目錄:愛必信（上海）生物科技有限公司>>免疫學(xué)試劑>>多重?zé)晒饷庖呓M化（mIHC）>> abs50013五色多重?zé)晒饷庖呓M化染色試劑盒
| 參考價(jià) | ￥5890-￥22410 |
參考價(jià)：￥5890 ~ ￥22410
20T 100T
供貨周期:現(xiàn)貨 規(guī)格:20T;100T 貨號(hào):abs50013 應(yīng)用領(lǐng)域:化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,制藥/生物制藥,綜合 主要用途:主要用于人源或小鼠組織、石蠟切片、TMA芯片的免疫組化染色。
>| 20T | 5890元 | 999KIT可售 |
| 100T | 22410元 | 999KIT可售 |
更新時(shí)間：2025-10-28 13:47:49瀏覽次數(shù)：5040評(píng)價(jià)
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 20T;100T |
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| 貨號(hào) | abs50013 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,制藥/生物制藥,綜合 |
| 主要用途 | 主要用于人源或小鼠組織、石蠟切片、TMA芯片的免疫組化染色。 |
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| 五色多重?zé)晒饷庖呓M化染色試劑盒概述 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 別名 | 多色試劑盒 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 描述 | 組織微環(huán)境中有復(fù)雜的細(xì)胞組成，這些細(xì)胞的表型、狀態(tài)、豐度、分布都有著重要的生物學(xué)意義和臨床價(jià)值。借助抗體染色可以將其在組織原位上呈現(xiàn)出來。免疫組化染色是一種研究組織形態(tài)和原位蛋白表達(dá)的常見技術(shù)，常規(guī)IHC檢測(cè)只能展示單一指標(biāo)，難以呈現(xiàn)復(fù)雜的組織微環(huán)境中的細(xì)胞組成、狀態(tài)和關(guān)系，而這些信息對(duì)疾病的診斷和治療至關(guān)重要！酪氨信號(hào)放大技術(shù)原理：類似常規(guī)免疫組化的DAB顯色方法，TSA技術(shù)同樣采用HRP標(biāo)記的二抗，HRP催化加入體系的熒光素底物，產(chǎn)生活化熒光底物，活化底物可與抗原上的酪氨suan共價(jià)結(jié)合，使樣品上穩(wěn)定的共價(jià)結(jié)合熒光素。之后用熱修復(fù)法洗去非共價(jià)結(jié)合的抗體，換下一種一抗來第二輪孵育，換另一種熒光素底物，如此往復(fù)就可實(shí)現(xiàn)多重標(biāo)記。
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| 檢驗(yàn)原理 | 多重?zé)晒饷庖呓M化染色是基于抗原、抗體特異性結(jié)合的原理，選用辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的二抗抗體，對(duì)試劑盒中的熒光染料進(jìn)行活化，將信號(hào)共價(jià)結(jié)合到抗原上。借助于不同的熒光染料標(biāo)記，通過多輪染色循環(huán)實(shí)現(xiàn)組織或細(xì)胞的原位多靶點(diǎn)染色。 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 產(chǎn)品組成 |
