當前位置:北京百泰派克生物科技有限公司>>檢測技術服務>>蛋白分析>> 一站式免疫肽組服務解決方案檢測技術服務
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在癌癥miǎnyìzhìliáo、個體化疫苗開發(fā)、自身免疫疾病機制解析等前沿研究中,免疫肽組學(Immunopeptidomics)正在成為連接基礎免疫研究與臨床轉化的關鍵技術。通過高分辨率質譜技術解析主要組織相容性復合體(MHC)呈遞的抗原肽段,免疫肽組學幫助研究者揭示細胞內抗原加工與免疫識別的分子機制。免疫肽組專注于MHC分子負載的內源性/外源性短肽,其豐度極低、結構不規(guī)則,且受MHC等位基因多樣性影響顯著。這對實驗設計、樣本處理、質譜靈敏度與數(shù)據(jù)分析提出了更高要求。
免疫肽是由MHC分子呈遞于細胞表面、供T細胞識別的肽段。根據(jù)MHC類別不同,呈遞路徑略有差異:
MHC I類:主要呈遞細胞內源性抗原(如腫瘤抗原、病毒蛋白)至CD8+ T細胞,典型肽段長度為8–11個氨基酸。
MHC II類:呈遞外源性抗原至CD4+ T細胞,肽段較長,可達13–25個氨基酸。
通過全面捕獲這些抗原肽并進行高分辨質譜鑒定,研究者可以:
識別個體化新抗原,用于癌癥疫苗開發(fā)或TCR-T細胞治療
構建疾病相關抗原譜,用于自身免疫或傳染病研究
揭示抗原加工與MHC限制性表達規(guī)律,加深對免疫識別本質的理解
二、一站式免疫肽組服務流程解析
1、樣本處理與MHC免疫富集
免疫肽組學研究的首要難點在于目標肽段豐度極低,因此,高效、特異的MHC富集是成功的前提。
(1)使用抗HLA抗體對細胞裂解液進行免疫共沉淀(IP),高效富集MHC分子;
(2)提供支持HLA-A、HLA-B、HLA-C及HLA-DR等不同亞型的抗體組合;
(3)可兼容組織樣本、細胞系、PBMC、體液等多種樣本類型。
2、抗原肽洗脫與純化
通過酸洗脫或弱堿條件釋放MHC負載肽段,隨后經C18固相萃?。⊿PE)去除雜質和背景蛋白,確保進入質譜的樣品具有高純度和高回收率。
3、高分辨LC-MS/MS分析
(1)采用Orbitrap Exploris 480等高靈敏質譜平臺,結合FAIMS Pro等前沿離子遷移技術,有效提升低豐度肽段的檢測率;
(2)支持DDA(Data Dependent Acquisition)與DIA(Data Independent Acquisition)模式,適配多種研究目的;
(3)質譜掃描參數(shù)優(yōu)化用于短肽段,提高片段離子質量精度與同位素分辨率。
4、生信分析與抗原注釋
免疫肽組數(shù)據(jù)的價值在于生信解讀。從基礎注釋到gāojí預測的全流程分析:
(1)肽段與參考蛋白組匹配,反推來源蛋白;
(2)使用NetMHCpan、IEDB、DeepHLApan等工具預測肽段-MHC親和力;
(3)提供新抗原篩選、突變肽識別、抗原優(yōu)先級打分;
(4)GO、KEGG通路富集,結合疾病數(shù)據(jù)庫進行功能注釋。
三、技術挑戰(zhàn):為什么免疫肽組分析不易?
