固相萃取儀裝置操作步驟,快速上手
核心原則:按“準(zhǔn)備→活化→上樣→淋洗→洗脫”五步流程操作,無需復(fù)雜調(diào)試,重點(diǎn)把控柱活化和流速控制,新手10分鐘可掌握。
適用場景:環(huán)境水樣、食品樣品、生物體液等樣品的目標(biāo)物富集與凈化(以常見固相萃取柱為例)。
一、操作前準(zhǔn)備(2分鐘,關(guān)鍵防污染)
儀器檢查:確認(rèn)固相萃取儀主機(jī)通電,真空泵(或壓力泵)連接正常;檢查萃取柱支架、收集管架是否安裝牢固,收集管(離心管/試管)對(duì)應(yīng)放置在支架上。
試劑與材料準(zhǔn)備:備好固相萃取柱(如C18柱、陽離子交換柱)、活化溶劑(如甲醇)、淋洗溶劑(如5%甲醇水溶液)、洗脫溶劑(如純乙腈)、待處理樣品(提前過濾去除顆粒物,避免堵柱)。
裝柱固定:將固相萃取柱垂直插入儀器支架,下端對(duì)準(zhǔn)收集管;若為手動(dòng)調(diào)節(jié)型儀器,旋緊柱固定夾,確保柱體穩(wěn)定無晃動(dòng)。
二、核心操作五步走(6分鐘,精準(zhǔn)控速是關(guān)鍵)
第一步:柱活化(激活吸附位點(diǎn),必做!)
用移液管吸取3-5mL活化溶劑(如甲醇),緩慢注入萃取柱中;
打開固相萃取儀真空泵(或啟動(dòng)壓力泵),調(diào)節(jié)流速至1-2mL/min(流速過快會(huì)導(dǎo)致活化不充分),待溶劑完全流干后關(guān)閉真空泵(避免柱體干燒);
若萃取柱為水相兼容型,需再用3-5mL超純水淋洗,同樣控制流速1-2mL/min,流干后備用。
第二步:上樣(目標(biāo)物吸附)
取預(yù)處理后的樣品(通常5-20mL,具體看柱容量),用移液管或進(jìn)樣器緩慢注入活化后的萃取柱中;
開啟真空泵,調(diào)節(jié)流速至1-3mL/min(根據(jù)樣品黏度調(diào)整,渾濁樣品可適當(dāng)放慢),確保樣品均勻流過柱體,目標(biāo)物充分吸附;
上樣完畢后,繼續(xù)抽氣30秒,將柱內(nèi)殘留樣品抽干。
第三步:淋洗(去除雜質(zhì),保留目標(biāo)物)
吸取3-5mL淋洗溶劑(如5%甲醇水溶液,需根據(jù)目標(biāo)物性質(zhì)選擇,避免洗脫目標(biāo)物),注入萃取柱;
保持流速1-2mL/min,讓淋洗溶劑流干,此過程可更換新的收集管(避免雜質(zhì)污染后續(xù)洗脫液);
淋洗結(jié)束后,抽氣1分鐘,徹底去除柱內(nèi)殘留淋洗液。
第四步:洗脫(收集目標(biāo)物,核心步驟)
將干凈的收集管對(duì)準(zhǔn)萃取柱下端,吸取1-3mL洗脫溶劑(如純乙腈,確保目標(biāo)物完全洗脫),緩慢注入柱中;
調(diào)節(jié)流速至0.5-1mL/min(流速過慢效率低,過快則洗脫不徹底),讓洗脫液完全流入收集管;
可重復(fù)洗脫1次(若目標(biāo)物回收率低),合并兩次洗脫液,完成萃取。
第五步:收尾清潔(延長儀器壽命)
關(guān)閉真空泵和儀器電源,取下用過的萃取柱,放入專用廢棄物容器;
用超純水沖洗萃取柱支架和管路(若有殘留溶劑),再用干布擦拭干凈;
整理試劑和收集管,將儀器置于干燥通風(fēng)處。
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