TSA單色熒光染料520、TSA單色熒光染料570、TSA單色熒光染料620、TSA單色熒光染料700、信號(hào)放大反應(yīng)液、鼠兔通用型HRP標(biāo)記二抗、抗熒光淬滅封片劑、DAPI | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 應(yīng)用 | 主要用于組織、石蠟切片、TMA芯片的免疫組化染色。也可用于冰凍切片和細(xì)胞爬片，需搭配abs994 抗體洗脫液（mIHC專用）。 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 使用方法 | 一、樣本要求 1、福爾馬林固定的蠟塊或玻片，大塊組織或TMA，封蠟不能有明顯的破損。 2、玻片樣本，組織需要緊貼玻片，避免褶皺，玻片不能有破損、劃傷或污漬。 3、組織最小應(yīng)包含大于1000個(gè)細(xì)胞。 4、蠟塊需包埋實(shí)體瘤組織，壞死瘤組織、細(xì)針穿剌物、細(xì)胞甩片樣品會(huì)影響染色效果。 5、組織應(yīng)當(dāng)用10%中性福爾馬林固定，正常固定時(shí)間為18-24h。 6、切片厚度為4um左右，使用防脫玻片。建議玻片在固定后一周內(nèi)制備為佳。 7、不要在水浴撈片環(huán)節(jié)添加任何粘合劑，樣本應(yīng)置于玻片正面、中央。將撈片豎直置于吸水紙上去除水分，輕敲去除水滴，不要用紙擦拭玻片。 8、玻片置于45℃熱盤上放置30min（自然風(fēng)干玻片時(shí)長(zhǎng)不小于1h）。 二、檢驗(yàn)方法 1、所需儀器設(shè)備：移液器、恒溫干燥箱、微波爐、免疫組化筆、修復(fù)杯、染色缸、計(jì)時(shí)器、孵育濕盒、蓋玻片、通風(fēng)櫥、洗瓶、熒光顯微鏡、量筒100ml、量筒1000ml等。 2、所需試劑：滅菌去離子水（abs9259）、二甲苯、乙醇（100%、95%、70%）、10%中性福爾馬林、抗原修復(fù)一抗、封閉液、TBST等。 3、試劑準(zhǔn)備： 1）熒光染料的稀釋：染料為100×母液，使用信號(hào)放大反應(yīng)液按1:100稀釋制備染料工作液（現(xiàn)用現(xiàn)配）；DAPI使用無菌水按1:100稀釋制備工作液。 2）二抗的使用：試劑盒為鼠兔通用二抗，不建議樣本與二抗同源，實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)核實(shí)一抗種屬是否匹配。 4、檢測(cè)設(shè)備：熒光顯微鏡或熒光全片掃描設(shè)備，TSA單色熒光染料適用的激發(fā)和發(fā)射濾光片應(yīng)符合表中的建議。 三、石蠟切片操作步驟 1、脫蠟水合 a）新鮮二甲苯浸片10min，重復(fù)3次。 b）梯度乙醇浸片：100% 5min；95% 5min；70% 2min。 c）滅菌水洗片1min，重復(fù)3次。 d）10%中性福爾馬林或4%多聚甲醛浸片10-30min，滅菌水洗片1min，重復(fù)3次。（可選項(xiàng)，視樣本質(zhì)量而定） e）滴加破膜劑通透15min，PBST浸洗3min，重復(fù)3次。（可選項(xiàng)，一般情況下可不做） 2、微波修復(fù)抗原 a）將脫蠟水合后的玻片置于修復(fù)杯中，用抗原修復(fù)液1×工作液浸沒。 b）將修復(fù)杯置于微波爐內(nèi)高火煮沸。 c）低火維持15min（注意補(bǔ)液，防止蒸發(fā)過度導(dǎo)致干片）。 d）取出室溫自然冷卻至室溫。 3、淬滅和封閉 a）去除玻片上殘存洗液。 b）用組化筆圈出玻片上的樣本區(qū)域，滴加3%*覆蓋樣本區(qū)域，孵育10min，PBST浸洗3min，重復(fù)3次。 c）去除玻片上殘存洗液，滴加封閉液，覆蓋樣本區(qū)域，室溫保濕震蕩10-30min，除去封閉液。 4、一抗孵育 a）去除玻片上的封閉液。 b）用移液器滴加稀釋的一抗溶液，浸沒樣本區(qū)域。 c）室溫保濕震蕩孵育1h（需針對(duì)不同抗體做優(yōu)化調(diào)整）。 d）用1×TBST buffer浸洗玻片3min，重復(fù)1次。 5、二抗孵育 a）去除玻片上殘存的洗液。 b）直接滴加HRP二抗工作液溶液，浸沒樣本區(qū)域。 c）室溫保濕孵育10min。 d）用1×TBST buffer浸洗玻片3min，重復(fù)1次。 6、熒光染色放大信號(hào) a）去除玻片上殘存的洗液。 b）用移液器在玻片上滴加1×染料工作液100ul（使用信號(hào)放大液按1:100稀釋）浸沒樣本區(qū)域。 c）室溫保濕震蕩孵育10min。 