免疫肽組檢測的核心在于從復雜背景中富集并鑒定低豐度肽段,這對技術平臺和數(shù)據(jù)解析能力提出了jígāo要求:
1、無酶切肽段:天然肽段并非源自yídànbáiméi切,質譜解析難度高;
2、肽段極短或變異:MHC限制的肽段常見突變、修飾,需高分辨率檢測;
3、樣本背景復雜:尤其是組織樣本中非特異性蛋白干擾顯著;
4、MHC亞型多樣性:不同個體MHC分型復雜,影響肽段呈遞譜系;
因此,標準化的富集流程、高靈敏的質譜平臺、以及jīngzhǔn的數(shù)據(jù)解碼算法是免疫肽組成功與否的關鍵。
百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos質譜儀及島津公司埃德曼降解測序系統(tǒng)對dànbáizhì序列進行分析,提供基于質譜的蛋白測序分析服務,包括對dànbáizhì的氨基酸組成分析,Nduāncèxù,Cduāncèxù和全序列分析,以及基于埃德曼降解的dànbáizhìN端序列分析服務。對于未知理論序列的dànbáizhì,提供基于從頭測序法的dànbáizhì從頭測序服務,對蛋白序列進行分析。
※服務優(yōu)勢:
1.采用目前世界上*的質譜儀器 Obitrap Fusion Lumos;
2.可實現(xiàn)對所測定靶蛋白序列 100% 的覆蓋;
3.可測定蛋白N端多達 70個氨基酸序列;
4.可測定多種形式的樣品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白條帶;
5.樣品用量低: 蛋白樣品僅需 5-10ug,即可完成檢測;
6.測序不受N端封閉,PEC和和糖基化等N端修飾的影響。
百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質譜平臺結合Nano-LC,提供定量蛋白zhìzǔxué、bǎxiàngdàn白zhìzǔxué、多肽組學、翻譯后修飾蛋白組學等多種蛋白zhìzǔxué分析服務。此外,百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4D蛋白zhìzǔxué服務,助力微量樣本蛋白組學、大樣本群醫(yī)學及高通量修飾組學等研究工作。
※服務優(yōu)勢:
1 .高通量定量蛋白分析:多對照組大規(guī)模實驗分析,發(fā)現(xiàn)新的生物標記物;
2.體內體外多種dànbáizhì標記方法,適用于分析組織、細胞、血液等多種樣品;
3.質譜分析靈敏度高,實驗結果重復度高;
4.可檢測較低豐度蛋白,線性范圍廣;
5.zhuānyè生物信息學分析,分析更系統(tǒng)準確。
百泰派克生物科技采用Fluidigm質譜流式系統(tǒng)進行單細胞質譜流式技術分析,采用金屬元素標記物(通常是金屬元素標記的特異抗體)標記細胞表面和內部的分子,然后用流式細胞原理分離單個細胞,再用電感耦合等離子體質譜(ICP-MS)分析單個細胞的原子質量譜,zuì后將原子質量譜數(shù)據(jù)轉換為細胞表面和內部的信號分子表達量。
※服務優(yōu)勢:
1.技術*,*技術空白
采用金屬標記抗體技術,避免了傳統(tǒng)流式熒光通道少且易相互影響的問題??稍趩渭毎麑用嫔蠈Χ喾N指標同時進行表征,百泰派克生物科技可做到同時檢測51個目標蛋白。
2.分析數(shù)量大,成本較低
單細胞RNAseq受成本等因素限制,所有樣本細胞匯總的分析數(shù)目一般在2x10^4個左右,而流式質譜技術一次(單樣本)就可分析至少10^5的細胞,實現(xiàn)了數(shù)量級的提高,且成本不高于單細胞RNAseq。
3.應用前景大
①流式質譜結果可以給出細胞亞群的變化,在臨床診斷、疾病機制研究等方面具有極大的研究前景;
②將金屬標簽技術與其他技術結合會有新應用方向。除常規(guī)蛋白外,質譜流式細胞技術還可用于蛋白翻譯后修飾;
③可檢測細胞存活率、細胞大小、mRNA轉錄子表達量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。
百泰派克生物科技的基于高精度質譜的免疫多肽組學分析及新抗原發(fā)現(xiàn)一站式解決方案包括我們專有的、高度敏感的免疫肽富集和鑒定方案。我們能夠幫助您實現(xiàn)10,000個以上I型多肽和10,000個以上II型多肽的鑒定和識別。通過我們優(yōu)化的高通量免疫多肽組學分析平臺進行免疫肽組學分析,可從zuì小的樣品材料中進行可重復的識別和定量。該服務可以應用于大規(guī)模的研究,旨在助力科研工作者尋找癌癥、免疫疾病及傳染病的解決方案,深入挖掘未知的靶標。
百泰派克基于高分辨率質譜技術,MALDI TOF,高效色譜分離技術,提供一系列完善的生物藥物分析方案,從dànbáizhì、多肽、抗體、疫苗等生物制品的氨基酸組成和一級結構分析,到產品變異性和純度分析。旨在提供優(yōu)質生物藥物分析服務,幫助生物醫(yī)藥生產商提高生物藥物品質。

北京百泰派克生物科技有限公司致力于為生物/制藥和醫(yī)療器械行業(yè)提供質量控制檢測和項目驗證等zhuānyè服務。公司實驗室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法規(guī)和指導原則,通過CNAS/ISO9001雙重質量體系認證,建立了完備的質量體系,數(shù)據(jù)冷熱/異地備份,設備定期計量/期間核查,軟件審計追蹤,為客戶提供一體化解決方案和技術服務,支持新藥研發(fā)、藥物申報注冊和生產放行。
1.公司采用ISO9001質量控制體系,zhuānyè提供以質譜為基礎的CRO檢測分析服務;
2.獲國家CNAS實驗室認可,為客戶提供符合全球藥政法規(guī)的藥物質量研究服務;
3.業(yè)務范圍覆蓋蛋白zhìzǔxué、多肽組學、代謝組學、生物藥物表征、單細胞分析、單細胞質譜流式、生信云分析以及多組學生物質譜整合分析等;
4.七大質量控制檢測平臺,滿足您一站式服務需求;
5.服務3000+企業(yè),10000+客戶的選擇;
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