腫瘤微環(huán)境 (Tumor Microenviroment, TME)，由腫瘤細(xì)胞、免疫細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞、脂肪細(xì)胞以及成纖維細(xì)胞等多種基質(zhì)細(xì)胞，細(xì)胞因子、趨化因子等可溶性成分，還包括代謝產(chǎn)物等共同組成的局部環(huán)境，為腫瘤提供營養(yǎng)支持。為了使抗腫瘤免疫反應(yīng)有效殺死腫瘤細(xì)胞，必須啟動一系列事件，并允許其反復(fù)進(jìn)行和擴(kuò)展，我們稱之為腫瘤免疫循環(huán)。腫瘤免疫循環(huán)共包括七個關(guān)鍵步驟，涉及腫瘤免疫的不同環(huán)節(jié)，也是理解腫瘤免疫治療的關(guān)鍵。
腫瘤細(xì)胞：腫瘤細(xì)胞標(biāo)志物的選擇需結(jié)合腫瘤類型、研究目的（如腫瘤分型、增殖活性、侵襲能力評估等），核心是特異性識別腫瘤細(xì)胞，以區(qū)分于微環(huán)境中的免疫細(xì)胞、基質(zhì)細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞等。
一、通用腫瘤細(xì)胞標(biāo)志物（適用于多數(shù)實(shí)體瘤）
這類標(biāo)志物不依賴特定腫瘤類型，通過識別腫瘤細(xì)胞的 “共性特征"（如上皮來源、增殖活性、核特征）定位腫瘤細(xì)胞，常用于未知腫瘤分型初篩、腫瘤區(qū)域界定。
標(biāo)志物 | 靶點(diǎn) / 機(jī)制 | 適用場景 | 注意事項(xiàng) |
Pan-CK | 廣譜細(xì)胞角蛋白（Cytokeratin） | 識別上皮來源腫瘤（如肺癌、乳腺癌、結(jié)直腸癌），區(qū)分上皮腫瘤與間葉來源腫瘤（如肉瘤） | 非上皮腫瘤（如淋巴瘤、黑色素瘤）不表達(dá)，需結(jié)合其他標(biāo)志物排除 |
CK7/CK20 | 細(xì)胞角蛋白 7/20（亞型組合） | 上皮腫瘤分型（如 CK7+/CK20 + 提示結(jié)直腸癌，CK7+/CK20 - 提示肺癌 / 乳腺癌） | 需聯(lián)合檢測，單一標(biāo)志物特異性低 |
Ki-67 | 增殖相關(guān)核抗原 | 評估腫瘤細(xì)胞增殖活性（指數(shù)越高，惡性程度可能越高） | 需與腫瘤特異性標(biāo)志物（如 Pan-CK）共染，排除非腫瘤細(xì)胞增殖 |
p53 | 抑癌基因產(chǎn)物（突變型為主） | 提示腫瘤細(xì)胞的 p53 基因突變狀態(tài)（如結(jié)直腸癌、卵巢癌中突變型 p53 高表達(dá)） | 野生型 p53 表達(dá)弱且不穩(wěn)定，需結(jié)合陰性對照判斷 |
二、腫瘤類型特異性標(biāo)志物（按癌種分類）
這類標(biāo)志物僅在特定腫瘤中高表達(dá)，是精準(zhǔn)定位目標(biāo)腫瘤細(xì)胞、區(qū)分不同癌種的核心，需根據(jù)研究的腫瘤類型選擇，常見如下：
腫瘤類型 | 核心特異性標(biāo)志物 | 輔助標(biāo)志物（排除 / 分型） | 應(yīng)用說明 |
肺癌 | - TTF-1（肺腺癌） | CK7、CK5/6（鱗癌）、CD56（小細(xì)胞癌） | TTF-1 陰性不能排除肺腺癌（約 10% 陰性），需聯(lián)合 Napsin A |
乳腺癌 | - ER（雌激素受體） | GATA3、CK7（區(qū)分乳腺與其他上皮癌） | HER2 需注意 “膜陽性" 判讀標(biāo)準(zhǔn)，ER/PR 用于分型（激素受體陽性型） |
結(jié)直腸癌 | - CDX2（腸道特異性轉(zhuǎn)錄因子） | CK20、Ki-67（增殖評估） | CDX2 在胃癌中也可能弱表達(dá)，需結(jié)合臨床背景 |
黑色素瘤 | - S-100（神經(jīng)嵴來源標(biāo)志物） | SOX10（輔助確認(rèn)）、Pan-CK（排除上皮癌） | S-100 特異性低（神經(jīng)鞘瘤也表達(dá)），需聯(lián)合 HMB-45/Melan-A |
淋巴瘤 | - CD20（B 細(xì)胞淋巴瘤） | PAX5（B 細(xì)胞核標(biāo)志物）、Ki-67（增殖） | 需與 “反應(yīng)性淋巴細(xì)胞" 區(qū)分，常聯(lián)合免疫細(xì)胞標(biāo)志物（如 CD4/CD8） |
前列腺癌 | - PSA（前列腺特異性抗原） | CK8/18（上皮確認(rèn)）、p63（排除基底細(xì)胞） | PSMA 在轉(zhuǎn)移灶中表達(dá)更穩(wěn)定，優(yōu)于 PSA |
卵巢癌 | - CA125（漿液性卵巢癌） | CK7、PAX8（輔助確認(rèn)上皮來源） | CA125 在子宮內(nèi)膜癌中也表達(dá)，需聯(lián)合 WT1 |
