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目錄:愛必信(上海)生物科技有限公司>>生化試劑>>抗生素>> abs47014921膠原蛋白I型(鼠尾)

膠原蛋白I型(鼠尾)

  • 膠原蛋白I型(鼠尾)
參考價(jià)400
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

參考價(jià):¥ 400

具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • absin 品牌
  • abs47014921 型號(hào)
  • 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
  • 上海市 所在地
規(guī)格

2ml

屬性

CAS:9007-34-5 供貨周期:現(xiàn)貨 規(guī)格:2ml;10ml 貨號(hào):abs47014921 應(yīng)用領(lǐng)域:化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,制藥/生物制藥,綜合 主要用途:可用于包被細(xì)胞培養(yǎng)器皿,培養(yǎng)細(xì)胞表面粘附性,特別適合那些在普通培養(yǎng)器皿表面不易貼

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2ml400元999ml可售

更新時(shí)間:2025-11-05 15:01:20瀏覽次數(shù):2380評(píng)價(jià)

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CAS 9007-34-5 供貨周期 現(xiàn)貨
規(guī)格 2ml;10ml 貨號(hào) abs47014921
應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,制藥/生物制藥,綜合 主要用途 可用于包被細(xì)胞培養(yǎng)器皿,培養(yǎng)細(xì)胞表面粘附性,特別適合那些在普通培養(yǎng)器皿表面不易貼
膠原蛋白I型(鼠尾)是根據(jù)Birkedal-Hansen 方法,通過醋酸抽提、氯化鈉沉淀等步驟制備。可用于包被細(xì)胞培養(yǎng)器皿,培養(yǎng)細(xì)胞表面粘附性,特別適合那些在普通培養(yǎng)器皿表面不易貼壁的細(xì)胞,比如成纖維細(xì)胞、肝細(xì)胞等原代細(xì)胞。還可用于三維膠的制備,模擬真實(shí)的生長(zhǎng)環(huán)境,使得細(xì)胞在三維環(huán)境中生長(zhǎng)。

膠原蛋白I型(鼠尾)

