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elisa試劑盒顯色液a和b液
ELISA檢測試劑盒的顯色液A和B液是底物系統(tǒng),A液通常含過氧化氫,B液含TMB。在HRP酶催化下,TMB被氧化成藍色,加入終止液后轉(zhuǎn)為黃色,顏色深淺與PC濃度成正比。
顯色液A液?:主要成分為過氧化氫(H?O?),作為氧化劑,為酶促反應(yīng)提供必需的氧原子。
顯色液B液?:主要成分為TMB,是一種無色的發(fā)色底物,在HRP酶的催化下被氧化生成藍色產(chǎn)物。
顯色原理?:HRP酶催化H?O?分解,產(chǎn)生的活性氧將TMB氧化成藍色,加入終止液后變?yōu)辄S色,在450nm波長下測定吸光度(OD值)。

注意事項?:
顯色液A和B需避光保存,現(xiàn)配現(xiàn)用。
使用前需平衡至室溫,避免溫度影響反應(yīng)效率。
顯色時間需嚴格控制,過長可能導(dǎo)致背景升高,過短則信號不足。
顯色反應(yīng)需避光進行,防止光解影響結(jié)果。
終止液含強酸,操作時需注意安全防護。
ELISA顯色操作避坑清單:
ELISA顯色操作避坑清單如下:
?顯色液A/B液?:現(xiàn)配現(xiàn)用,避光保存,使用前平衡至室溫,避免污染或失效。
?顯色時間?:嚴格控制時間(通常15-30分鐘),避免過長導(dǎo)致背景升高或過短導(dǎo)致信號不足。
?顯色環(huán)境?:避光操作,防止底物見光分解,影響顯色效果。
?顯色后處理?:加入終止液后立即測定,避免顯色過度或反應(yīng)不全。
?顯色異常處理?:若出現(xiàn)顯色不均或異常,檢查顯色液是否混勻、是否過期,以及孵育條件是否恒定。
注:以上僅供參考!希望以上信息能幫助您做出合適的選擇!
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