污水德沃斯氏菌 百歐博偉生物 微生物菌種

污水德沃斯氏菌 百歐博偉生物 微生物菌種

污水德沃斯氏菌是Devosia屬的微生物，原產地為中國。該菌的革蘭氏染色反應結果為陰性，為嚴格好氧型微生物，無芽孢生成，為短桿狀細菌。有斷生單根鞭毛。大多來自植物根際的土壤。主要用途為分類；研究；教學。

一、菌種簡介

平臺編號：Bio-04585

規(guī)格：凍干物

拉丁屬名：Devosia Limi

中文譯名：污水德沃斯氏菌

拉丁學名：Devosia limi

原始編號：DSM 17137

菌株來源：←DSMZ

保藏人：周宇光

直接來源國家：德國

保藏時間：3/23/2010

其他保藏編號：=CGMCC 1.10182 =CIP 109005 =LMG 22951

生物危害：四類

模式菌株：模式菌株

菌株用途：模式菌株

培養(yǎng)溫度：28-30℃

培養(yǎng)基：0221    

分離源：商業(yè)硝化劑

采集國家：比利時

用途：模式菌株

注意事項：僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用（產品信息以出庫為準）

二、培養(yǎng)方法

1、菌種是指食用菌菌絲體及其生長基質組成的繁殖材料。菌種分為母種（一級種）、原種（二級種）和栽培種（三級種）三級。工業(yè)發(fā)酵的有用菌種，其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復篩。

2、挑選具有某種能力的有用菌種，也稱種子制備，是指菌種在一定條件下，經過擴大培養(yǎng)成為具有一定數量和質量的純生產菌種的制備過程。以作接入發(fā)酵罐中進一步擴大菌體量及合成產物之用。

3、種子制備包括孢子制備和菌絲體制備菌種制備。

4、保存在沙土管或冷凍管中的生產菌種，用無菌手續(xù)挑取少許，接入瓊脂斜面培養(yǎng)基上，在25℃（或較高溫度）下培養(yǎng)5～7天（或較長時間。所得孢子還需進一步用較大表面積的固體培養(yǎng)基以獲得更多孢子（對于霉菌類孢子制備，多數采用大米、小米之類的天然培養(yǎng)基）。

5、將培養(yǎng)成熟的斜面孢子制成懸浮液，接種到扁瓶固體培養(yǎng)基上，于25～28℃培養(yǎng)14天。將成熟的扁瓶孢子于真空中抽干，使水分降至10%以下，并放入 4℃冰箱中備用。一次制得的孢子瓶可在生產上延續(xù)使用半年左右。

6、產品僅用于科研如果有些生產菌種不產孢子，如赤霉素產生菌或產孢子不多的，則可采用搖瓶液體培養(yǎng)制得菌絲體，作種子罐的種子。種子罐的目的是使接入有限的孢子或菌絲體迅速發(fā)芽、生長、繁殖成大量菌體。其中的培養(yǎng)基組分應是易于被菌體利用的碳源（如葡萄糖）和氮源（如玉米漿），及無機鹽(如磷酸鹽)等。作為發(fā)酵罐的種子應生命力旺盛、染色深、菌絲粗壯，無雜菌及異常菌體。接種量一般在10%～20%。

三、使用范圍

（1）合成培養(yǎng)基。合成培養(yǎng)基的各種成分是已知的各種化學物質。這種培養(yǎng)基的化學成分清楚，組成成分精確，重復性強，而且微生物在這類培養(yǎng)基中生長較慢。如高氏一號合成培養(yǎng)基、察氏（Czapek）培養(yǎng)基等。

（2）天然培養(yǎng)基。由天然物質制成，如蒸熟的馬鈴薯和普通牛肉湯，前者用于培養(yǎng)霉菌，后者用于培養(yǎng)細菌。這類培養(yǎng)基的化學成分很不恒定，也難以確定，但配制方便，營養(yǎng)豐富，培養(yǎng)效果好，所以常被采用。

（3）半合成培養(yǎng)基。在天然有機物的基礎上適當加入已知成分的無機鹽類，或在合成培養(yǎng)基的基礎上添加某些天然成分。這類培養(yǎng)基能更有效地滿足微生物對營養(yǎng)物質的需要。