三、腫瘤細(xì)胞功能相關(guān)標(biāo)志物（評估侵襲、代謝、耐藥）
這類標(biāo)志物不直接 “識別" 腫瘤細(xì)胞，而是結(jié)合腫瘤特異性標(biāo)志物（如 Pan-CK）共染，用于分析腫瘤細(xì)胞的生物學(xué)行為，常見于機(jī)制研究（如腫瘤侵襲、免疫逃逸、藥物耐藥）。
功能方向 | 標(biāo)志物 | 作用機(jī)制 | 適用場景 |
侵襲轉(zhuǎn)移 | MMP-9 | 基質(zhì)金屬蛋白酶 9，降解細(xì)胞外基質(zhì)，促進(jìn)侵襲 | 結(jié)直腸癌、乳腺癌等轉(zhuǎn)移相關(guān)研究 |
Vimentin | 波形蛋白（上皮 - 間質(zhì)轉(zhuǎn)化標(biāo)志物） | 評估腫瘤細(xì)胞 EMT 過程（如肺癌、胰腺癌） | |
免疫逃逸 | PD-L1 | 程序性死亡配體 1，結(jié)合 T 細(xì)胞 PD-1 抑制免疫殺傷 | 免疫治療療效預(yù)測（需確認(rèn) PD-L1 表達(dá)于腫瘤細(xì)胞） |
B7-H3 | 共刺激分子，抑制 T 細(xì)胞活性 | 多種實(shí)體瘤的免疫逃逸研究 | |
代謝異常 | GLUT1 | 葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)體 1，腫瘤細(xì)胞無氧糖酵解增強(qiáng) | 評估腫瘤細(xì)胞代謝活性（如肺癌、肝癌） |
藥物耐藥 | ABCG2 | ATP 結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，泵出化療藥物 | 化療耐藥相關(guān)研究（如乳腺癌、卵巢癌） |
免疫細(xì)胞（腫瘤微環(huán)境中最核心的非腫瘤細(xì)胞群）：免疫細(xì)胞是 mIHC 分析的重點(diǎn)，需區(qū)分 “淋巴細(xì)胞、髓系細(xì)胞、固有免疫細(xì)胞" 等亞群，核心用于評估免疫浸潤狀態(tài)（如 “熱腫瘤 / 冷腫瘤" 判斷、免疫治療療效預(yù)測）。
細(xì)胞大類 | 具體亞群 | 核心標(biāo)志物 | 輔助標(biāo)志物（用于精細(xì)分型） | 功能 / 應(yīng)用場景 |
淋巴細(xì)胞 | T 細(xì)胞（總?cè)海?/span> | CD3 | - | 識別所有 T 細(xì)胞，基礎(chǔ)標(biāo)志物（如腫瘤浸潤 T 細(xì)胞總量統(tǒng)計） |
輔助性 T 細(xì)胞（Th） | CD4 | CD3（確認(rèn) T 細(xì)胞） | 區(qū)分 Th 細(xì)胞（如 Th1/Th2/Th17，需加測功能標(biāo)志物如 T-bet） | |
細(xì)胞毒性 T 細(xì)胞（CTL） | CD8 | CD3（確認(rèn) T 細(xì)胞） | 評估殺傷性 T 細(xì)胞浸潤（如 “CD8+T 細(xì)胞密度" 與預(yù)后關(guān)聯(lián)） | |
調(diào)節(jié)性 T 細(xì)胞（Treg） | Foxp3 | CD4、CD25（增強(qiáng)特異性） | 區(qū)分免疫抑制性 Treg（需排除 “活化 CD25+T 細(xì)胞"） | |
B 細(xì)胞（總?cè)海?/span> | CD20 | PAX5（B 細(xì)胞核標(biāo)志物，更穩(wěn)定） | 評估 B 細(xì)胞浸潤（如 tertiary lymphoid structures，TLS） | |
自然殺傷細(xì)胞（NK） | CD56 | CD16（增強(qiáng)特異性，排除神經(jīng)細(xì)胞） | 識別固有免疫殺傷細(xì)胞（如 NK 細(xì)胞對腫瘤的直接殺傷） | |
髓系細(xì)胞 | 總髓系細(xì)胞 | CD45+CD11b | - | 泛髓系標(biāo)志物，需結(jié)合亞群標(biāo)志物進(jìn)一步分型 |
中性粒細(xì)胞 | Ly6G（小鼠）/ | CD11b（確認(rèn)髓系） | 區(qū)分中性粒細(xì)胞（如 “中性粒細(xì)胞浸潤與炎癥相關(guān)腫瘤進(jìn)展"） | |
單核細(xì)胞 / 巨噬細(xì)胞 | CD68（總巨噬細(xì)胞） | - | 識別所有巨噬細(xì)胞（不區(qū)分 M1/M2） | |
M1 型巨噬細(xì)胞（促炎） | iNOS | CD68（確認(rèn)巨噬細(xì)胞） | 評估促炎巨噬細(xì)胞（如抗腫瘤免疫中的 M1 浸潤） | |
M2 型巨噬細(xì)胞（抑炎） | CD206（甘露糖受體） | CD68（確認(rèn)巨噬細(xì)胞） | 評估免疫抑制性 M2 巨噬細(xì)胞（如腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞 TAM） | |