d）1×TBST buffer浸洗玻片，室溫浸片3min。重復(fù)3次。 e）微波修復(fù)，室溫自然冷卻至室溫。 f）滅菌水洗片1次，1×TBST buffer浸片2min。 7、新一輪染色（單染可直接進(jìn)行第8步） a）每輪染色結(jié)束后可用熒光顯微鏡確認(rèn)染色情況，注意用TBST覆蓋樣品，防止干片。 b）封閉：去除玻片上殘存洗液，滴加封閉液，覆蓋樣本區(qū)域，室溫保濕震蕩10-30min，除去封閉液。（無需淬滅步驟） c）重復(fù)步驟4-6 d）多輪染色重復(fù)步驟7，a）— c）結(jié)束后進(jìn)行染核及封片 8、染核及封片 滴加1×DAPI工作液到樣品上，浸沒樣本區(qū)域，室溫孵育5min。用1×TBST浸洗玻片3次，每次2min。然后滴加抗熒光淬滅封片劑，用蓋玻片封片，避免氣泡，長(zhǎng)期保存請(qǐng)用透明指甲油對(duì)蓋玻片邊緣進(jìn)行密封。 9、閱片，對(duì)染色后的組織片在熒光顯微鏡下觀察并分析。 四、冰凍切片操作步驟（需搭配抗體洗脫液abs994） 1、淬滅、通透、封閉 a）從冰箱中取出冷凍玻片，恢復(fù)至室溫，PBST浸洗3min，重復(fù)3次 b）10%中性福爾馬林或4%多聚甲醛浸片10-30min，滅菌水洗片1min，重復(fù)3次。（可選項(xiàng)，視樣本質(zhì)量而定） c）滴加破膜劑通透15min，PBST浸洗3min，重復(fù)3次。（可選項(xiàng)，一般情況下可不做） d）用組化筆圈出玻片上的樣本區(qū)域，滴加3%*覆蓋樣本區(qū)域，孵育10min，PBST浸洗3min，重復(fù)3次。 e）去除玻片上殘存洗液，滴加封閉液，覆蓋樣本區(qū)域，室溫保濕震蕩10-30min，除去封閉液。 2、一抗孵育 a）去除玻片上的封閉。 b）用移液器滴加稀釋的一抗溶液，浸沒樣本區(qū)域。 c）室溫保濕震蕩孵育1h（需針對(duì)不同抗體做優(yōu)化調(diào)整）。 d）用1×TBST buffer浸洗玻片3min，重復(fù)1次。 3、二抗孵育 a）去除玻片上殘存的洗液。 b）直接滴加HRP二抗工作液溶液，浸沒樣本區(qū)域。 c）室溫保濕孵育10min。 d）用1×TBST buffer浸洗玻片3min，重復(fù)1次。 4、熒光染色放大信號(hào) a）去除玻片上殘存的洗液。 b）用移液器在玻片上滴加1×染料工作液100ul（使用信號(hào)放大液按1:100稀釋）浸沒樣本區(qū)域。 c）室溫保濕震蕩孵育10min。 d）1×TBST buffer浸洗玻片，室溫浸片3min。重復(fù)3次。 e）滴加抗體洗脫液（abs994），37℃孵育15-20min。 f）滅菌水洗片1次，1×TBST buffer浸片2min。 5、新一輪染色（單染可直接進(jìn)行第6步） a）每輪染色結(jié)束后可用熒光顯微鏡確認(rèn)染色情況，注意用TBST覆蓋樣品，防止干片。 b）封閉：去除玻片上殘存洗液，滴加封閉液，覆蓋樣本區(qū)域，室溫保濕震蕩10-30min，除去封閉液。 c）重復(fù)步驟2-4。 d）多輪染色重復(fù)步驟5，結(jié)束后進(jìn)行染核及封片。 6、染核及封片 滴加1×DAPI工作液到樣品上，浸沒樣本區(qū)域，室溫孵育5min。用1×TBST浸洗玻片3次，每次2min。然后滴加抗熒光淬滅封片劑，用蓋玻片封片，避免氣泡，長(zhǎng)期保存請(qǐng)用透明指甲油對(duì)蓋玻片邊緣進(jìn)行密封。 7、閱片，對(duì)染色后的組織片在熒光顯微鏡下觀察并分析。 1、微波修復(fù)抗原、孵育時(shí)間、溫度的改變均有可能得出錯(cuò)誤結(jié)果。 2、在每次染色過程中，必須有組織陽性對(duì)照和試劑陰性對(duì)照實(shí)驗(yàn)同時(shí)進(jìn)行。 3、若陽性組織對(duì)照不能顯示陽性染色，則應(yīng)判定該批次樣本的檢測(cè)結(jié)果無效。 六、產(chǎn)品性能指標(biāo)： 1、符合性：取符合性組織片（包括陽性組織片和陰性試劑對(duì)照），經(jīng)相應(yīng)的免疫組化試驗(yàn)后，陽性對(duì)照染色結(jié)果為陽性，陰性對(duì)照染色結(jié)果為陰性。 2、批內(nèi)重復(fù)性：取同一批次的試劑盒，檢測(cè)同一組織切片3片，染色結(jié)果應(yīng)一致。 七、染料信息表格
