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細胞增殖檢測試劑盒 CCK-8檢測細胞增殖

  • 細胞增殖檢測試劑盒 CCK-8檢測細胞增殖
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更新時間:2026-02-27 11:06:08瀏覽次數:882評價

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  CCK-8細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒(Cell Counting Kit-8)是一種基于 WST-8(水溶性四唑鹽)的快速、靈敏檢測細胞增殖與細胞毒性的工具,廣泛應用于細胞生物學、藥理學等領域。
 
  其核心原理是:試劑盒中的WST-8在電子載體 1-Methoxy PMS 的作用下,被細胞內的脫氫酶(主要是線粒體活性脫氫酶)還原為橙黃色的甲臜(Formazan)。生成的甲臜量與活細胞數量成正比 —— 活細胞越多,脫氫酶活性越高,甲臜生成量越多,在 450nm 處的吸光度(OD 值)也越高。
 
  主要應用場景
 
  細胞增殖檢測:評估細胞在不同培養(yǎng)條件(如藥物、血清濃度)下的生長能力。
 
  細胞毒性檢測:檢測藥物、毒素等對細胞的損傷或抑制作用(活細胞減少,OD 值降低)。
 
  優(yōu)勢
 
  操作簡便:無需洗滌細胞,直接向培養(yǎng)體系中加入 CCK-8 試劑,孵育后即可檢測。
 
  靈敏度高:比 MTT 法更靈敏,且無放射性污染。
 
  適用性廣:適用于貼壁細胞和懸浮細胞,對細胞毒性小,可用于長期動態(tài)監(jiān)測。
 
  基本操作步驟
 
  細胞接種到 96 孔板,培養(yǎng)至合適密度;
 
  加入待測藥物或處理因素,孵育特定時間;
 
  每孔加入 10μL CCK-8 試劑(按 1:10 比例與培養(yǎng)基混合);
 
  37℃孵育 1-4 小時(根據細胞類型調整時間);
 
  酶標儀檢測 450nm 處的 OD 值,分析結果。



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CCK-8細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒

 

貝博生物專注于生命科學研究用試劑產品的研究、開發(fā)、市場推廣和技術服務。致力于為中國廣大客戶提供量身定制的科研用試劑產品和專業(yè)技術服務,幫助科研人員加速生物領域的研究進展。 貝博生物將以高品質的產品和服務打造實力的試劑品牌。

目前已上市了600多種蛋白提取試劑盒(動物、植物、細菌、昆蟲、酵母等樣本及細胞器提取)CCK-8細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒及上千種的細胞檢測的相關產品-細胞凋亡、增殖毒性、細胞周期、膜電位檢測、細胞器熒光探針、活性氧ROS檢測、細胞自噬、細胞耗氧OCR、細胞外酸化率ECAR、缺氧檢測、粘附檢測、鈣離子檢測、膜通透性轉換孔檢測、膜流動性檢測、外泌體、囊泡提取等。

常見問題:


  Q1: CCK-8試劑盒相比傳統(tǒng)的MTT法有哪些優(yōu)勢?

 
  A1: CCK-8生成的甲臜染料是水溶性的,無需換液和溶解步驟,操作更簡便;且靈敏度更高,對細胞毒性更小,可用于動態(tài)監(jiān)測。
 
  Q2: 如何確定加入CCK-8試劑后的最佳孵育時間?
 
  A2: 最佳時間因細胞類型和數量而異??赏ㄟ^預實驗,在加試劑后于不同時間點(如0.5、1、2、4小時)檢測吸光度,選擇OD值處于線性增長區(qū)間的時間點。
 
  Q3: 如果實驗結果背景值很高或波動大,可能是什么原因?
 
  A3: 可能原因包括:培養(yǎng)基中酚紅指示劑的干擾、細胞死亡過多、試劑污染或含有氧化還原物質。建議使用無酚紅培養(yǎng)基,并設置無細胞的空白孔對照。
 
  Q4: CCK-8法能否直接用于體內或組織樣本的檢測?
 
  A4: 不能。CCK-8法專為體外培養(yǎng)的細胞設計,需要細胞具有正常的代謝活性。對于組織樣本,需先制備成單細胞懸液后才能進行檢測。
 
  Q5: CCK-8法檢測細胞毒性時,如何設置實驗對照組?
 
  A5: 通常需設置:空白對照組(只有培養(yǎng)基)、對照組(未處理細胞)、實驗組(藥物處理細胞)。計算時需用實驗組OD值減去空白組,再與對照組比較。
 


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