BioRad伯樂1652100電轉(zhuǎn)儀使用方法
伯樂貨號 1652100 對應(yīng)的正是 MicroPulser™ 電穿孔系統(tǒng) 的完整套裝。其核心操作與上述MicroPulser標(biāo)準(zhǔn)流程一致。1652100是包含了儀器主機(jī)和關(guān)鍵耗材的套裝產(chǎn)品。
下面為您提煉其開箱后的重點(diǎn)使用方法:
一、伯樂1652100MicroPulser™ 電穿孔系統(tǒng)套裝內(nèi)容確認(rèn)
請開箱核對,您的1652100套裝應(yīng)包含:
1、MicroPulser 主機(jī) x1臺
2、電源線 x1根
3、Gene Pulser® 電轉(zhuǎn)杯(1 mm間隙) x40個(gè)(這是核心耗材)
4、說明書 x1份
二、伯樂1652100MicroPulser™ 電穿孔系統(tǒng)快速使用步驟
1、準(zhǔn)備:打開儀器電源。將感受態(tài)細(xì)胞和DNA在預(yù)冷的1 mm電擊杯中輕柔混勻(總體積通常≤50 µl)。確保電擊杯外壁干燥無水。
2、設(shè)置:
(1)按下預(yù)設(shè)程序按鈕 P1(或P2/P3,根據(jù)感受態(tài)細(xì)胞推薦選擇)。
(3)將右側(cè)的 電阻旋鈕調(diào)至“High” 檔位(這是常用設(shè)置)。
3、電擊:
(1)迅速將電擊杯擦干,放入儀器槽內(nèi)。
(2)用力蓋緊安全蓋(聽到“咔噠”聲)。
(3)立即按下紅色的 “Pulse” 按鈕。聽到蜂鳴聲、看到指示燈閃爍即完成。
4、復(fù)蘇:
(1)立即取出電擊杯,加入 1 mL 預(yù)熱的SOC或LB培養(yǎng)基。
(2)輕柔吹吸混勻,轉(zhuǎn)移到無菌管中。
(3)37°C,200 rpm振蕩培養(yǎng)45-60分鐘。
(4)涂布到含相應(yīng)抗生素的平板,過夜培養(yǎng)。
三、伯樂1652100MicroPulser™ 電穿孔系統(tǒng)關(guān)鍵注意事項(xiàng)
1、耗材專用:套裝內(nèi)的電擊杯是 1 mm 間隙的,與儀器預(yù)設(shè)的1.8 kV電壓(對應(yīng)18 kV/cm場強(qiáng))匹配。請勿使用其他間隙(如2 mm)的電擊杯。
2、禁止觸碰:電擊時(shí),確保蓋子緊閉,切勿觸碰電擊杯或儀器。
3、防電?。簶悠分斜苊飧邼舛塞}分(如使用超純水或TE緩沖液稀釋DNA),并確保電擊杯外壁干燥,以防產(chǎn)生電?。ɑ鸹ǎ@會損壞樣品并降低轉(zhuǎn)化效率。
4、效率優(yōu)化:若轉(zhuǎn)化效率不理想,可嘗試將電阻從 “High” 調(diào)至 “Med” ,或優(yōu)化DNA用量與純度。
四、重要提示
1、使用前,強(qiáng)烈建議通讀隨套裝附帶的紙質(zhì)說明書,以了解所有安全規(guī)定和細(xì)節(jié)。
2、對于酵母、哺乳動物細(xì)胞等應(yīng)用,請選擇對應(yīng)的預(yù)設(shè)程序(P5, P6等),并使用特定的電轉(zhuǎn)緩沖液。
3、電擊杯為一次性使用,不建議重復(fù)使用,以免交叉污染和效率下降。
總結(jié):1652100套裝讓您開箱即可開始實(shí)驗(yàn)。請牢記 “預(yù)冷、快速、立即復(fù)蘇” 三大原則,并正確使用套裝內(nèi)的1 mm專用電擊杯,就能獲得良好的電轉(zhuǎn)化效果。
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