前言：

白酒是世界六大蒸餾酒之一，是以糧谷為主要原料，以大曲、小曲、麩曲、酵母等作為發(fā)酵劑，經(jīng)蒸煮、發(fā)酵、蒸餾、勾調(diào)等多道工藝釀造而成。白酒的釀造需經(jīng)歷多種微生物混合發(fā)酵，微生物代謝會(huì)產(chǎn)生各種功能成分，如γ-氨基丁酸和核苷類(lèi)物質(zhì)等。其中，核苷類(lèi)物質(zhì)具有增強(qiáng)免疫、抗氧化、抗癌等生物活性，具有一定的保健作用。腺苷能顯著提高細(xì)胞活力，在機(jī)體的中樞神經(jīng)系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)和凝血系統(tǒng)中發(fā)揮重要作用。尿苷具有促進(jìn)睡眠和抗癲癇的作用，改善記憶功能。

本篇文章采用了皖儀科技高效液相色譜儀LC3400系列配置紫外檢測(cè)器對(duì)白酒中核苷類(lèi)物質(zhì)含量進(jìn)行檢測(cè)。系統(tǒng)適用性實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，尿苷和腺苷色譜峰的理論塔板數(shù)均在7000以上。核苷類(lèi)混合標(biāo)準(zhǔn)溶液重復(fù)進(jìn)樣6次，尿苷保留時(shí)間RSD值為0.0537%，峰面積RSD值為0.3859%。腺苷保留時(shí)間RSD值為0.2240%，峰面積RSD值為0.3866%。重復(fù)性較好。尿苷和腺苷的線性良好，線性相關(guān)系數(shù)均＞0.999，尿苷的檢出限為0.67 μg/L，定量限為2.23 μg/L；腺苷的檢出限為15.63 μg/L，定量限為52.09 μg/L。以某品牌白酒作為測(cè)試樣品，該品牌白酒未檢測(cè)出尿苷和腺苷，檢測(cè)結(jié)果正常。說(shuō)明了該方法配備皖儀科技LC3400系列儀器滿(mǎn)足對(duì)白酒中核苷類(lèi)物質(zhì)含量的檢測(cè)需求。

關(guān)鍵詞：尿苷；腺苷；高效液相色譜法；紫外檢測(cè)器；白酒。

1. 實(shí)驗(yàn)方法

1.1儀器配置

1.2實(shí)驗(yàn)材料及輔助設(shè)備

甲醇：色譜純；

尿苷標(biāo)準(zhǔn)品；

腺苷標(biāo)準(zhǔn)品；

分析天平；

超聲波清洗機(jī)；

渦旋混合器；

0.22μm水系濾膜。

1.3測(cè)試條件

1.4溶液配制

1.4.1核苷類(lèi)物質(zhì)標(biāo)曲實(shí)驗(yàn)工作液

精密稱(chēng)取尿苷標(biāo)準(zhǔn)品1.00 mg和腺苷標(biāo)準(zhǔn)品10.00 mg置于同一 10 mL容量瓶中，用10%甲醇水溶解并定容，可得尿苷濃度為100μg/mL和腺苷濃度為 1000μg/mL的混合標(biāo)準(zhǔn)母液。再用10%甲醇溶液倍比稀釋成混合標(biāo)準(zhǔn)系列，可得，核苷類(lèi)混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液中尿苷濃度分別為100 μg/mL、50 μg/mL、25 μg/mL、10 μg/mL、5 μg/mL、2 μg/mL、1 μg/mL、

0.5 μg/mL；腺苷濃度分別為1000 μg/mL、500 μg/mL、250 μg/mL、100 μg/mL、50 μg/mL、20 μg/mL、10 μg/mL、5 μg/mL。

2.結(jié)果與討論

2.1系統(tǒng)適用性

說(shuō)明：由上述譜圖可見(jiàn)，尿苷色譜峰的保留時(shí)間為4.953 min，腺苷色譜峰的保留時(shí)間為17.245 min，理論塔板數(shù)均在7000以上。 

2.2標(biāo)準(zhǔn)曲線

說(shuō)明：本次測(cè)試的核苷類(lèi)混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液中尿苷濃度分別為100 μg/mL、50 μg/mL、25 μg/mL、10 μg/mL、5 μg/mL、2 μg/mL、1 μg/mL、0.5 μg/mL；腺苷濃度分別為1000 μg/mL、500 μg/mL、250 μg/mL、100 μg/mL、50 μg/mL、20 μg/mL、10 μg/mL、5 μg/mL。尿苷和腺苷的標(biāo)準(zhǔn)曲線線性范圍較好，線性相關(guān)系數(shù)均＞0.999，滿(mǎn)足實(shí)驗(yàn)分析需求。

2.3 重復(fù)性

說(shuō)明：核苷類(lèi)混合標(biāo)準(zhǔn)溶液（尿苷25 μg/mL，腺苷250μg/mL）重復(fù)進(jìn)樣6次，尿苷保留時(shí)間RSD值為0.0537%，峰面積RSD值為0.3859%。腺苷保留時(shí)間RSD值為0.2240%，峰面積RSD值為0.3866%。重復(fù)性較好。

2.4 檢出限

說(shuō)明：以信噪比（S/N）為3確定檢出限（LOD），尿苷檢出限為0.67 μg/L，腺苷檢出限為15.63 μg/L。以信噪比（S/N）為10確定定量限（LOQ），尿苷定量限為2.23 μg/L，腺苷定量限為52.09 μg/L。

2.5 樣品測(cè)試

選擇某品牌白酒作為基質(zhì)，準(zhǔn)確量取10 mL酒樣經(jīng)0.22μm水系濾膜過(guò)濾，進(jìn)樣量10 μL，供高效液相色譜儀測(cè)定。

說(shuō)明：該品牌白酒未檢測(cè)出尿苷和腺苷，檢測(cè)結(jié)果正常。

2.6 注意事項(xiàng)

（1）在制備相關(guān)溶液時(shí)需要注意佩戴好實(shí)驗(yàn)室防護(hù)用品。

（2）相關(guān)溶液配制好后置于2-8℃保存。

3．結(jié)論

本篇文章采用了皖儀科技高效液相色譜儀LC3400系列配置紫外檢測(cè)器對(duì)白酒中核苷類(lèi)物質(zhì)含量進(jìn)行檢測(cè)。系統(tǒng)適用性實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，尿苷和腺苷色譜峰的理論塔板數(shù)均在7000以上。核苷類(lèi)混合標(biāo)準(zhǔn)溶液重復(fù)進(jìn)樣6次，尿苷保留時(shí)間RSD值為0.0537%，峰面積RSD值為0.3859%。腺苷保留時(shí)間RSD值為0.2240%，峰面積RSD值為0.3866%。重復(fù)性較好。尿苷和腺苷的線性良好，線性相關(guān)系數(shù)均＞0.999，尿苷的檢出限為0.67 μg/L，定量限為2.23 μg/L；腺苷的檢出限為15.63 μg/L，定量限為52.09 μg/L。以某品牌白酒作為測(cè)試樣品，該品牌白酒未檢測(cè)出尿苷和腺苷，檢測(cè)結(jié)果正常。說(shuō)明了該方法配備皖儀科技LC3400系列儀器滿(mǎn)足對(duì)白酒中核苷類(lèi)物質(zhì)含量的檢測(cè)需求。