鼠支原體的qPCR檢測方法
鼠支原體
支原體是一類不具有細胞壁的原核微生物,支原體是能在無生命培養(yǎng)基中生長繁殖的小型原核細胞型微生物,因無細胞壁,形態(tài)呈高度多形性,可表現(xiàn)為球形、桿形、絲狀、分枝狀等,大小為0.1~0.3μm,能通過細菌濾器。支原體廣泛分布于自然環(huán)境中,能從動植物和人類中分離出。支原體常定居于動物的口腔、呼吸道和泌尿生殖道。
肺支原體(Mycoplasma Pulmonis, Mp)是實驗大鼠小鼠易感且危害大的一種支原體,可引起鼠呼吸道和生殖道支原體病。通常為隱性感染,這種隱性感染容易被忽視, 從而影響實驗結(jié)果,須引起注意。肺支原體是嚙齒類動物(小鼠、大鼠為主)的特異性呼吸道與生殖道支原體病原體,無細胞壁、多形性,是實驗動物領(lǐng)域重點防控的條件致病菌,對動物模型質(zhì)量和科研數(shù)據(jù)可靠性影響顯著。
支原體的傳統(tǒng)檢測方法
培養(yǎng)法:使用分離培養(yǎng)法診斷支原體的感染,但需要較長時間。培養(yǎng)法周期長,步驟繁瑣,不適合用于大規(guī)模流行病學(xué)篩査。
血清學(xué)方法:特別是ELISA法因其操作簡便,但容易出交叉反應(yīng)導(dǎo)致假陽性。
支原體的qPCR檢測方法
PCR法:是目前針對支原體檢測較迅速的一種方法,可使用呼吸道組織或分泌物進行檢測,針對性較強,操作相對簡單、快速。翼和大小鼠支原體檢測試劑盒檢測肺支原體、溶神經(jīng)支原體、鼠支原體、關(guān)節(jié)炎支原體、希爾氏支原體等。
地方標(biāo)準(zhǔn)DB36/T 1904-2023《實驗動物 支原體熒光定量PCR檢測方法》和團體標(biāo)準(zhǔn)T/CALAS 40—2017《實驗動物 肺支原體PCR檢測方法》,描述了支原體的檢測方法,檢測核酸DNA,通過PCR或者qPCR的方式進行檢測。
翼和生物開發(fā)了大鼠小鼠的支原體檢測方案,可通過檢測氣管或者口咽拭子等進行支原體的檢測。SPF.M/R-RBF-001試劑盒中FAM、HEX、ROX通道分別檢測支原體Ms、泰澤病原體Cp、銅綠假單胞菌Pa等多種病原,節(jié)省了檢測時間和成本。翼和生物的大鼠小鼠病原體qPCR檢測試劑盒具有敏感性高、特異性強的特點,操作簡單、方便進行大規(guī)模的樣本篩查。
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