本產(chǎn)品是大腸桿菌重組表達來源的噬菌體T7 RNA聚合酶，以含有T7啟動子序列（5’-TAATACGACT CACTATA-3’）的雙鏈DNA為模板，以NTP為底物，合成與啟動子下游的反向單鏈DNA互補的RNA。雙鏈線性平末端或5’突出末端DNA均可作為T7 RNA聚合酶的底物模板，因此線性質(zhì)粒、PCR產(chǎn)物均可用作體外合成RNA的模板。
產(chǎn)品組成：

250 U/μL

應(yīng)用實例（體外轉(zhuǎn)錄實驗，推薦體系）：

需自備試劑：
無酶無菌水（#abs9259），GTP Sodium salt solution（#abs60164），假尿苷三磷酸na鹽溶液（abs60155），N1-甲基-假尿苷三磷酸na鹽溶液（#abs60156），CTP Sodium salt solution（#abs60163），Abs Cap AG（#abs60182），三磷酸腺苷鈉溶液（#abs60542）

1、在RNase free離心管中配制如下混合液

注：
a. 反應(yīng)于室溫配置。
b. 短轉(zhuǎn)錄本（<100nt），模板可使用 2-4μg，轉(zhuǎn)錄時間增至 4-8 個小時。
c. 長轉(zhuǎn)錄本（>1000nt），建議使用質(zhì)粒線性化模板進行轉(zhuǎn)錄。
d. 建議在 PCR 儀中進行反應(yīng)，熱蓋打開，防止長時間導(dǎo)致反應(yīng)液蒸發(fā)。
e. 反應(yīng)產(chǎn)物可能有白色沉淀。這是反應(yīng)過程中游離的焦磷酸與反應(yīng)液中的鎂離子形成焦磷酸鎂，不影響后續(xù)實驗。如想去除，添加 EDTA 即可消失。添加 EDTA 如果影響后續(xù)實驗，也可以離心回收上清。
f. 使用試劑、容器等無 RNase 污染。
2、輕輕混勻。
3、37℃ 2-3 h。
4、DNase Ⅰ處理（可選）
反應(yīng)完成后，每管加入 2μL DNase Ⅰ（RNase free），37℃孵育 15min 以去除模板 DNA。
5、產(chǎn)物純化
轉(zhuǎn)錄后的 RNA 可以選用 RNA Cleaner 磁珠進行純化，也可以采用酚/氯仿純化法，氯化鋰沉淀法或柱純化等，以去除蛋白、游離的核苷酸。純化后的 RNA 經(jīng)電泳檢測后可進行下游實驗或存儲于-80℃。

-20 ℃以下保存。避免反復(fù)凍融或頻繁暴露于溫度變化中，shou次使用時建議進行分裝。產(chǎn)品有效期：12個月。
干冰運輸。