產(chǎn)品描述
描述
        膠原蛋白是結(jié)締組織和內(nèi)臟器官細(xì)胞外基質(zhì)的主要構(gòu)造成分,但在皮膚、肌腱、骨骼中分布最為廣泛。從遺傳和結(jié)構(gòu)上膠原蛋白分為許多類型。膠原蛋白I(Collagen, Type I)是由2 個(gè)α1 鏈和1 個(gè)α2 鏈組成的異源多聚體,在37℃,中性pH 下自發(fā)形成三螺旋骨架,是一種優(yōu)秀的細(xì)胞培養(yǎng)用基質(zhì),廣泛用于肝細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、脊神經(jīng)節(jié)、肌肉細(xì)胞、施萬細(xì)胞、胚肺細(xì)胞、上皮細(xì)胞和其他大量細(xì)胞系。還能用于研究細(xì)胞生長(zhǎng)、分化、遷移以及發(fā)育過程中的組織形態(tài)發(fā)生。
       鼠尾膠原蛋白I 是根據(jù)Birkedal-Hansen 方法,通過醋酸抽提、氯化鈉沉淀、磷酸氫二na沉淀等步驟制備??捎糜诎患?xì)胞培養(yǎng)器皿,培養(yǎng)細(xì)胞表面粘附性,特別適合那些在普通培養(yǎng)器皿表面不易貼壁的細(xì)胞,比如成纖維細(xì)胞、肝細(xì)胞等原代細(xì)胞。還可用于三維膠的制備,模擬真實(shí)的生長(zhǎng)環(huán)境,使得細(xì)胞在三維環(huán)境中生長(zhǎng)。
       本品為溶于6mM HAc 的無菌溶液,濃度5mg/ml,每個(gè)批次產(chǎn)品皆通過細(xì)胞培養(yǎng)測(cè)試(包括三維空間培養(yǎng))以保證質(zhì)量的可靠性。
濃度
5mg/mL
使用方法
一、細(xì)胞培養(yǎng)器皿的表面包被:
組織培養(yǎng)器皿的表面包被推薦濃度為1-5μg/cm2,起始濃度可shou選5μg/cm2。建議根據(jù)具體細(xì)胞類型來優(yōu)化。
1、6mM HAc 稀釋液的制備
本品以溶于6mM HAc(=0.36g/L HAc)的無菌溶液形式提供,本身不溶于中性pH,建議用6mM HAc 溶液做進(jìn)一步稀釋。
配制方法:取34.5μL 冰醋酸(17.4 M)加入100ml 雙蒸水,充分混勻后即得到6mM HAc 溶液,0.22μm 濾膜過濾除菌后待用。
2、包被步驟
(1)根據(jù)自身實(shí)驗(yàn)體系以及優(yōu)化后的包被濃度來計(jì)算所需的膠原蛋白量,并加入相應(yīng)孔內(nèi),確保膠原蛋白溶液wan全覆蓋表面。
①以包被濃度為5μg/cm2,先用6mM HAc 稀釋液將膠原蛋白(5mg/mL)稀釋到合適的中間濃度,50μg/mL,然后參考表1 不同培養(yǎng)皿內(nèi)膠原蛋白加量表 來加量到各孔內(nèi);
②以包被濃度為2μg/cm2,先用6mM HAc 稀釋液將膠原蛋白(5mg/mL)稀釋到合適的中間濃度,12μg/mL,然后參考表1 不同培養(yǎng)皿內(nèi)膠原蛋白加量表來加量到各孔內(nèi);
                                                   表1 不同培養(yǎng)皿內(nèi)膠原蛋白加量表
培養(yǎng)皿類型每孔/皿表面積(cm2當(dāng)包被濃度:2μg/cm2,中間稀釋濃度:12μg/mL,加入該稀釋液的體積(μL)當(dāng)包被濃度:5μg/cm2,中間稀釋濃度50μg/mL,加入該稀釋液的體積(μL)
96 well0.35030
24 well1.9300190
12 well3.8600380
6 well9.51580950
35mm81330800
60mm2135002100
100mm5591705500
(2)室溫孵育1h,小心吸掉多余液體,用無菌PBS 清洗3~4 次后直接使用?;蛘呒油昴z原蛋白溶液后,在超凈臺(tái)內(nèi)開蓋過夜晾干。無菌條件下,包被好的器皿在4-25℃至少可保存3 個(gè)月。
二、三維膠原的制備:
當(dāng)鼠尾膠原蛋白I 使用濃度>1mg/mL,pH 7.0 左右皆可形成具有一定強(qiáng)度的三維膠,建議成膠濃度為1-2mg/mL。
由于本品是以溶于6mM HAc 的無菌溶液形式提供,在成膠過程需先加入0.06 倍體積的0.1M NaOH 中和。
1、需要溶液準(zhǔn)備(無菌、預(yù)冷)
10×PBS(可含酚紅)或10×細(xì)胞培養(yǎng)液
0.1M NaOH
雙蒸水
2、三維膠原制備(不含細(xì)胞)(以配制1mL,1mg/mL 三維膠為例):
(1)取200μL 膠原蛋白(5mg/mL)加到置于冰浴的離心管內(nèi),加入690μL 無菌水。之后加到12μL 0.1M NaOH【注意:該步驟不能反,如果反過來把12μL 0.1M NaOH 加到膠原溶液中,會(huì)由于NaOH 不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結(jié)】,立即混勻。再加入100μL 10×PBS 或10×細(xì)胞培養(yǎng)液,混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中【注意:混勻后pH 為7.0 左右,如果PBS 或培養(yǎng)液中沒有加酚紅,初次使用時(shí)需要用pH 試紙測(cè)試】
(2)將培養(yǎng)器皿在室溫(25℃左右)放置20min 待膠凝固后,轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)箱內(nèi)。【注意】:如果配制中使用的是10×PBS,需要在做細(xì)胞培養(yǎng)前,先加入適當(dāng)體積的細(xì)胞培養(yǎng)液預(yù)平衡。
3、三維膠原制備(含細(xì)胞)(以配制1mL,1mg/mL 三維膠為例):
(1)準(zhǔn)備好細(xì)胞懸液,并放置于冰浴中。
(2)將200μL 膠原蛋白(5mg/mL)加到12μL 0.1M NaOH【注意:該步驟不能反,如果反過來把12μL0.1M NaOH加到膠原溶液中,會(huì)由于NaOH 不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結(jié)】,立即混勻。再加入23μL 10×PBS
或者10×細(xì)胞培養(yǎng)液,立即混勻【注意:混勻后pH 為7.0 左右,如果PBS 或培養(yǎng)液中沒有加酚紅,初次使用時(shí)需要用pH試紙測(cè)試】。再加入760μL 的細(xì)胞懸浮液,混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中。
(3)將培養(yǎng)器皿在室溫(25℃左右)放置20min 待膠凝固后,加入適當(dāng)體積細(xì)胞培養(yǎng)液,轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
儲(chǔ)存/保存方法
2-8℃保存,不可凍存,有效期12個(gè)月。
注意事項(xiàng)
1、整個(gè)操作請(qǐng)于冰上進(jìn)行,因室溫鼠尾膠原I 可迅速成膠,操作過程盡量保持低溫。
2、整個(gè)操作請(qǐng)?jiān)跓o菌環(huán)境下無菌操作,避免污染以影響細(xì)胞生長(zhǎng)。
3、為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
基本信息
外觀
溶液
膠原蛋白I型(鼠尾)溫馨提示:本產(chǎn)品僅作科研實(shí)驗(yàn)使用,不支持臨床等研究


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