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在化妝品中,抗壞血酸磷酸酯鎂、抗壞血酸葡糖苷、曲酸、煙酰胺、3-鄰-乙基抗壞血酸、4-甲氧基水楊酸鉀、阿魏酸、鞣花酸、4-丁基間苯二酚、苯乙基間苯二酚、氨甲環(huán)酸經(jīng)常作為美白抗氧化組分,有效地起到抗氧化、美白和防曬的作用。但是長期過量使用添加這些組分的化妝品,會刺激皮膚,引起過敏反應。
本應用參考《化妝品安全技術(shù)規(guī)范》2015版,采用Leaps Duo并聯(lián)液相色譜系統(tǒng)將化妝品中抗壞血酸磷酸酯鎂等11種化合物分成兩組,采用不同色譜條件同時測試,其中抗壞血酸磷酸酯鎂、抗壞血酸葡糖苷、曲酸、煙酰胺、3-鄰-乙基抗壞血酸、4-甲氧基水楊酸鉀、阿魏酸、鞣花酸、4-丁基間苯二酚、苯乙基間苯二酚為Ⅰ組,氨甲環(huán)酸為Ⅱ組。將檢測時間縮減一半,顯著提高了工作效率。
P60雙三元梯度泵、A10D雙閥自動進樣器、C10V2柱溫箱、D10紫外檢測器、D22二極管陣列檢測器

Ⅰ組混合標準工作溶液(10種,抗壞血酸磷酸酯鎂、抗壞血酸葡糖苷、曲酸、煙酰酸、3-鄰-乙基抗壞血酸、4-甲氧基水楊酸鉀、阿魏酸、鞣花酸、4-丁基間苯二酚、苯乙基間苯二酚)濃度分別為:1 .00 μg/mL、2.00 μg/mL、5.00 μg/mL、10.00 μg/mL、25.00 μg/mL、50.00 μg/mL;ⅠI組標準工作溶液(氨甲環(huán)酸)濃度分別為:5.00 μg/mL、10.00 μg/mL、20.00 μg/mL、50.00 μg/mL、100.00 μg/mL、200.00 μg/mL。
色譜柱:Lotus C18(4.6mm*250mm, 5 μm)
柱溫:30 ℃
進樣體積:10 μL
檢測波長:煙酰胺為230 nm,抗壞血酸磷酸酯鎂、抗壞血酸葡糖苷、曲酸、煙酰酸、3-鄰-乙基抗壞血酸、4-甲氧基水楊酸鉀、鞣花酸為250 nm,阿魏酸、4-丁基間苯二酚、苯乙基間苯二酚為280 nm
流動相:A:0.02 mol/L磷酸二氫鉀溶液 B:甲醇
梯度表:

色譜柱:Lotus C18(4.6mm*250mm,5 μm)
柱溫:30 ℃
進樣體積:40 μL
波長:210 nm
流動相:B:甲醇 C:0.05 mol/L 的磷酸二氫鉀—0.2%磷酸溶液
等度表:

本應用中組I和組II中各化合物峰型良好,分離度高,標準溶液譜圖如圖1所示。



圖1 I組抗壞血酸磷酸酯鎂等10種原料標準溶液色譜圖
(A:230nm,1.煙酰胺;B:250nm,1.抗壞血酸磷酸酯鎂、2.抗壞血酸葡糖苷、3.曲酸、4. 3-鄰-乙基抗壞血酸、5. 4-甲氧基水楊酸鉀、6.鞣花酸;C:280nm,1.阿魏酸、2. 4-丁基間苯二酚、3.苯乙基間苯二酚)

圖2 II組氨甲環(huán)酸標準溶液色譜圖
依次將標準工作溶液按濃度從低到高進樣,以不同濃度點為橫坐標,以每個濃度點峰面積為縱坐標繪制標準曲線。各化合物在線性范圍內(nèi),線性相關(guān)系數(shù)均大于0.9997。
表1 標準曲線及檢出限結(jié)果表

將同一濃度的抗壞血酸磷酸酯鎂等10種物質(zhì)和氨甲環(huán)酸的標準溶液分別進樣6次,重復性結(jié)果如表2所示,保留時間RSD%均小于0.15%,峰面積RSD%均小于1.5%。
表2 重復性結(jié)果表

在實際樣本中添加不同化合物對應的加標濃度,加標回收率計算結(jié)果如表3所示,加標回收率范圍在82.8% ~104.0%之間。
表3 加標回收率結(jié)果表

本應用案例使用科諾美Leaps Duo并聯(lián)液相色譜系統(tǒng)建立了快速測定化妝品中抗壞血酸磷酸酯鎂等11種化合物的方法。各化合物線性相關(guān)系數(shù)均大于0.9997;保留時間重復性均小于0.15%,峰面積重復性均小于1.5 %;實際樣本加標回收率在82.8% ~104.0%。本方法自動化程度高,穩(wěn)定性好,靈敏度高,過程簡便易操作,采用雙進樣系統(tǒng),大大提高了工作效率,將檢測時間縮減一半,適用于化妝品中抗壞血酸磷酸酯鎂等11種化合物含量的快速測定。
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