四、保存方法

1、傳代保存法：培養(yǎng)基的濃度不宜過高,營養(yǎng)成分不宜過于豐富,尤其是碳水化合物的濃度應在可能的范圍內盡量降低。培養(yǎng)溫度通常以稍低于生長溫度為好。若為產酸菌種,則應在培養(yǎng)基中添加少量碳酸鈣。

2、液體石蠟覆蓋保存法：該法較前一種方法保存菌種的時間更長,適用于霉菌、酵母菌、放線菌及需氧細菌等的保存。

3、懸液保存法：

①蒸餾水保存法:適用于霉菌、酵母菌及絕大部分放線菌,將其菌體懸浮于蒸餾水中即可在室溫下保存數年。本法應注意避免水分的蒸發(fā)。

②糖液保存法:適用于酵母菌,如將其菌體懸浮于10%的蔗糖溶液中,然后于冷暗處保存,可長達10年。除此之外,也可使用緩沖液或食鹽水等進行保存。

4、載體保存法：①土壤保存法;②砂土保存法;③硅膠保存法;④磁珠保存法;⑤麩皮保存法;⑥紙片(濾紙)保存法。

5、常用的冷凍保存法：

①低溫冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃):低溫冷凍保存時使用螺旋口試管較為方便,也可在棉塞試管外包裹塑料薄膜。保存時菌液加量不宜過多,有些可添加保護劑。此外,也可用φ5mm的玻璃珠來吸附菌液,然后把玻璃珠置于塑料容器內,再放入低溫冰箱內進行保存的。

②干冰保存法(-70℃左右):即將菌種管插入干冰內,再置于冰箱內進行冷凍保存。

③液氮保存法(-196℃):是適用范圍的微生物保存法。

五、注意事項

1）凍干粉活化，干粉要全部用完，不能預留，用無菌吸管吸取 0.3ml-0.5ml 的培養(yǎng)液（即以上建議的培養(yǎng)基配方，不加瓊脂）或者無菌水，滴入凍干管中，輕輕振蕩至其溶解。吸取全部菌懸液，接種在培養(yǎng)基上（建議不超過 2 支平板，操作完畢后盡快置于厭氧環(huán)境下恒溫培養(yǎng)；若需接種液體培養(yǎng)基，制作培養(yǎng)液時，應使用厭氧螺口試管，并利用高純氮氣去除試管和培養(yǎng)液中的氧氣）；

2）經過冷凍干燥保藏，菌種處于休眠狀態(tài)，復蘇培養(yǎng)時可能會延遲生長，這時需較長的培養(yǎng)時間； 若您收到的是已復蘇的培養(yǎng)物（非凍干菌），則可以直接用于您的實驗，或根據需要轉接培養(yǎng)如有不明白之處，請務必先咨詢我單位技術人員，避免不必要的損失；

3）微生物菌種應保藏于低溫、清潔干燥的地方，室溫放置時間過長會導致菌種衰退；

4）菌種操作應在無菌條件下進行；轉種完畢，應經滅菌再做丟棄處理；

5）應根據菌種狀況及時轉接，凍干菌種保藏時間通常為 2-25 年；

6）菌種使用過程中如出現雜菌污染或菌種生產性能下降，應及時和微生物菌種查詢網聯(lián)系。

7）如若有菌種復蘇不活或者污染等情況，請在收到菌鐘后 2 個月內聯(lián)系，逾期不予受理；

8）打管操作需由專業(yè)微生物技術人員在相應的防護設備中進行，生物危害程度為三類的菌種應在生物安全柜中操作，打管時凍干管應遠離面部，保護眼睛。

9）安瓿瓶開封：用浸過 75％酒精的脫脂棉擦凈安瓿管，用火焰加熱其頂端，滴少量（2-3滴）無菌水至加熱頂端使之破裂，用銼刀或者鑷子敲下已破裂的安瓿管頂端并將凍干管開口處在火焰上過一遍，并保持在火焰旁操作。

10）甘油管使用：使用本甘油菌時可以不用融解，在甘油菌表面蘸取少量涂板或進行液體培養(yǎng)即可。也可以融解后使用，但隨著凍融次數的增加，細菌的活力會逐漸下降。

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