱 pH 3-7），避免固定相水解。

• 避免驟冷驟熱：柱溫變化速率≤5℃/min，防止色譜柱填料塌陷。

• 長(zhǎng)期不用時(shí)，需密封保存于陰涼干燥處，避免陽(yáng)光直射。

（二）離子源

• 不同離子源（ESI、APCI、MALDI）維護(hù)差異：

• ESI 源：重點(diǎn)清潔噴針、毛細(xì)管，避免緩沖鹽結(jié)晶（建議流動(dòng)相中緩沖鹽濃度≤10 mM）。

• APCI 源：清潔加熱毛細(xì)管與 corona 放電針，防止有機(jī)物碳化殘留。

• MALDI 源：清潔樣品靶（用甲醇擦拭，或超聲清洗），避免樣品交叉污染。

• 離子源溫度控制：干燥氣溫度需高于流動(dòng)相沸點(diǎn) 10-20℃，防止溶劑冷凝（如甲醇流動(dòng)相，干燥氣溫度≥50℃）。

（三）真空系統(tǒng)

• 機(jī)械泵：避免頻繁啟停（每次停機(jī)后需間隔 30 min 再開(kāi)機(jī)），防止泵油乳化。

• 分子泵：運(yùn)行時(shí)禁止觸碰，避免震動(dòng)影響真空穩(wěn)定性；若遇突然停電，需關(guān)閉儀器電源，待來(lái)電后按程序重啟（先開(kāi)機(jī)械泵，待真空達(dá)標(biāo)后再開(kāi)分子泵）。

（四）檢測(cè)器

• 避免長(zhǎng)時(shí)間暴露在高濃度離子流中（如連續(xù)進(jìn)樣高濃度標(biāo)準(zhǔn)品），防止檢測(cè)器疲勞。

• 若檢測(cè)器響應(yīng)降低，可清潔檢測(cè)器窗口（用甲醇擦拭），或聯(lián)系廠家進(jìn)行檢測(cè)器校準(zhǔn)。

四、故障預(yù)防與注意事項(xiàng)

1. 實(shí)驗(yàn)室環(huán)境控制

2. 溫度：20-25℃（波動(dòng)≤±2℃），避免靠近熱源（如烘箱、空調(diào)出風(fēng)口）。

3. 濕度：40%-60%，濕度過(guò)高易導(dǎo)致儀器內(nèi)部結(jié)露、電路短路；濕度過(guò)低易產(chǎn)生靜電，影響質(zhì)譜信號(hào)。

4. 電源：使用穩(wěn)壓電源（電壓 220V±10%，頻率 50Hz±1Hz），避免電壓波動(dòng)損壞儀器。

5. 
   

6. 操作規(guī)范

7. 嚴(yán)格按儀器操作規(guī)程開(kāi)機(jī) / 關(guān)機(jī)：開(kāi)機(jī)順序（LC→MS 機(jī)械泵→MS 分子泵→真空達(dá)標(biāo)→校準(zhǔn)→實(shí)驗(yàn)）；關(guān)機(jī)順序（停止進(jìn)樣→沖洗 LC 管路與色譜柱→關(guān)閉 MS 離子源→關(guān)閉分子泵→待真空釋放后關(guān)閉機(jī)械泵→關(guān)閉 LC）。

8. 禁止在真空未達(dá)標(biāo)時(shí)進(jìn)樣，禁止用強(qiáng)腐蝕性溶劑（如濃鹽酸、氫氧化鈉溶液）作為流動(dòng)相。

9. 樣品前處理需規(guī)范：避免樣品中含有高濃度鹽、強(qiáng)氧化性物質(zhì)（如過(guò)氧化氫），防止損壞離子源與色譜柱。

10. 常見(jiàn)故障預(yù)警與處理

    故障現(xiàn)象	可能原因	預(yù)防措施
    泵壓力驟升	管路堵塞、色譜柱篩板堵塞	樣品過(guò)濾、定期沖洗管路、更換色譜柱篩板
    質(zhì)譜響應(yīng)降低	離子源污染、質(zhì)量軸漂移	每日清潔離子源、定期校準(zhǔn)質(zhì)量軸
    峰形拖尾 / 分裂	色譜柱污染、進(jìn)樣量過(guò)大	柱再生、減少進(jìn)樣量、優(yōu)化流動(dòng)相 pH
    真空度不達(dá)標(biāo)	密封圈老化、機(jī)械泵油污染	定期更換密封圈與機(jī)械泵油、檢查真空閥
    定性錯(cuò)誤	質(zhì)量軸偏移、標(biāo)準(zhǔn)品失效	每日校準(zhǔn)質(zhì)量軸、使用新鮮標(biāo)準(zhǔn)品

五、維護(hù)記錄與臺(tái)賬

1. 日常維護(hù)：日期、操作人員、流動(dòng)相配制情況、離子源清潔情況、質(zhì)量軸校準(zhǔn)結(jié)果。

2. 定期保養(yǎng)：周期、保養(yǎng)項(xiàng)目（如更換密封墊、清潔質(zhì)量分析器）、更換部件型號(hào)與數(shù)量。

3. 故障記錄：故障現(xiàn)象、排查過(guò)程、解決方案、維修人員（廠家 / 內(nèi)部）。

4. 儀器狀態(tài)：壓力、真空度、標(biāo)準(zhǔn)品保留時(shí)間 / 峰面積、檢出限等關(guān)鍵參數(shù)。

總結(jié)