樹突狀細(xì)胞（DC，總?cè)海?/span> | CD11c | MHC-II（增強(qiáng)特異性） | 識別抗原提呈細(xì)胞 DC（如 DC 對 T 細(xì)胞的激活作用） | |
漿細(xì)胞樣 DC（pDC） | BDCA-2（人）/ | CD11c（確認(rèn) DC） | 評估 I 型干擾素分泌相關(guān)的 pDC（如抗病毒免疫） | |
其他固有免疫細(xì)胞 | 肥大細(xì)胞 | Tryptase（類胰蛋白酶） | CD117（c-Kit，輔助確認(rèn)） | 識別肥大細(xì)胞（如過敏反應(yīng)、腫瘤微環(huán)境炎癥調(diào)節(jié)） |
基質(zhì)細(xì)胞（維持組織結(jié)構(gòu)，參與微環(huán)境調(diào)控）：基質(zhì)細(xì)胞是腫瘤微環(huán)境的 “支架"，包括成纖維細(xì)胞、肌成纖維細(xì)胞等，核心參與細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）合成、腫瘤侵襲調(diào)控，標(biāo)志物特異性較高。
細(xì)胞類型 | 核心標(biāo)志物 | 輔助標(biāo)志物 | 功能 / 應(yīng)用場景 |
成纖維細(xì)胞 | FAP（成纖維細(xì)胞活化蛋白） | - | 識別活化的成纖維細(xì)胞（如腫瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞 CAF），參與 ECM 重塑 |
肌成纖維細(xì)胞 | α-SMA（α- 平滑肌肌動蛋白） | FAP（確認(rèn) CAF） | 區(qū)分肌成纖維細(xì)胞（收縮功能，如傷口愈合、腫瘤侵襲） |
成骨細(xì)胞 | Osteocalcin（骨鈣素） | Runx2（核標(biāo)志物） | 識別成骨細(xì)胞（如骨肉瘤微環(huán)境、骨轉(zhuǎn)移灶） |
破骨細(xì)胞 | TRAP（抗酒石酸酸性磷酸酶） | CD68（確認(rèn)髓系來源） | 識別破骨細(xì)胞（如骨腫瘤、骨質(zhì)疏松相關(guān)研究） |
血管相關(guān)細(xì)胞（提供營養(yǎng)，參與腫瘤血管生成）：血管相關(guān)細(xì)胞包括內(nèi)皮細(xì)胞、周細(xì)胞，核心用于評估腫瘤血管生成（如 “微血管密度 MVD"），是抗血管生成治療療效監(jiān)測的關(guān)鍵。
細(xì)胞類型 | 核心標(biāo)志物 | 輔助標(biāo)志物 | 功能 / 應(yīng)用場景 |
血管內(nèi)皮細(xì)胞 | CD31（血小板內(nèi)皮細(xì)胞黏附分子） | CD34（更敏感，含淋巴管內(nèi)皮） | 識別血管內(nèi)皮細(xì)胞（金標(biāo)準(zhǔn)），計算 MVD（微血管密度） |
CD105（Endoglin） | CD31（確認(rèn)內(nèi)皮） | 識別 “活化的內(nèi)皮細(xì)胞"（僅在新生血管表達(dá)，更特異） | |
淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞 | LYVE-1（淋巴管內(nèi)皮透明質(zhì)酸受體） | Podoplanin（平足蛋白） | 區(qū)分淋巴管與血管（如腫瘤淋巴轉(zhuǎn)移相關(guān)研究） |
周細(xì)胞 | PDGFR-β（血小板衍生生長因子受體 β） | α-SMA（部分周細(xì)胞表達(dá)） | 識別血管周細(xì)胞（維持血管穩(wěn)定性，如抗血管治療對周細(xì)胞的影響） |
其他輔助細(xì)胞（特殊功能細(xì)胞，按需選擇）：這類細(xì)胞在特定組織微環(huán)境中存在，需根據(jù)研究場景（如神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤、肝臟疾?。┻x擇。
細(xì)胞類型 | 核心標(biāo)志物 | 適用場景 |
神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞 | Synaptophysin（Syn） / Chromogranin A（CgA） | 識別神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤（如小細(xì)胞肺癌、神經(jīng)內(nèi)分泌癌） |
肝細(xì)胞 | HepPar-1（肝細(xì)胞特異性抗原） | 識別肝細(xì)胞（如肝癌微環(huán)境、肝臟損傷研究） |
膽管上皮細(xì)胞 | CK19（細(xì)胞角蛋白 19） | 識別膽管上皮（如膽管癌、肝臟疾病中膽管損傷） |
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