ELISA試劑盒樣本處理步驟需根據(jù)樣本類型(如血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清等)進行針對性操作,核心流程包括?樣本收集、離心取上清、分裝保存?,并需注意避免溶血、反復(fù)凍融等干擾因素?。以下是常見樣本的處理方法:
血清樣本
采集與靜置?:使用無抗凝劑采血管采集血液,室溫靜置1-2小時或4℃過夜,傾斜放置以促進血清析出?。
離心?:4℃、1000-3000g離心20分鐘,取上清(建議兩次離心)?。
保存?:分裝后-80℃凍存,避免反復(fù)凍融?。
血漿樣本
抗凝處理?:使用含EDTA或肝素鈉的采血管采集血液,30分鐘內(nèi)完成離心?。
離心?:4℃、1000g離心15分鐘,取上清?。
保存?:分裝后-80℃凍存,避免長時間室溫放置?。
細胞培養(yǎng)上清
收集?:將上清轉(zhuǎn)移至離心管,1000g離心20分鐘去除細胞碎片?。
保存?:取上清分裝后-80℃凍存?。
組織/細胞裂解液
組織處理?:按1:9(重量體積比)加入裂解液,勻漿后13000rpm離心10分鐘取上清?。
細胞處理?:PBS清洗后裂解,離心取上清?。
質(zhì)量控制要點
稀釋?:按試劑盒要求用PBS+1%BSA稀釋樣本,避免基質(zhì)效應(yīng)。
干擾物處理?:高脂血/溶血樣本需超速離心或過濾,必要時添加抑制劑。
分裝保存?:短期4℃冷藏(≤24小時),長期-80℃凍存,避免反復(fù)凍融。
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