【試劑詳情】
英文名稱：FITC-Biotin，F(xiàn)luorescein Biotin
中文名稱：熒光素-生物素，熒光素異硫氰酸酯標記生物素
分子式：C42H50N6O8S2 • 2C6H15N
分子量：1033.4
Emission：535 nm
Excitation：485 nm
供應(yīng)商：西安凱新生物科技
結(jié)構(gòu)式：
一、分子結(jié)構(gòu)與化學特性
1.核心組成
FITC-Biotin由兩部分共價連接而成：
FITC（熒光素異硫氰酸酯）：含氧雜蒽環(huán)熒光母核，末端異硫氰酸酯基團（-N=C=S）可與生物分子氨基反應(yīng)，形成穩(wěn)定硫脲鍵（-N-CS-NH-）。
生物素（Biotin）：由咪唑酮環(huán)、戊酸側(cè)鏈及末端硫基構(gòu)成，能與鏈霉親和素（Streptavidin）或親和素（Avidin）以親和力（Kd≈10?1? M）結(jié)合。
連接臂：通常為短鏈烴基或聚乙二醇（PEG），可減少空間位阻，增強水溶性。
2.物理化學性質(zhì)
溶解性：易溶于DMSO、DMF等有機溶劑，水中溶解度較低，需通過PEG化或預(yù)處理改善。
熒光特性：激發(fā)波長535 nm（藍光），發(fā)射波長485 nm（綠光），信號強且穩(wěn)定。
穩(wěn)定性：需避光、低溫（-20℃）保存，避免與強酸、強堿或氧化劑接觸。
二、反應(yīng)原理
1.活化生物素：生物素羧基與NHS（N-羥基琥珀酰亞胺）在EDC（碳二亞胺）作用下生成活性酯中間體（Biotin-NHS）。
偶聯(lián)反應(yīng)：Biotin-NHS與FITC在堿性條件（pH 8-9）下反應(yīng)，形成硫脲鍵連接的FITC-Biotin。
純化：通過柱層析或HPLC分離未反應(yīng)物，質(zhì)譜（MS）和核磁共振（NMR）驗證結(jié)構(gòu)。
2.標記原理
熒光標記：FITC的異硫氰酸酯基團與目標分子（如蛋白質(zhì)、抗體）的氨基反應(yīng)，賦予其綠色熒光特性。
生物素-親和素系統(tǒng)：生物素與鏈霉親和素結(jié)合后，可通過多級放大（如親和素-酶或熒光探針）增強檢測信號。
三、核心應(yīng)用場景
1.分子標記與追蹤
蛋白質(zhì)/細胞標記：標記細胞表面受體或細胞內(nèi)蛋白，通過熒光顯微鏡觀察定位。
印跡分析：用于Western blot或Southern blot，檢測靶分子表達水平。
熒光原位雜交（FISH）：標記DNA/RNA探針，定位特定核酸序列。
2.親和純化與分離
磁珠捕獲：FITC-Biotin修飾磁珠，結(jié)合生物素化靶分子（如抗體），實現(xiàn)高效富集。
微陣列技術(shù)：固定于芯片表面，用于微量生物標志物檢測。
3.納米材料功能化
脂質(zhì)體/納米粒修飾：賦予納米載體熒光示蹤能力，同時通過生物素-親和素系統(tǒng)實現(xiàn)靶向遞送。
水凝膠交聯(lián)：作為交聯(lián)劑構(gòu)建智能響應(yīng)材料，用于生物傳感或藥物釋放。
4.多模態(tài)檢測系統(tǒng)
ELISA/流式細胞術(shù)：結(jié)合酶標或熒光標，實現(xiàn)高靈敏度定量分析。
生物芯片：與鏈霉親和素偶聯(lián)物結(jié)合，構(gòu)建多通道檢測平臺。
四、優(yōu)勢
雙功能特性：兼具熒光示蹤與生物素-親和素系統(tǒng)的高特異性。
信號放大：通過多級結(jié)合（如親和素-酶）顯著提升檢測靈敏度。
操作靈活性：可修飾多種生物分子（如多肽、核酸）及納米材料。
五、相關(guān)試劑
Biotin-NHS
Streptavidin-FITC
EDC·HCl（碳二亞胺鹽酸鹽）
NHS（N-羥基琥珀酰亞胺）
DMSO（二甲基亞砜）
PEG?-Biotin（聚乙二醇化生物素）
FITC-PEG?-Biotin（三功能連接分子）
HABA（4-羥基偶氮苯-2-羧酸）
Biotin-BSA（生物素化牛血清白蛋白）
TAMRA-Biotin（四甲基羅丹明標記生物素）
Cy3-Biotin（花青素3標記生物素）
Alexa Fluor 488-Biotin
Biotin-Azide（疊氮化生物素）
Biotin-DBCO（二苯并環(huán)辛炔生物素）
Biotin-Phenol（生物素化苯酚）
六、未來發(fā)展方向
多功能探針設(shè)計：開發(fā)兼具靶向、成像的FITC-Biotin衍生物。
單分子檢測技術(shù)：結(jié)合超分辨顯微鏡，實現(xiàn)單分子水平動態(tài)追蹤。
智能材料集成：與響應(yīng)性材料結(jié)合，構(gòu)建環(huán)境敏感型生物傳感器。
西安凱新生物科技編輯小華溫馨提示：該試劑僅限于科學研究或工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療領(lǐng)域的使用。
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