八、其他產(chǎn)品推薦
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| 性能 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 儲(chǔ)存/保存方法 | 五色多重?zé)晒饷庖呓M化染色試劑盒熒光染料需避光保存，2～8℃儲(chǔ)存，收到貨起有效期為12個(gè)月。 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 注意事項(xiàng) | 1、本試劑盒只用于免疫組化，不做其他用途。 2、本試劑盒僅限于專業(yè)人員使用。 3、應(yīng)采用適當(dāng)?shù)姆雷o(hù)措施，以避免試劑同皮膚和眼睛接觸。 4、超過有效期的試劑活性可能降低，因此不得使用超過有效期的試劑。 5、若將本試劑盒的染色組分與其他公司的產(chǎn)品混合使用，在染色過程中可能出現(xiàn)異常情況。 6、脫蠟不，容易影響染色效果。 7、為了防止可能出現(xiàn)的假陰性、假陽性結(jié)果，實(shí)驗(yàn)過程中需有陽性對(duì)照及陰性對(duì)照同時(shí)進(jìn)行。 8、使用本試劑盒中所產(chǎn)生的各種廢棄物都應(yīng)按照《醫(yī)療廢物管理?xiàng)l例》進(jìn)行處理。 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 參考文獻(xiàn) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 參考文獻(xiàn) | 1. Mingzhu Yang, et al., Chemical-induced chromatin remodeling reprograms mouse ESCs to totipotent-like stem cells. Cell Stem Cell. 2022 Mar 3 2. Xin Guan, et al., Nanoparticle-enhanced radiotherapy synergizes with PD-L1 blockade to limit post-surgical cancer recurrence and metastasis. Nature Communication. 2022 May 20 3. Qian-Yue Zhang, et al., Lymphocyte infiltration and thyrocyte destruction are driven by stromal and immune cell components in Hashimoto’s thyroiditis. Nature Communications. 2022 Feb 9 4. Dabbs David J. 診斷免疫組織化學(xué)(M). 北京：北京大學(xué)醫(yī)學(xué)出版社，2008.9. 5. 美】Ed Harlow, David Lane. 抗體技術(shù)指南(M). 北京：科學(xué)出版社，2002:79-80,105. 6. Stack, E. C., et al., Multiplexed immunohistochemistry, imaging, and quantitation: a review, with an assessment of Tyramide signal amplification, multispectral imaging and multiplex analysis. Methods, 2014 70 (1): 46-58. 7. 錢幫國(guó). 焦磊. 多標(biāo)記免疫熒光染色及多普成像技術(shù)在組織學(xué)研究中的應(yīng)用. 中國(guó)組織化學(xué)與細(xì)胞化學(xué)雜志, 2017 (4): 373-382. | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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